研究、判定或评价的方法技术

本发明专利技术提供一种通过向ＳＡＲＴ应激负荷动物投入被检物质后，对其脑组织进行蛋白质组表达分析，研究、判定或评价该被检物质对纤维肌痛症的作用、镇痛作用或抗应激作用等药理作用的方法。对ＳＡＲＴ应激负荷动物的脑组织进行蛋白质组表达分析，以确认被检物质如何影响其中所发生的蛋白质表达的变化，由此能够探索对治疗纤维肌痛症和疼痛性疾病有效的物质和抗应激物质。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
5 本专利技术涉及一种通过向SART应激负荷动物投入被检物质后对其脑组织进行蛋白质组表达分析，对该被检物质的药理作用，特别是对 于纤维肌痛症的作用、镇痛作用或抗应激作用进行。|0
技术介绍
纤维肌痛症(Fibromyalgia)是一种慢性全身性的强烈疼痛、或者即 使为局部疼痛，也是广范围的慢性疼痛为主要症状的疾病，不仅肌肉 组织，而且连皮肤也感觉疼痛。在纤维肌痛症中，不仅表现出这种全 身性的疼痛，而且还多伴有疲劳感、倦怠感、忧郁、焦虑感、晨间僵15 硬感、肌肉强直、睡眠障碍等。此外，有时还伴有头痛、颜而痛、认 识障碍(记忆错误、注意力涣散)、肠胃不适(内脏痛、消化系统障碍、 肠胃气胀)、尿频、腹泻、便秘、月经不调等症状。已报告，相对于美国的一般人口，纤维肌痛症的发病率在女性为 3.4%，男性为0.5%，大致多发于25 50岁的女性，约80%的患者为20 女性，在日本的情况认为与美国大致相同。纤维肌痛症，虽然其自觉 症状各种各样，可是外界观察到的症状，除特征性的全身压痛之外， 却几乎没有，除进行MRI、 CT等图像检査外，即使进行肌肉疼痛部位 的病理检查、各种免疫学、病毒学、内分泌学检查，也几乎不能见到 异常。例如，不能观察到不同于风湿性关节炎的浮肿，尽管显示炎症25 程度的血液中的指标，即血沉或cAMP受体蛋白(CRP)均在正常范 围之内，但患者仍主诉遍及四肢或躯干的广泛范围内的疼痛。作为诊断方法，现在，在世界范围内使用美国风湿病学会1990年 提出的分类标准。根据该标准，以脐部作为基点，在上半身和下半身、 右半身和左半身、脊椎部和胸骨部的5处中的任一部位均感觉疼痛，30 且此疼痛至少持续3个月以上的情况，或者在规定的全身18处的压痛 载重后，在ll处以上感觉到疼痛的情况，被认定为纤维肌痛症。关于纤维肌痛症的发病的原因和机理，现在虽然推测为应激等心 理原因、病毒感染、遗传、免疫异常或祌经递质的异常等，但是仍未5 阐明。纤维肌痛症是一种由生物体组织的损伤或可能带来损伤的侵害刺激引起的、与多数一般疼痛性的疾病大不相同的疾病，在疼痛部位 无相关的病理学方面的所见。在纤维肌痛症的治疗上，在一般的疼痛治疗中较多使用的非类固醇性抗炎症药(NSAIDs)等消炎镇痛剂的几乎无效。另外，虽然试用 io 了肌肉松弛药、阿片样物质性镇痛药、抗焦虑剂等各种各样的药剂， 但其有效性因人而异存在很大的差别，未见显著的效果。因此，目前 在纤维肌痛症的治疗上，无非是开具抗忧郁药或抗忧郁药和NSAIDs 的处方、向疼痫发作部位投以局部麻醉药或类固醇剂、采用按摩、运 动疗法、睡眠疗法等。但是，任何治疗药剂和治疗方法，由于纤维肌 15 痛症的原因尚未确定，且治疗效果因人而异存在很大的差别，所以均 不能确立为治疗方法。如上所述，目前，纤维肌痛症的发病原因和机理尚未阐明，因此， 研究者们正在寻求研究、判定或评价对治疗该疾病有效的物质的方法。 本专利技术的目的在于提供一种对治疗纤维肌痛症或疼痛性疾病有效 20 的物质进行。本专利技术的专利技术人首先着眼于纤维肌痛症与SART应激负荷动物的 类似性。所谓SART应激负荷动物，是指负荷SART (Specific Alternation of Rhythm in Temperature)应激，即反复寒冷刺激的动物，可由小鼠、大25 鼠、豚鼠等制作得到。制作方法可以根据喜多等的方法(日薬理誌， 71: 195， 1975)进行。即，例如在大鼠的情况下，在上午10点至下 午5点的期间内，每小时交替改变饲养环境温度24'C和一3t:，接着， 在下午5点至次日早晨的上午IO点的期间内，维持在4。