六维磷脂软胶囊的鉴别和含量测定方法技术

本发明专利技术公开了一种六维磷脂软胶囊的鉴别和含量测定方法。以高效液相色谱法鉴别烟酰胺、维生素Ｂ↓［１］、维生素Ｂ↓［２］、维生素Ｂ↓［６］和维生素Ｅ，并测定烟酰胺、维生素Ｂ↓［１］、维生素Ｂ↓［２］、维生素Ｂ↓［６］和维生素Ｅ的含量。本发明专利技术无须专门进行鉴别试验，利用含量测定时的高效液相色谱图即可，既方便又准确，而且省时、节约。方法学研究数据证明了本发明专利技术具有专属性，准确性高，可控性强。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种治疗肝病的药品的检测方法。
技术介绍
目前，肝病是我国的常见病，多发病。过量饮酒，药物滥用导致肝脏疾患逐年上升，临床迫切需要疗效确切、安全性高的药物以解除广大患者的痛苦。国家药典委员会批准命名为六维磷脂软胶囊，是一种安全有效的肝病治疗用药，为软胶囊，内容物为棕黄色油状液体。每粒胶囊含300mg大豆磷脂，6mg维生素B1，6mg维生素B2，6mg维生素B6，26μg维生素B1，6mg维生素E，30mg烟酰胺。国外的同类产品是肝得健(现名易善力)，一种德国A.Nattermann&Cie.GmbH生产软胶囊。中国药典标准中，烟酰胺鉴别方法为化学法、紫外光谱法和红外光谱法；维生素B1鉴别方法为化学法；维生素B2鉴别方法为化学法、紫外光谱法和红外光谱法；维生素B6鉴别方法为化学法、液相色谱法和红外光谱法；维生素E鉴别方法为化学法和红外光谱法。测定之前，样品均需经化学方法的预处理，经显色，测定吸收度，方法比较麻烦。这些鉴别方法麻烦、费时、浪费财力和物力。肝利健质量标准中，烟酰胺的鉴别方法为薄层色谱法；维生素B1和维生素B2的鉴别方法均为经前处理后，观察荧光颜色的物理方法；维生素B6的鉴别方法为化学方法；维生素E为气相色谱法。这些鉴别方法麻烦、费时、浪费财力和物力，而且需对五种物质分别进行鉴别，适用性差。烟酰胺和维生素B6的含量测定，均为紫外分光光度法。测定之前，样品均需经化学方法的前处理，经显色，测定吸收度，方法比较麻烦。而维生素B1和维生素B2的含量测定方法则均为荧光分光光度法。荧光分析法远不如高效液相色谱法普及，荧光法作为含量测定方法，因灵敏度较高，干扰因素也多，如溶剂、测定液的澄清度、所用玻璃仪器及吸收池的洁净度、包括温度对荧光强度影响甚大。综上所述，目前对六维磷脂软胶囊的含量测定方法，普遍存在着需要多种测定方法和仪器，对各组分分别进行测定。还未见简单方便的六维磷脂软胶囊的含量测定方法的报道，急需一种简便易行的六维磷脂软胶囊的含量测定方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于，提供一种。本专利技术旨在使六维磷脂软胶囊的鉴别与含量测定方法有较强的专属性和可靠性，灵敏、准确、省时并可控。为达到上述目的，本专利技术提出以下技术方案以高效液相色谱法(用PLC法)鉴别烟酰胺、维生素B1、维生素B2、维生素B6和维生素E，并测定烟酰胺、维生素B1、维生素B2、维生素B6和维生素E的含量。在含量测定项下记录的色谱图中，烟酰胺、维生素B1、维生素B2、维生素B6供试品各组分的主峰保留时间应分别与其对照品主峰的保留时间一致；并且在含量测定项下记录的色谱图中，维生素E供试品主峰的保留时间应与其对照品主峰的保留时间一致。在测定烟酰胺、维生素B1、维生素B2、维生素B6的含量时，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为容量比14∶6∶80的乙腈-甲醇-水，水中含0.0506％庚烷磺酸钠和0.12％三乙胺，并用磷酸调节至pH2.5；检测波长为273nm；烟酰胺、维生素B1、维生素B2和维生素B6的色谱峰之间的分离度大于1.5，理论板数按烟酰胺计算不低于1200。测定维生素E的含量时，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为容量比97∶3的甲醇-水；检测波长为280nm，理论板数按维生素E峰计算不低于3500。具体测定时，测定时采用避光操作；取装量差异项下的内容物适量，精密称定后置于容器中，加甲醇适量溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取对照品，按与供试品相同的制备方法，制得对照品溶液；精密量取对照品溶液和供试品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得。