一种耐碱性猕猴桃种质资源的鉴定方法技术

本发明专利技术属于农业果树种质资源鉴定的技术领域，本发明专利技术提供了一种耐碱性猕猴桃种质资源的鉴定方法。本发明专利技术的耐碱性猕猴桃种质资源的鉴定方法，包括如下步骤：(1)培养猕猴桃组培苗；(2)组培苗的碱害模拟处理；(3)碱害指数的统计分析；(4)耐碱性鉴定。本发明专利技术提供的鉴定方法提高了鉴定结果的准确性和可靠性。

【技术实现步骤摘要】
一种耐碱性猕猴桃种质资源的鉴定方法
本专利技术属于农业果树种质资源鉴定的
，尤其涉及一种碱性猕猴桃种质资源的鉴定方法。
技术介绍
猕猴桃是原产我国的重要果树资源，因其富含维生素C、叶酸和膳食纤维而备受人们喜爱。我国猕猴桃的年均产量占世界市场出口份额的一半以上，其中四川、陕西、河南和贵州4个省份的猕猴桃产量占国内产量的90％以上，但果实的综合品质、单位产量和价格与新西兰、智利等发达国家相比，还有不小差距，原因之一是我国缺乏适应性强和高抗性的专用砧木。目前我国猕猴桃生产中砧木选用随机，造成接穗品种的果实外观和内在品质不均匀，影响了市场竞争力。由于猕猴桃喜欢酸性土壤，根系分布浅且为肉质根，所以我国适宜猕猴桃种植的国土面积有限，北方大部分地区的土壤都偏碱，pH值普遍在8.0～8.5左右，非常不利于猕猴桃的生长，碱性土壤会造成猕猴桃叶片黄化，营养不良和树势衰弱。国内对于耐碱性猕猴桃种质资源的筛选和鉴定研究很少，缺乏系统可靠的鉴定标准和方法。因此，急需建立一套行之有效的耐碱性猕猴桃种质资源的鉴定方法，并以此为基础，培育耐碱性专用砧木，提高接穗品种的果实综合品质，提升我国在猕猴桃国际贸易中的市场竞争力。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种碱性猕猴桃种质资源的鉴定方法，提高种质资源鉴定结果的准确性和可靠性。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供了一种耐碱性猕猴桃种质资源的鉴定方法，包括如下步骤：(1)培养猕猴桃组培苗：剪取前一年休眠的猕猴桃枝条，浸泡在水中长出新芽，剪下带有新芽的茎段，进行消毒，然后置于出芽培养基中培养，待新长出的腋芽长至1.5～2.5cm时，剪下腋芽转入增殖培养基中进行继代培养，即可得到猕猴桃组培苗；(2)组培苗的碱害模拟处理：配制MS液体培养基，调节MS液体培养基的pH至8.0～8.5，将猕猴桃组培苗接入所述的MS液体培养基中，培养35～50天；(3)碱害指数的统计分析；(4)耐碱性鉴定。优选的，所述猕猴桃组培苗的高度为1.5～2cm，具有3～4片小叶，生长状态一致。优选的，在步骤(2)采用碳酸氢钠和/或碳酸钠调节MS液体培养基的pH。优选的，采用碳酸氢钠和碳酸钠调节MS液体培养基的pH时，所述碳酸氢钠和碳酸钠的摩尔比为(1～2):1。优选的，步骤3)中所述的碱害指数的统计分析方法为：碱害模拟处理35～50天后，根据组培苗所表现出来的受害症状进行统计分析，碱害指数的分级标准如下：Ⅰ根数为4～5条，根长为3～4cm，根直径小于1.5mm；Ⅱ根数为2～3条，根长为1～2cm，根直径为1.6～2.0mm；Ⅲ根数为1条，根长为0.5～1cm，根直径2.1～2.5mm；Ⅳ无根，生长受到抑制，植株矮化。优选的，所述碱害指数的计算公式为：ADI＝∑(x×n)/(4N)×100x--各级碱害级数；n--各级碱害级数对应的植株数；N--调查的总植株数。本专利技术提供的耐碱性猕猴桃种质资源的鉴定方法，选用生长一致的猕猴桃组培苗作为种质资源的鉴定材料，保证了猕猴桃种质资源遗传性状的稳定性和一致性，提高了鉴定结果的准确性。