C，使其自由 摄取水和饲料，词养4天以上，通过反复负荷寒冷刺激而能够制作。30 在大鼠为一3X:的低温的温度设定，在小鼠为4°C，在豚鼠为0°C，由 此能够分别制作SART应激负荷小鼠、豚鼠。已知这样制作的SART应激负荷动物具有以下特征，即，因反复 寒冷刺激而造成的疼痛阈值降低(疼痛过敏)、焦虑-忧郁亢进、CRH (促肾上腺皮质素释放激素)、去甲肾上腺素、IL-ip的释放分别亢进、 5-羟色胺(5-HT)的释放被抑制。另外，其体重也减少。 5 另一方面，已知纤维肌痛症的的患者也具有疼痛阈值降低、焦虑-忧郁亢进、CRH (促肾上腺皮质素释放激素)、去甲肾上腺素、P物质、 IL-ip、 IL-2、 IL-6及lL-8的释放分别亢进、5-羟色胺(5-HT)的释放 被抑制的特征。已经明确，在这些方面与SART应激负荷动物具有共 性。io 此外，迄今为止，已知牛痘病毒接种炎症组织的提取物对于SART应激负荷动物，具有疼痛阈值降低(疼痛过敏)的抑制作用(镇痛作 用)、CRH (促肾上腺皮质素释放激素)、去甲肾上腺素、IL-lp的释放 亢进的抑制作用、5-羟色胺(5-HT)的释放抑制、体重减少的抑制作 用等的抗应激作用(基礎&臨床、15卷、5号、2459頁、1981年；応15 用薬理、32巻、3号、599頁、1986年及其它)，规定以牛痘病毒接种 家兔炎症皮肤的提取液为主要成分的医药品制剂(商品名Neurotropin (祌经妥乐平))，通过使用该SART应激负荷动物的镇痛效力试验而 进行效价检定，作为定量试验。牛痘病毒接种家兔炎症皮肤的提取液制剂是一种已明确广泛适用20 于腰疝症、颈肩腕综合症、症状性神经痛、肩周炎、变形性关节炎、 带状疱疹后祌经痛等疼痛性疾病，除此以外还广泛适用于伴随皮肤疾 病(湿疹、皮炎、荨麻疹)的搔痒、过敏性鼻炎、亚急性脊髓视神经 症(SMON)后遗症的冷觉、异常知觉、疼痛等的非常独特的制剂， 其皮下注射、肌肉注射、静脉注射用的注射剂和片剂，作为医疗用医25 药品已被允许制造，并在市场上出售。近年，在美国进行了关于作为 难治性神经性疼痛的RSD (反射性交感神经萎縮症，CPRS-typel)的 临床试验。另外，近年，已明确牛痘病毒接种炎症组织的提取物对纤维肌痛 症有效(Arthritis Res Ther, 5 (Suppl3): S53， 170， 2003年及其它)。30 在以下专利文献中，同样记载了牛痘病毒接种炎症组织的提取物对纤 维肌痛症有效。专利文献1:国际公幵WO2004 / 039383号公报
技术实现思路
本专利技术的专利技术人着眼于上述的SART应激负荷动物与纤维肌痛症 5 患者具有共同的特征、以及牛痘病毒接种炎症组织提取物对上述二者 均有镇痛作用，考虑其作用机理为改善疼痛的下行性抑制系统的功能 降低，经过深入的研究，结果专利技术一种通过向SART应激负荷动物投 入被检物质后对其脑组织进行蛋白质组表达分析，对该被检物质的药 理作用，特别是对于纤维肌痛症的作用、镇痛作用或抗应激作用进行 io 。 专利技术的效果本专利技术提供一种通过向SART应激负荷动物投入被检物质后对其 脑组织进行蛋白质组表达分析，对该被检物质的药理作用，特别是对 于纤维肌痛症的作用或镇痛作用进行。根据 15 该方法，能够探索对纤维肌痛症或疼痛性疾病有效的物质，对其进行 疗效的判定、评价，或者对该物质的耙蛋白质进行分析。具体实施方式向动物接种牛痘病毒，破碎出痘的组织，加入提取溶剂除去组织20 碎片之后，进行除蛋白处理本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种对被检物质的药理作用进行研究、判定或评价的方法，其特征在于：　　　　该方法基于对投入有被检物质的ＳＡＲＴ应激负荷动物的脑组织进行的蛋白质组表达分析。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：西冈久寿树，加藤智启，藤泽裕树，
申请(专利权)人：日本脏器制药株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]