农药残毒快速检测方法及设备技术

一种检测灵敏度高、检测速度快、选择性高的适合我国国情的农药残毒检测方法。技术方案是：包括下列步骤：（１）制作下列试剂备用；（２）对照溶液测试；（３）样品溶液测试；（４）抑制率计算：根据公式抑制率＝［（Ａ↓［Ｃ］－Ａ↓［Ｓ］）／Ａ↓［Ｃ］］＊１００％，其中Ａ↓［Ｃ］对照溶液的吸光度，Ａ↓［Ｓ］为样品溶液的吸光度。适用于所述的农药残毒检测方法的农药残毒快速检测装置，其特征是包括光信号产生装置、光电信号转换装置、信号放大电路、测量装置和输出装置，光信号产生装置产生的光信号通过光电信号转换装置转换成电信号，电信号经过放大电路后，输入到测量装置进行检测，测量装置将检测结果通过输出装置进行输出。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于食品农药残毒检测方法领域，尤其是一种农药残毒快速检测方法及设备。
技术介绍
对农产品进行农药残毒检测是一件具有非常重要的事情。一方面，由于果蔬污染问题日益突出，严重影响人们身体健康。20世纪90年代以来，我国蔬菜和水果农药残留引起人畜死亡事件频繁发生。1992年至1996年全国26个省市发生农药中毒事件247349例，死亡24612人，我国每年因农药中毒的人数占世界同类事故人数的50％。随着人们生活水平的日益提高，要求农产品不仅品质要好，而且要卫生无污染，在国际市场上，许多发达国家和地区对进口农产品的农药残留量作出严格限制。由于我国许多农产品在一定程度上存在着农药残留，发达国家“绿色壁垒”也越来越高，致使农产品的出口创汇受到较大影响。目前，在国际上在农药残留快速检测方面有以下几种方法1、使用家蝇检测蔬菜中的残毒上世纪60年代后期，我国台湾采用生物测定方法进行农药残留检测，其原理是放饲高敏感性的家蝇于菜汁中，4-5小时后家蝇死亡率在10％以下即为合格。该方法的优点是过程简单、无须复杂仪器。缺点是检测时间较长，仅适用于田间未采收的蔬菜，且该方法只对少数药剂有反应，无法分辨残留农药的种类，准确性较低。2、酶免疫检测法酶联免疫吸附剂检测法，简称酶免疫法，是将抗原和抗体反应与现代科技手段相结合的微量分析法。该方法的优点在于可以减少样本前处理和纯化步骤，在短时间内可以分析大量样本，适合于做成试剂盒现场筛选，其缺点是精密度不高，抗体制备不易且有特异性。3、酶抑制法该方法是今年来迅速发展的一种农药残留检测方法，具有简便、快捷、准确等特点，适用于果蔬中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测。酶抑制法的基本原理是乙酰胆碱酯酶(AChE)+有机磷或氨基甲酸酯类农药-酶活性被抑制；乙酰胆碱酯酶(AChE)+样本，如活性被抑制则含有有机磷或氨基甲酸酯类农药，如活性不被抑制，则不含有此类农药。快速农药残毒筛选，是安排在基层第一线的检验技术。符合这种筛选的检测技术，必须简单易行，不需要大型仪器及复杂的设备，其成本低且检验的结果反映快，采用这种方法能够在较短时间内将“超毒”的果蔬筛选出来。今年来，我国也开展了对酶抑制法检测农药残留的研究，但多采用测定酶抑制反应的单点显色法，不易推广。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种检测灵敏度高、检测速度快、选择性高的适合我国国情的一种农药残毒检测方法。本专利技术的另一目的是提供一种农药残毒检测设备。本专利技术的技术方案是农药残毒快速检测方法，其特征是包括下列步骤(1)、制作下列试剂备用PH＝7.5的磷酸盐缓冲液、碘化硫代乙酰胆碱的底物、5，5’-二硫代双-2-二硝基苯甲酸的显色剂(DTNB)、从家蝇中提取的酶液乙酰胆碱脂酶(AChE)；(2)对照溶液测试在烧杯内加入3ml磷酸盐缓冲液，再加入50μl酶和50μl显色剂，置于温度25-35℃条件下培养12-18分钟，取出后加入50μl底物，倒入比色皿中，进行吸光度测试；(3)样品溶液测试选取来自不同植株叶片的样本，果菜从表皮1-1.5cm深处取样，叶菜类取2g样本，非叶菜类取4g样本，将取得的样本切碎，放入提取瓶内，加入20ml磷酸盐缓冲液，振荡1-2分钟，静置3-5分钟，于试管内分别倒入3ml样本提取液、50μl酶、50μl显色剂，置于温度25-35℃条件下培养12-18分钟取出，加入50μl底物，倒入比色皿中，进行吸光度测试；(4)抑制率计算根据公式抑制率＝*100％，其中AC对照溶液的吸光度，AS为样品溶液的吸光度。优选，在对照溶液测试中，混合液体的培养温度为30℃、培养时间为15分钟。优选，在样品溶液测试中，混合液体的培养温度30℃，培养时间为15分钟。