松鼠葡萄球菌F-E8-1的培养方法及应用技术

本发明专利技术属于微生物培养技术领域，具体涉及一种能耐受高盐环境的松鼠葡萄球菌的培养方法，还涉及上述的松鼠葡萄球菌在处理发酵生产废水中的应用。能耐受高盐环境的松鼠葡萄球菌（

【技术实现步骤摘要】
松鼠葡萄球菌F-E8-1的培养方法及应用
本专利技术属于微生物培养
，具体涉及一种能耐受高盐环境的松鼠葡萄球菌的培养方法，还涉及上述的松鼠葡萄球菌StaphylococcussciuriF-E8-1在处理发酵生产废水中的应用。
技术介绍
关于松鼠葡萄球菌，CN103865859A披露了一株松鼠葡萄球菌、疫苗及其制备方法，其中的松鼠葡萄球菌主要是作为灭活疫苗所使用的；期刊文献中对于松鼠葡萄球菌有过以下的披露：蓝蔚青等人在《复合生物保鲜剂对松鼠葡萄球菌的抑菌性及其作用机理研究》一文中，披露了以冷藏带鱼中分离出的革兰氏阳性优势菌——松鼠葡萄球菌（Staphylococcussciuri）为试验菌,研究复合生物保鲜剂（配比浓度为：壳聚糖10.0g/L,溶菌酶0.3g/L与茶多酚3.0g/L）对松鼠葡萄球菌的抑菌效果与作用机理。关于松鼠葡萄球菌菌株的培养方法、以及其能作用于废水尤其是高盐发酵废水并且能针对废水进行有效的处理，目前鲜有文献披露。而关于高盐发酵废水，CN109136095A披露了一种味精发酵生产废水，采用三种微生物，能够有效地利用废水来制备微生物蛋白，同时净化了废水，但是对于这三种微生物是否具有高耐盐性能以及在高盐环境下是否也具有良好的净化废水的能力，上述的专利并未涉及。而事实上，在有机酸及氨基酸发酵生产废水中，盐含量非常高，若采用微生物处理上述废水，微生物必须具有优异的耐盐性能。
技术实现思路
为了解决上述问题，本专利技术提供了一种耐盐高效降解菌松鼠葡萄球菌（Staphylococcussciuri）F-E8-1的培养方法，通过该培养方法所获得的菌株可在高盐环境下快速降解有机酸及氨基酸发酵生产废水中的残糖，用于处理高盐废水耗时短，效果好，且处理成本低。固液分离除去菌体后，可浓缩回收发酵废水所含粗盐。本专利技术通过向高盐发酵废水处理系统中投加耐高盐高效降解的松鼠葡萄球菌，加速微生物对污染物的降解，提高系统的生物处理效率，达到快速降解发酵废水中残糖的目的，并通过固液分离除去菌体后，浓缩回收发酵废水所含粗盐。本专利技术所提供的能耐受高盐环境的松鼠葡萄球菌（Staphylococcussciuri）F-E8-1，该菌株已于2020年3月6日保藏于中国典型微生物保藏中心，保藏号编号CCTCCNO:M2020052，保藏地址：中国湖北省武汉市武汉大学保藏中心202号。松鼠葡萄球菌StaphylococcussciuriF-E8-1是通过如下的步骤培养获得的：将LB平板上的松鼠葡萄球菌StaphylococcussciuriF-E8-1单菌落接种于种子培养基中，在37～42℃下培养12～18h，然后按照4～6%的接种量接入发酵培养基中，在37～42℃下培养96～120h。松鼠葡萄球菌StaphylococcussciuriF-E8-1的种子培养基由以下重量百分比的原料组成：酵母粉0.35～0.65%，蛋白胨0.8～1.2%，氯化钠0.35～0.65%。松鼠葡萄球菌StaphylococcussciuriF-E8-1的发酵培养基由以下重量百分比的原料组成：含有20～30wt%硫酸铵的谷氨酸废液，其余为无菌水，采用1MNaOH调节pH值为7.0～7.5。松鼠葡萄球菌StaphylococcussciuriF-E8-1在发酵培养基中培养后，废水中残糖降低至0.2～0.5%。通过上述方法培养获得的松鼠葡萄球菌StaphylococcussciuriF-E8-1菌株，具有如下的特点：在LB培养基中，于37℃培养24h后，培养基中呈现浅黄色不透明的单菌落，表面湿润有光泽，边缘为光滑，直径3-4mm；革兰氏染色阳性G+,细胞为球状，无芽孢；氧化酶实验阳性，过氧化氢酶实验阳性，明胶液化实验阳性，淀粉酶实验阴性，葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、半乳糖、甘露糖实验均为阳性，甘露醇、山梨醇、乳糖、阿拉伯糖、精氨酸、木糖鼠李糖实验均为阴性。上述的菌株在高盐环境下快速降解有机酸和/或氨基酸发酵生产废水中的残糖中的应用，是本专利技术所要重点保护的范围。在应用过程中，调节高盐发酵废水氨基氮含量至0.5～1.0%，pH在3.0～9.0之间，将松鼠葡萄球菌株按照0.1～1.0%的接种量接种至废水中，于25～37℃通风培养24～72h。温度、接种量和培养时间对降解量的影响显著。温度过低大大延长发酵时间。接种量和培养时间过长会直接增加生产成本。发酵废水氨基氮含量和pH同样会对菌体总量造成影响。温度低会延长发酵时间，而温度过高则会对微生物产生有害影响，最佳发酵温度为25～37℃之间；接种量增加到一定程度后,对系统降解速度和降解效果影响变化不大。最佳接种量在0.1～1%之间。上述的发酵生产废水为谷氨酸、苏氨酸、色氨酸、赖氨酸、柠檬酸、苹果酸发酵完毕后各工艺环节综合产生的浓缩或未浓缩废水，其盐分含量在5～40%之间。培养至废水残糖≤0.2%时停止，固液分离除去菌体后，浓缩回收发酵废水所含粗盐。采用板框压滤、碟片离心、管式离心中的任一种方式进行固液分离。固液分离时，板框滤布目数≥200目，离心机离心力≥6000g。粗盐回收时，采用先多效蒸发或强制循环蒸发，随后流化床干燥，干燥温度60～120℃。本专利技术的有益效果在于：（1）本专利技术通过微生物菌株来对特定的发酵生产废水进行处理，避免了物理和化学处理方法中工艺流程长、占地大、资源利用差、处理费用高的缺点；具有运作成本低、消耗少、效率高、工适应性强、运行较为稳定、操作管理便捷等特点等显著优点；（2）本专利技术所提供的松鼠葡萄球菌，具有优异的耐高盐性能，在盐份含量高的废水水体处理过程中，处理效果好；（3）采用本专利技术的菌株处理高盐废水，耗时短，且处理效果佳；（4）通过本专利技术的松鼠葡萄球菌菌株处理后的废水，经过固液分离除去菌体后，可浓缩回收发酵废水所含粗盐。附图说明图1为松鼠葡萄球菌镜检图片；图2为松鼠葡萄球菌菌落图片。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作更进一步的说明，以便本领域的技术人员更了解本专利技术，但并不因此限制本专利技术。实施例1A松鼠葡萄球菌（Staphylococcussciuri）F-E8-1，其培养方法如下：将LB平板上的松鼠葡萄球菌（Staphylococcussciuri）F-E8-1单菌落接种于的种子培养基中，在40℃下培养15h，后按照5%的接种量接入发酵培养基中，在40℃下培养110h，废水中残糖可降低至0.25%左右。种子培养基由以下重量百分比的原料组成：酵母粉0.45%，蛋白胨0.9%，氯化钠0.55%；松鼠葡萄球菌（Staphylococcussciuri）F-E8-1的发酵培养基由以下重量百分比的原料组成：含有25%wt硫酸铵的谷氨酸高浓废液，其余为无菌水，采用1MNaOH调节pH值为7.0左右。实施例1B松鼠葡萄球菌（Staphylo本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.松鼠葡萄球菌

