一种提高动物早期胚胎发育药物及其应用制造技术

本发明专利技术属于动物细胞或组织培育技术领域，公开了一种提高动物早期胚胎发育药物及其应用，通过抑制氧化应激提高动物早期胚胎发育；所述6‑Gingerol应用剂量为：5～10μM。本发明专利技术还提供一种6‑Gingerol在制备提高猪早期胚胎发育药物上的用途；所述6‑Gingerol由生姜提取的生物活性成分制成。本发明专利技术分析的6‑Gingerol是天然的含抗氧化成分的植物提取物，首次用于动物早期胚胎的分析中，通过分析发现体外培养猪早期胚胎期间添加5～10μM 6‑Gingerol能够提高胚胎发育以及克服长期使用造成身体机能紊乱的情况。

【技术实现步骤摘要】
一种提高动物早期胚胎发育药物及其应用
本专利技术属于动物细胞或组织培育
，尤其涉及一种提高动物早期胚胎发育药物及其应用。
技术介绍
目前，猪胚胎体外培养系统包括卵母细胞的体外成熟和激活以及体外培养，目前被广泛用于研究体外异种克隆器官移植，探究人类辅助生殖技术和动物生产技术。即使体外模拟体内最适胚胎生长环境，胚胎质量和后续发育能力仍然较低。因此，需要进一步开发新的方法改善猪卵母细胞和早期胚胎质量。众所周知，猪的胚胎体外生产成功率非常低。其潜在原因之一是高氧环境对猪胚胎的影响。正常生殖道中的氧气浓度低于空气中的氧气浓度，高于机体内部的氧气会聚集成活性氧(ROS)。ROS聚集产生的氧化应激对细胞容易造成DNA损伤，蛋白的氧化修饰。因此，在胚胎发育过程中添加抑制氧化的物质非常关键。目前，针对提高猪早期胚胎发育进行了大量的科学研究，开发了许多提高猪早期胚胎发育的药物，但是有些药物长期使用会造成动物机体正常生理紊乱如褪黑素。因此，开发更多可用于临床的天然抗氧化剂对于提高动物体外培养胚胎以及动物繁殖方面是非常重要的。生姜一直被用于食品添加剂，饮料和食品(糖，果酱和咸菜)中。则说明长期使用对人体无明显副作用。在亚洲等地区，生姜一直是用于治疗关节炎，糖尿病和月经不调等疾病的药物之一。从生姜中提取的6-gingerol具有最丰富的生物活性化合物与各种药理作用，包括抗氧化，调节凋亡与自噬，促进细胞增殖，维护线粒体功能。进一步研究发现6-gingerol通过调节MAPK信号通路发挥药理作用。目前，对6-gingerol的生物活性研究非常全面，但是有关它对生殖系统的影响的研究非常少，特别是早期胚胎方面。通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：高氧环境对猪胚胎的影响，猪的胚胎体外生产成功率非常低。目前，研究的药物虽能够提高早期胚胎发育，但是对动物机体带来其他副作用，例如褪黑素。解决以上问题及缺陷的难度为：能够促进动物胚胎体外发育但是能够带来其他副作用，影响正常生理过程。解决以上问题及缺陷的意义为：褪黑激素都已被成功用于提高胚胎发育，但研究表明，褪黑激素的使用可以延长睡眠时间。向胚胎培养基中添加甜菜碱可以减轻乙醇对小鼠胚胎发育的伤害，但仅添加甜菜碱则没有明显变化。因此，开发更多可用于改善早期胚胎发育质量并阐明其作用机理的添加剂具有重要意义。
技术实现思路
为了解决现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种提高动物早期胚胎发育药物及其应用。所述生姜提取的生物活性成分为6-Gingerol是从selleck公司购买，利用生姜提取的生物活性成分制成，本专利技术首次用于动物早期胚胎发育的分析。本专利技术是这样实现的，一种6-Gingerol在制备提高动物早期胚胎发育药物上的用途。进一步，所述6-Gingerol由生姜提取的生物活性成分制成。进一步，所述6-Gingerol的剂量为：5～10μM。本专利技术的另一目的在于一种6-Gingerol在制备提高猪早期胚胎发育药物上的用途。进一步，所述6-Gingerol由生姜提取的生物活性成分制成。进一步，所述6-Gingerol的剂量为：5～10μM。本专利技术另一目的在于提供一种通过提高细胞内GSH水平，抑制氧化应激提高猪早期胚胎发育的方法具体包括：步骤一、从当地屠宰场获取猪卵母细胞后收集及放入体外成熟培养液(IVM)中体外成熟；步骤二、IVM中培养42-44h后进行卵母细胞的孤雌激活；步骤三、激活后的卵母细胞转移至细胞松弛素B中3-5h；步骤四、激活后的卵母细胞转移至含有5～10μM6-Gingerol的体外培养液中培养；步骤五、卵母细胞生长至4-细胞阶段时，进行GSH荧光染色。