适用于农药残毒检测方法的农药残毒快速检测装置，其特征是包括光信号产生装置、光电信号转换装置、信号放大电路、测量装置和输出装置，光信号产生装置产生的光信号通过光电信号转换装置转换成电信号，电信号经过放大电路后，输入到测量装置进行检测，测量装置将检测结果通过输出装置进行输出，其中光信号产生装置包括光源、滤光片、透镜和比色皿组成，光源发出的光依次通过滤光片、透镜和比色皿后，照射到光电信号转换装置上，所述光电信号转换装置为光电池，测量检测装置为CPU及A/D转换电路。所述的输出装置包括显示器、打印机和/或网络连接装置。本专利技术的效果是农药残毒快速检测方法，包括下列步骤(1)、制作下列试剂备用；(2)对照溶液测试；(3)样品溶液测试；(4)抑制率计算根据公式抑制率＝*100％，其中AC对照溶液的吸光度，AS为样品溶液的吸光度。本专利技术的方法是根据有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制乙酰胆碱酯酶的活性，使昆虫中毒致死的这一毒理学原理对农药残留进行“快速检测”。如果果蔬的提取液中不含有农药或残留量很低，酶的活性不被抑制，加入的底物就被水分解，水解产物与加入的显色剂发生颜色反应或水解产物本身有颜色。如果蔬菜的提取物中含有农药并残留量较高时，酶的活性受抑制，底物就不会被水解，当加入显色剂时就不显色或颜色变化很小。用适用于农药残毒检测方法的农药残毒快速检测装置来测定吸光度的变化，就可以判断蔬菜中有机磷或氨基甲酸酯类农药残留情况。本专利技术的方法适应我国果、蔬生产销售的特点，可以对含有农药残留的果、蔬进行粗筛，将一部分含有农药残毒的果、蔬控制在市场之外，避免农药中毒事故发生。适用于农药残毒检测方法的农药残毒快速检测装置，包括光信号产生装置、光电信号转换装置、信号放大电路、测量装置和输出装置，光信号产生装置产生的光信号通过光电信号转换装置转换成电信号，电信号经过放大电路后，输入到测量装置进行检测，测量装置将检测结果通过输出装置进行输出。农药残毒快速检测装置不仅适用在大的蔬菜批发市场、重要蔬菜产区建立快速检测站，也适用于乡(镇)村庄、大型公共食堂，甚至可以在菜贩子交易现场建立流动检测站。可以真正实现到田间速测，能预防人畜误食含高毒、高残留农药的蔬菜水果，确保人们获得健康安全的饮食。下面结合附图和实施例对本专利技术做进一步的说明。附图说明图1是本专利技术的农药残毒检测装置的光路图；图2是本专利技术的农药残毒检测装置电路框图；图3是本专利技术的农药残毒检测装置的电路原理图。具体实施例方式实施例1农药残毒快速检测方法，其特征是包括下列步骤(1)、制作下列试剂备用PH＝7.5的磷酸盐缓冲液、碘化硫代乙酰胆碱的底物、5，5’-二硫代双-2-二硝基苯甲酸的显色剂(DTNB)、从家蝇中提取的酶液乙酰胆碱脂酶(AChE)；(2)对照溶液测试在烧杯内加入3ml磷酸盐缓冲液，再加入50μl酶和50μl显色剂，置于温度25-35℃条件下培养12-18分钟，取出后加入50μl底物，倒入比色皿中，进行吸光度测试；(3)样品溶液测试选取来自不同植株叶片的样本，果菜从表皮1-1.5cm深处取样，叶菜类取2g样本，非叶菜类取4g样本，将取得的样本切碎，放入提取瓶内，加入20ml磷酸盐缓冲液，振荡1-2分钟，静置3-5分钟，于试管内分别倒入3ml样本提取液、50μl酶、50μl显色剂，置于温度25-35℃条件下培养12-18分钟取出，加入50μl底物，倒入比色皿中，进行吸光度测试；(4)抑制率计算根据公式，抑制率＝*100％，其中AC对照溶液的吸光度，AS为样品本文档来自技高网...

【技术保护点】
农药残毒快速检测方法，其特征是包括下列步骤：（１）、制作下列试剂备用：ＰＨ＝７．５的磷酸盐缓冲液、碘化硫代乙酰胆碱的底物、５，５’－二硫代双－２－二硝基苯甲酸的显色剂（ＤＴＮＢ）、从家蝇中提取的酶液乙酰胆碱脂酶（ＡＣｈＥ）； （２）对照溶液测试：在烧杯内加入３ｍｌ磷酸盐缓冲液，再加入５０μｌ酶和５０μｌ显色剂，置于温度２５－３５℃条件下培养１２－１８分钟，取出后加入５０μｌ底物，倒入比色皿中，进行吸光度测试；（３）样品溶液测试：选取来自不同植株叶片的样本 ，果菜从表皮１－１．５ｃｍ深处取样，叶菜类取２ｇ样本，非叶菜类取４ｇ样本，将取得的样本切碎，放入提取瓶内，加入２０ｍｌ磷酸盐缓冲液，振荡１－２分钟，静置３－５分钟，于试管内分别倒入３ｍｌ样本提取液、５０μｌ酶、５０μｌ显色剂，置于温度２５－３５℃条件下培养１２－１８分钟取出，加入５０μｌ底物，倒入比色皿中，进行吸光度测试；（４）抑制率计算：根据公式抑制率＝［（Ａ↓［Ｃ］－Ａ↓［Ｓ］）／Ａ↓［Ｃ］］＊１００％，其中Ａ↓［Ｃ］对照溶液的吸光度，Ａ↓［Ｓ］为样品溶液的吸光度 。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：赵建庄，李玉江，赵志文，柴丽娜，史亚军，范双喜，黄志鹏，
申请(专利权)人：赵建庄，李玉江，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]