评价鱼产品的鲜度的方法技术

一种评价鱼产品的鲜度的方法，其通过从鱼产品上切下少量样品，加入包含细胞－渗透性染料和细胞－不渗透性荧光染料至少之一的染色剂到所述样品上，将所述样品温育达预定的持续时间，并且根据从样品发射的荧光来确定所述鱼产品的鲜度来进行。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请该专利申请要求提交于2004年3月12日的临时专利申请号60/552,778和提交于2004年3月15日的临时专利申请号60/553,059的优先权，将其全部公开内容特此清楚地并入作为参考。
技术介绍
1.专利
本专利技术涉及检测和评价基于蛋白质的产品的鲜度或降解或酸败的程度，作为基于蛋白质的产品的质量程度的指示。2.相关领域的描述评价鱼的鲜度或酸败程度的传统方法包括感觉评价(外观，触摸和嗅觉)。该方法是主观的并且会产生争论。美国专利号5,744,321公开了快速评价鱼，诸如鳕鱼(codfish)、鲇鱼(catfish)和美洲拟鲽(winter flounder)的细菌降解程度的比色方法，其通过将鱼肉与细菌营养肉汤混合，并且将提取物与水溶性色素原诸如离子化的四唑染料盐反应来进行，所述离子化的四唑染料盐与鱼细菌进行还原反应来产生水不溶性的甲染料或着色的反应产物。接下来，将表面活性剂加入以辅助溶解形成的甲染料，并且产生溶菌作用和终止反应，将脂族醇溶剂加入溶解形成的甲染料或着色的反应产物，并防止随时间进一步的分解和暗色化。溶解的反应产物具有一定颜色，所述颜色根据鱼样品的细菌种群而强化并且可以通过与低、中等和高细菌种群的标准颜色图指示的视觉比较来比色地进行评价。该方法是复杂的因为其包括相当多的步骤和试剂。因此，对于鱼供应者、饭店、招待公司和食品服务公司等，仍旧存在提供精确、方便和客观的的需要。专利技术概述本专利技术提供，其包括从鱼产品切割下小量样品；加入有效量染色试剂到样品上，所述染色试剂包括细胞-渗入染料和细胞-不渗透的荧光染料的至少一种；将与染色试剂一起加入的样品温育达预定的持续时间；和根据下列参数的至少其中之一来确定鱼产品的鲜度从被温育的样品发射出的第一荧光的强度，从被温育的样品中发射的第二荧光的强度，从样品的顶部开始到检测第一荧光的样品的最远点的第一距离，和从样品的顶部开始到检测第二荧光的样品的最远点的第二距离。在存在细胞内酯酶活性的情况下，将细胞-渗透性染料转化为发生第一荧光的化合物。细胞-不渗透荧光染料不穿过活细胞的完整的膜，但是可以渗透细胞被损坏的膜并且发射第二荧光。当染色试剂包括细胞-渗透性染料和细胞-不渗透性染料两者时，第一荧光应与第二荧光区分开，即，它们发射不同的荧光颜色。细胞渗透性染料的实例包括钙荧光素AM和C12-刃天青。细胞-不渗透染料的实例包括EthD-1同型二聚体，Sytox绿色染料，和YoYo-1染料。此外，可以将细胞-渗透性染料诸如钙荧光素AM和C12-刃天青与锥虫蓝染料组合使用。锥虫蓝染料染色取决于死细胞的膜完整性的损失。锥虫蓝染料在正常情况下，被完整的细胞膜排除在外。通常，当细胞死亡时，它们对于锥虫蓝染料是可渗透的。因此，锥虫蓝染料可以结合细胞-渗透性染料来猝灭死细胞的荧光。加入锥虫蓝后的荧光的减少可以作为死细胞的测量。按照本专利技术的一个实施方案，测定的步骤可以通过将至少一个参数与在鲜度和至少一个参数之间的预先建立的相关性进行比较来进行。第一荧光和第二荧光的强度可以由数字装置进行量化，并且预先建立的相关性可以根据第一荧光和第二荧光的量化的强度来建立。按照本专利技术的另一个实施方案，第一荧光和第二荧光可以由光学装置记录在图像中，并且在鲜度和第一荧光和第二荧光的至少一个的强度之间的预先建立的相关性可以在标准颜色图中进行描述。优选地，染色试剂包括有效量的钙荧光素AM和有效量的EthD-1同型二聚体。接着，第一产物的鲜度可以根据从样品中发射的红色(EthD-1同型二聚体)荧光和绿色(钙荧光素)荧光来进行测定。按照本专利技术的又一个实施方案，在染色试剂中包含的细胞一不渗透性荧光染料是锥虫蓝染料。接着，第一产物的鲜度可以根据在样品中出现的蓝色来确定。优选地，鲜度根据锥虫蓝染料透入样品的距离来进行确定，其中更新鲜的鱼对应更短的渗透距离。通过所考虑的随后的详细描述结合附图，本专利技术的其它目的和特点将变得显而易见。然而，要理解的是，图仅出于举例说明的目的进行设计，而不被视为对本专利技术的限制，本专利技术的限制应该参考后附的权利要求。