【技术特征摘要】
1.松鼠葡萄球菌StaphylococcussciuriF-E8-1的培养方法，其特征在于，所述的菌株已于2020年3月6日保藏于中国典型微生物保藏中心，保藏号编号CCTCCNO:M2020052；
所述的松鼠葡萄球菌StaphylococcussciuriF-E8-1是通过如下的步骤培养获得的：将LB平板上的松鼠葡萄球菌StaphylococcussciuriF-E8-1单菌落接种于种子培养基中，在37～42℃下培养12～18h，然后按照4～6%的接种量接入发酵培养基中，在37～42℃下培养96～120h。


2.如权利要求1所述的松鼠葡萄球菌StaphylococcussciuriF-E8-1的培养方法，其特征在于，所述松鼠葡萄球菌StaphylococcussciuriF-E8-1的种子培养基由以下重量百分比的原料组成：酵母粉0.35～0.65%，蛋白胨0.8～1.2%，氯化钠0.35～0.65%。


3.如权利要求1所述的松鼠葡萄球菌StaphylococcussciuriF-E8-1的培养方法，其特征在于，所述松鼠葡萄球菌StaphylococcussciuriF-E8-1的发酵培养基由以下重量百分比的原料组成：含有20～30wt%硫酸铵的谷氨酸废液，其余为无菌水，采用1MNaOH调节pH值为7.0～7.5。


4.如权利要求1所述的松鼠葡萄...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵晨，岳秋林，赵林，
申请(专利权)人：山东卓苒生物科技有限公司，齐鲁工业大学，
类型：发明
国别省市：山东;37