一种治疗哺乳动物中癌症的方法，所述方法包括施用治疗有效量的试剂，所述试剂诱导癌细胞中一个或多个密蛋白的表达。优选地，所述密蛋白是密蛋白－３，密蛋白－４，或密蛋白－９。在一个优选的方法中，将编码密蛋白的核酸在其中核酸被转染到癌细胞中并且所述密蛋白在细胞中产生的条件下施用给哺乳动物。还公开了一种诊断癌症的方法，所述方法包含确定密蛋白３，４或９在正常表达蛋白质的细胞中的存在。如果所述细胞没有表达密蛋白，那么其是癌性的。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
癌症形成自细胞的不受控制的增殖。所有的癌症都是威胁生命的。即使当癌症没有导致死亡时，不仅对于患者，还对于家庭、朋友和同事它是使人衰弱的。而且，太频繁地，癌症证明是致命的。个人和公众从导致所有过早死亡的显著部分的该类疾病中受到的损失是难以估计的。尽管在一些病例中已经开发了有效的治疗形式，但许多癌症对于现有的治疗来说仍是难以控制的。特别难治的是转移性癌症。这些癌症给患者造成了最高的风险，并且对于最佳预后，经常必须通过侵入性方法进行治疗，所述侵入性方法存在有害副作用的增加风险。因此，存在对于将那些可能转移的肿瘤与不可能转移的那些精确区分的方法的极大需求。而且，治疗转移性癌症的方法经常是不充分的，并且还有对于改进的抗转移药剂和治疗转移性癌症的方法的明显需要。转移性癌症起源自原发肿瘤。原发肿瘤的转移产生了继发瘤和播散性癌。众所周知的是原发和继发肿瘤流出大量细胞。这些流出的细胞可扩散到全身。例如，原发肿瘤可损伤周围淋巴或循环导管，使流出的细胞进入淋巴或循环系统，并加速它们在体内的传播。而且，通过癌性肿瘤的细胞的流出在外科手术和放疗过程中增加。大多数流出的细胞不形成新的肿瘤。为此，这些细胞必须克服一系列身体和生理障碍。事实上，对于转移的发生必须发生一系列的独特事件。原发肿瘤在身体上必须侵犯初生组织的胞间隙。特别地，其必须渗透组织的基膜。对于大多数转移来说，肿瘤必须损伤淋巴管或脉管壁血管的内皮细胞壁以提供针对流出细胞的通道。进入淋巴或血液的细胞必须经受得住血液动力学压力和在循环中的宿主的防御，而且，细胞必须沉积在循环系统中的新位点，一种明显包括聚集的血小板的过程。然后，细胞必须渗出导管到胞间隙。最终，其必须侵犯次级器官的胞间隙并在新的位点增殖。尽管转移的过程在生理上是复杂的，转移的总的模式对于许多类型的癌症来说是通用的。转移的过程还清楚地包括复杂的细胞内机制，其改变癌细胞以及它们与周围细胞和组织的相互作用。例如，癌细胞的特征在于粘着蛋白的异常表达，降解基质成分的酶，自分泌因子，配体反应性受体，血管发生因子和前列腺素，仅举几个例子(to name a few)。具体而言，起始肿瘤细胞移动的信号途径在侵入和转移的了解最少的方面中。目前，认为许多癌细胞的增殖取决于特异配体-受体相互作用。然而，迄今，使用这种范例，或转移的潜在机制的其它概念来开发预防或有效抑制转移性癌的转移的治疗是不可能的。该过程的复杂性涉及转移，并且对潜在分子机制的了解的缺乏，在一些病例中，使区分可能转移的肿瘤和不可能转移的那些特别困难。不能辨别肿瘤的转移潜能妨碍精确的预后并不可避免地导致太具攻击性或攻击性不足的治疗干预。临床上，在决定是否施用化学疗法还是将治疗限制在肿瘤的外科手术摘除中，确定肿瘤是否是转移性的也是重要的。而且，迄今对于所有类型的癌症来说，开发抑制或预防转移性肿瘤的传播的治疗仍是困难的或不可能的。显而易见地，对于精确确定肿瘤的转移潜能的方法和有效的抗转移组合物和方法仍存在着巨大需求。
技术实现思路
本专利技术通过提供抑制肿瘤细胞转移的方法来满足该需要，所述方法包括促进如下称为密蛋白-3(SEQ ID NOs1和2)，密蛋白-4(SEQ ID NOs3和4)和密蛋白-9(SEQ ID NOs5和6)的密蛋白蛋白质一个或多个的表达。通过检查密蛋白在正常和转化的细胞系中的表达的研究得到的令人惊讶的发现导致了本专利技术。所述结果显示了在来自正常和转化的细胞系的组织的密蛋白-3、密蛋白-4、密蛋白-9的表达中的清晰明确的差异。密蛋白3，4和9在正常组织中表达，但在转化的、癌细胞中不表达。因此，在一方面本专利技术提供诊断瘤形成的方法，其方法包括分析密蛋白-3、密蛋白-4、密蛋白-9的表达。