中国药典标准中和肝利健标准中维生素E的含量测定方法为气相色谱法。因为用高效液相色谱仪能够同时检测六维磷脂软胶囊中5种成分(烟酰胺、维生素B1、维生素B2、维生素B6和维生素E)的含量与鉴别，避免只为测定维生素E而购置气相色谱仪造成资金浪费，所以，新的维生素E的含量测定方法也为高效液相色谱法。含量测定方法的方法学研究结果表明，本方法同气相色谱法一样简便、灵敏，是可靠的检测方法。本专利技术无须专门进行鉴别试验，利用含量测定时的高效液相色谱图即可。即方便又准确，而且省时、节约。方法学研究数据证明了本专利技术具有专属性，准确性高，可控性强。具体实施例方式仪器，试药，样品及对照品1.1仪器和试药高效液相色谱仪 岛津LC-10AT检测器 岛津SPD-10A控制器 岛津Class-VP工作站色谱柱 ODSC18 5μm150×4.6mm乙腈、甲醇 均为色谱纯三乙胺、庚烷磺酸钠 均为分析纯1.2原料大豆磷脂 本公司生产国家标准(地标升部标)烟酰胺北京第二制药厂中国药典2000年版维生素B1 华中制药厂中国药典2000年版维生素B2 上海新亚制药厂中国药典2000年版维生素B6 上海新亚制药厂中国药典2000年版维生素B12 广东制药厂中国药典2000年版维生素E 河北制药有限公司 中国药典2000年版1.3样品六维磷脂软胶囊 由申请人自制1.4对照品烟酰胺、维生素B1、维生素B2、维生素B6对照品 取原料多次精制而得(含量测定按中国药典2000年版二部测定)烟酰胺 99.1％ 维生素B199.5％维生素B2100.0％维生素B699.3％维生素E 由中检所提供实施例1 烟酰胺、维生素B1、维生素B2、维生素B6含量测定方法色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为重量比为14∶6∶80的乙腈-甲醇-水混合物，水中含0.0506％庚烷磺酸钠和0.12％三乙胺，并用磷酸调PH值至2.5；检测波长为273nm。烟酰胺、维生素B1、维生素B2、维生素B6的色谱峰之间分离度1.8，理论板数按烟酰胺计算为1200。对照品溶液的配制 分别精密称取烟酰胺约60mg、维生素B1约12mg、维生素B2约12mg、维生素B6约12mg，置于200ml量瓶中，加乙醇100ml，加热溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置于50ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，作为混合对照品溶液(每1ml中含烟酰胺、维生素B1、维生素B2、维生素B6分别为30μg、6μg、6μg、6μg)，备用。供试品溶液的制备 精密称取装量差异项下的内容物适量(约相当于烟酰胺、维生素B1、维生素B2、维生素B6分别为30mg、6mg、6mg、6mg)，置于圆底烧瓶中，加乙醇约100ml，在水浴上加热回流至内容物溶解，放冷至室温，用流动相将溶液转移至200ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置于25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，高速离心，取上清液为供试品溶液。测定法 精密量取对照品溶液和供试品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得。流动相与检测波长的选则 通过参考2000版中国药典二部，有关文献(1、《药学进展》2003年第27卷第1期P44-47，作者王林、孙国庆、平其能；2、《中国公共卫生》1994年06期，作者王雅贤、李静；3、《药物分析杂志》1995年05期，作者黄冠文、薛卫平、于志超)及相关试验，最终选定上述色谱条件。在色谱图中，当流速为0.7ml/min时本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种六维磷脂软胶囊的鉴别和含量测定方法，其特征在于：以高效液相色谱法鉴别烟酰胺、维生素Ｂ↓［１］、维生素Ｂ↓［２］、维生素Ｂ↓［６］和维生素Ｅ，并测定烟酰胺、维生素Ｂ↓［１］、维生素Ｂ↓［２］、维生素Ｂ↓［６］和维生素Ｅ的含量。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：周有财，
申请(专利权)人：黑龙江澳利达奈德制药有限公司，
类型：发明
国别省市：93[中国|哈尔滨]