本专利技术提供的通过抑制氧化应激提高猪早期胚胎发育的方法在猪早期胚胎体外培养过程中添加6-Gingerol至IVC中促进猪早期胚胎中应用。通过分析表明，添加5～10μM6-Gingerol后能够提高猪早期胚胎的发育。结合上述的所有技术方案，本专利技术所具备的优点及积极效果为：第一，本专利技术分析天然的含抗氧化成分的植物提取物，克服长期使用造成身体机能紊乱的情况。第二，6-Gingerol广泛用于食品以及食物添加剂中，对动物机体无明显副作用，且能够提高猪早期胚胎发育。第三，添加6-Gingerol能够显著提高谷胱甘肽(GSH)水平。本专利技术分析应用的6-Gingerol是天然的含抗氧化成分的植物提取物，首次用于动物早期胚胎的分析中，通过分析发现体外培养猪早期胚胎期间添加5～10μM6-Gingerol能够提高胚胎发育以及克服长期使用造成身体机能紊乱的情况。可优选5μM6-Gingerol。附图说明为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案，下面将对本申请实施例中所需要使用的附图做简单的介绍，显而易见地，下面所描述的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下还可以根据这些附图获得其他的附图。图1是本专利技术实施例提供的通过抑制氧化应激提高猪早期胚胎发育的方法流程图。图2是本专利技术实施例提供的猪卵母细胞4-细胞期GSH染色图。图3是本专利技术实施例提供的定量分析猪卵母细胞4-细胞期GSH水平分析图。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种通过抑制氧化应激提高猪早期胚胎发育的方法，下面结合附图对本专利技术作详细的描述。对于胚胎发育和动物繁殖技术来说，胚胎的生理学研究极为重要，包括胚胎移植，克隆和转基因。猪早期胚胎比其他物种(如牛和小鼠)对培养环境更敏感，例如活性氧水平(ROS)、营养物质含量、环境温度和湿度以及渗透压。因此，优化胚胎生产过程是提高猪后代生产能力的重要指标。以往的分析表明，在胚胎发育期间，在体外培养液中添加抗氧化剂可以有效的降低细胞有氧代谢过程中产生的ROS，从而提高胚胎发育能力。目前，阿魏酸，绿原酸，番茄红素，白藜芦醇和褪黑激素都已被成功用于提高胚胎发育。本专利技术提供一种生姜提取的生物活性成分6-Gingerol在制备提高动物早期胚胎发育药物上的用途。所述6-Gingerol由生姜提取的生物活性成分制成。所述6-Gingerol的剂量为：5～10μM。通过提高细胞内GSH水平进行动物早期胚胎发育培养。本专利技术还提供一种生姜提取的生物活性成分6-Gingerol在制备提高猪早期胚胎发育药物上的用途。所述6-Gingerol由生姜提取的生物活性成分制成。所述6-Gingerol的剂量为：5～10μM。本专利技术提供一种通过提高细胞内GSH水平，抑制氧化应激提高动物早期胚胎发育的方法具体包括以下步骤：S101、猪卵母细胞的收集及体外成熟。S102、卵母细胞的孤雌激本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种6-Gingerol在制备提高动物早期胚胎发育药物上的用途。/n

【技术特征摘要】
1.一种6-Gingerol在制备提高动物早期胚胎发育药物上的用途。


2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述6-Gingerol由生姜提取的生物活性成分制成。


3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述6-Gingerol的剂量为：5～10μM。
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【专利技术属性】
技术研发人员：高妍，彭艳侠，张嘉保，姜昊，陈承祯，袁宝，付旭煌，王莹，罗丹，王文华，俞文杰，李生鹏，肖月，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：吉林;22