如果这些基因是未表达的(under-expressed)，这说明转化的/癌细胞是转移细胞。方法包括检测密蛋白存在的核酸杂交技术，其包括RT-PCR方法和试剂盒。还要求诊断试剂盒，所述试剂盒是第一个容器和第二个容器的体外PCR分析试剂盒，所述第一个容器包括扩增所述密蛋白转录物或从那里产生的cDNA的PCR引物，所述第二个容器包括核酸标记物。还要求的是检测转移性癌症的抗体方法和试剂盒。所述试剂盒包括与哺乳动物的密蛋白-3、密蛋白-4或密蛋白-9多肽特异性结合的多肽、蛋白质、抗体或抗体片段。包括酶联的免疫吸附测定法，放射免疫测定和荧光免疫测定。瘤形成的诊断可以指瘤形成组织的起始检测或其可是区别转移性和非转移性瘤的步骤。用于本文时，涉及的术语“诊断”据此理解。所述方法是可特别适用于固体瘤，特别是恶性肿瘤，例如癌的诊断。进行测定的样品优选地是体组织或体液，并且不是体外培养的细胞。所述样品可是来自固体肿瘤的小片的组织或细胞的精细针状吸出物(FNA)。或者，其可以是血液或尿或另外的体液的样品，刮擦子宫颈或非侵入性获得的样品诸如唾液、尿液或大便。可通过应用一个或多个标记的特异性寡核苷酸探针来检测cDNA，对所述探针进行选择从而使其能够与扩增的cDNA序列的部分复性。或者可使用标记的寡核苷酸引物和/或标记的单核苷酸。存在许多可被应用的合适的可检测的标记，包括放射性标记。密蛋白-3、密蛋白-4和密蛋白-9的基因表达的水平可通过RT-PCR，或通过使用与密蛋白-3、密蛋白-4或密蛋白-9结合的标记的抗体来进行确定。例如，可用与密蛋白-3、密蛋白-4或密蛋白-9结合的标记的抗体对表达蛋白质的组织进行染色。如果组织正常地表达密蛋白，但是如通过缺乏产生所需染色剂或其它标记的所指示的，针对密蛋白的抗体没有与组织的表面结合，这说明组织没有表达密蛋白并且所述组织是癌性的并且是转移的。本专利技术还涉及治疗转移性癌症的方法，所述方法诱导密蛋白-3、密蛋白-4或密蛋白-9的表达。优选的实施方案包括用编码密蛋白-3(SEQ IDNOs5和6)，密蛋白-4(SEQ ID NOs7和8)或密蛋白-9(SEQ ID NOs17和18)的核酸转染癌细胞。优选地，核酸是包含在合适的载体诸如腺病毒载体(见美国专利号5,547,932)，腺病毒关联的病毒载体(见美国专利号6,541,258；美国专利号5,658,776和美国专利号6,346,415)或合适的反转录病毒载体(见美国专利号5,736,387)中的DNA。癌症是用于指各种类型的恶性肿瘤的任一个的通用术语，所述恶性肿瘤大多数侵犯周围组织，它们可转移到一些位点，可能在被尝试去除后复发并导致患者死亡，除非被充分治疗。癌症包括肉瘤和癌。转移性癌是可传播到身体其它部分的癌症。人密蛋白-3是多肽并具有如下的220个氨基酸残基MSMGLEITGTALAVLGWLGTIVCCALPMWRVSAFIGSNHTSQNIWEGLWMNCVVQSTGQMQCKVYDSLLALPQDLQAARALIVVAILLAAFGLLVALVGAQCTNCVQDDTAKAKITIVAGVLFLLAALLTLVPVSWSANTIIRDFYNPVVPEAQKREMGAGLYVGWAAAALQLLGGALLCCSCPPREKKYTATKVVYSAPRSTGPGASLGTGYDRKDYV(SEQ ID NO2)，其下划线部分是胞外结构域。人密蛋白-4是209个氨基酸的多肽。MASMGLQVMGIALAVL本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种试剂在制备用于治疗哺乳动物中癌症的药物中的应用，其中所述试剂诱导密蛋白－３，密蛋白－４或密蛋白－９在癌细胞中的表达。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：SC夸伊，崔坤元，
申请(专利权)人：纳斯泰克制药公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]
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