还应该理解的是，图不一定按规定比例来绘出，除非另外指出，它们仅倾向于概念性地举例说明本文所述的结构和方法。附图简述在附图中附图说明图1显示在样品中所用的取样管。图2显示通过使用活着的/死亡的荧光测定，于1℃并且在不同的贮存日收集的鲑鱼(salmon)样品的荧光图像。图3显示通过使用活着的/死亡的荧光测定，在1℃贮存并且在第1天和第8天收集的鲑鱼样品的荧光图像。图4举例说明这样的相关性，所述相关性为鲑鱼样品的鲜度和从样品的顶部开始到检测绿色荧光的样品中的最远点的距离与从样品的顶部开始到检测红色荧光的样品中的最远点的距离的比率之间的相关性。图5显示从活的虹鳟鱼(raibow trout)收集的样品的荧光图像。图6显示从虹鳟鱼产品收集的样品的荧光图像，所述虹鳟鱼产品在4℃贮存了达7天。图7举例说明这样的相关性，所述相关性为虹鳟鱼样品的鲜度和从样品的顶部开始到检测绿色荧光的样品中的最远点的距离与从样品的顶部开始到检测红色荧光的样品中的最远点的距离的比率之间的相关性。图8举例说明这样的相关性，所述相关性为多佛鳎鱼(Dover sole)样品的鲜度和从样品的顶部开始到检测绿色荧光的样品中的最远点的距离与从样品的顶部开始到检测红色荧光的样品中的最远点的距离的比率之间的相关性。图9显示通过使用活着的/死亡的荧光测定，多佛鳎鱼样品从染料添加到16分钟的时间-推移图像，所述多佛鳎鱼样品在1℃贮存了达5天。图10显示鲑鱼样品的荧光图像，所述鲑鱼样品在1℃贮存并且在贮存的第1天和第5天收集。图11举例说明通过使用锥虫蓝测定，锥虫蓝染色染料渗透到鲑鱼样品中的渗透深度，所述鲑鱼样品贮存于1℃，并且在贮存的第1天，第4天，和第7天进行收集。图12举例说明锥虫蓝染料渗透到鲑鱼样品中的距离，所述鲑鱼样品在1℃从贮存的第1天到第8天进行收。本专利技术优选实施方案的详述实验材料和方法鲑鱼片将两个包装的在良好状态下的冷冻鲑鱼片切成8个部分。当仍在冷冻状态时，每个部分是约60克。将四个部分置于持续温度为1℃(+/-0.5℃)的冷室中，将其它的四个部分置于维持在4℃的标准实验室电冰箱中。将所有的这些部分贮存在可再密封的袋中以防止当不取样时氧化和脱水。取样方法每天收集鲑鱼片的样品并且观察变化。对于精确的测量，一致的样品的大小是重要的。制作取样的工具来从鱼钻出样品。用在本实验中的工具是clear Lexan(聚碳酸酯树脂)管，所述管具有4.8mm的外部直径，2.1mm的内部直径，和90mm的长度。将管的一端削平以形成切割表面(见图1)。当插入鱼产品的肉中时，将部分的肉挤压到管的底部开口。接着，通过轻轻扭曲和提高，将样品移动并保持在管中。可以将具有2mm外部直径的施用器用于轻轻敲打样品并去除任何空气隙。所述管优选地被设计具有食品安全质量并且是在视觉上透明的。使用其它的丙烯酸类或聚碳酸酯材料也可以是适合的。因此，通过这样的工具获得的样品具有约2.1mm×～5到25mm的大小。该取样方法具有一些优点，包括·小的，可再现的样品大小·标准样品大小·整洁的标记容器·廉价、一次性的无毒工具·牢固·可通过管观察的样品染色，温育可本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种评价鱼产品的鲜度的方法，其包括：　　　　从鱼产品上切下少量的样品；　　　　加入有效量的染色剂到样品上，所述染色剂包括细胞－渗透性染料和细胞－不渗透性荧光染料的至少一种；其中所述细胞－渗透性染料转化为在细胞内酯酶活性存在情况下发射第一荧光的化合物；其中所述细胞－不渗透性荧光染料可以渗透到细胞的受损的膜中并且发射第二荧光；并且其中当指示剂包括所述细胞－渗透性染料和所述细胞－不渗透性染料两者时，所述第一荧光和所述第二荧光彼此是可区分的；　　　　将与所述染色剂一起加入的所述样品温育达预定的持续时间；和　　　　根据选自由下列组成的组的至少一个参数来确定鱼产品的鲜度：从所述被温育的样品发射出的所述第一荧光的强度，从所述被温育的样品中发射的所述第二荧光的强度，从所述样品的顶部开始到检测所述第一荧光的所述样品的最远点的第一距离；从所述样品的顶部开始到检测所述第二荧光的所述样品的最远点的第二距离。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：B利伯曼，
申请(专利权)人：文特实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]