本专利技术提供的鉴定方法还采用碱性盐模拟碱害环境，提供了稳定的碱性环境，可以提高鉴定结果的准确性和可靠性。此外，本专利技术提供的碱害指数的统计分析方法，以植株根部表征受害症状，使鉴定结构更加准确可靠。具体实施方式本专利技术提供的耐碱性猕猴桃种质资源的鉴定方法具有准确、可靠，稳定的特点，对鉴定耐碱性猕猴桃种质资源和其他耐碱性果树种质资源具有重要意义。本专利技术提供了一种耐碱性猕猴桃种质资源的鉴定方法，包括如下步骤：(1)培养猕猴桃组培苗：剪取前一年休眠的猕猴桃枝条，浸泡在水中长出新芽，剪下带有新芽的茎段，进行消毒，然后置于出芽培养基中培养，待新长出的腋芽长至1.5～2.5cm时，剪下腋芽转入增殖培养基中进行继代培养，即可得到猕猴桃组培苗；(2)组培苗的碱害模拟处理：配制MS液体培养基，调节MS液体培养基的pH至8.0～8.5，将猕猴桃组培苗接入所述的MS液体培养基中，培养35～50天；(3)碱害指数的统计分析；(4)耐碱性鉴定。本专利技术优选采用组织培养的方法得到猕猴桃组培苗，利用该组培苗进行耐碱性猕猴桃种质资源鉴定。在本专利技术中，培养猕猴桃组培苗的方法为：剪取前一年休眠的猕猴桃枝条，浸泡在水中长出新芽，剪下带有新芽的茎段，进行消毒，然后置于出芽培养基中培养，待新长出的腋芽长至1.5～2.5cm时，剪下腋芽转入增殖培养基中进行继代培养，即可得到猕猴桃组培苗。在本专利技术中，优选将剪取的猕猴桃枝条进一步修剪为长度为35～45cm的枝条段，优选每个枝条段上带有2～3个芽点。在本专利技术中，优选将所述枝条段先浸泡在含有0.5％的吐温-20的水中10min，用蒸馏水清洗3～5遍后，再浸泡在水中。将修剪的茎段用吐温-20水溶液浸泡的目的是防止茎段因修剪伤口大量失水，影响组培苗的质量。在本专利技术中，优选将枝条段的1/3浸入水中，培养6～8周。枝条段在水中浸泡6～8周后，会长出新芽，将带有新芽的茎段切下，优选切下的茎段长度为2～3cm，得到带芽茎段。在本专利技术中，优选将带芽茎段在75％的酒精中浸泡30s，取出后再用25％(体积分数)市售消毒剂(5％次氯酸钠)清洗消毒20min，进行消毒处理后，再用蒸馏水冲洗5遍，然后用灭菌刀将接触消毒液的上下切口处切掉2～3mm，置于pH为5.8的出芽培养基中培养。在出芽培养基中培养3～4周，带芽茎段会长出腋芽。在本专利技术中，所述出芽培养基的配方为：MS+0.5mg/L6-苄基腺嘌呤+1.0mg/L吲哚乙酸。在本专利技术中，所述出芽培养基的pH为5.8在本专利技术中，在所述出芽培养基中培养的条件为：16h光照，8h黑暗，培养温度优选为24±2℃，进一步优选为24±1℃，相对湿度优选为40％。在本专利技术中，优选在腋芽长度为1.5～2.5cm时，切下腋芽，放在增殖培养基培养一个月。培养一个月后，再将新生出的嫩芽转入新的增殖培养基中培养，每隔1个月更换一次增殖培养基。从而实现组培苗的继代培养。在本专利技术中，所述增值培养基的配方为：MS+1.0mg/L玉米素或MS+1.0mg/L玉米素+0.5mg/L赤霉素。在本专利技术中，所述增值培养基的pH为5.8。本专利技术得到猕猴桃组培苗后，即进行碱害模拟处理。在本专利技术中，碱害模拟处理的方法为：配制MS液体培养基，调节MS液体培养基的pH至8.0～8.5，将猕猴桃组培苗接入所述的MS液体培养基中，培养35～50天。在本专利技术中，优选生长一致的猕猴桃组培苗进行碱害模拟处理，所述猕猴桃组培苗的高度优选为1.5～2cm，并优选具有3～4片小叶。在本专利技术中，优选采用碳酸氢钠和/或碳酸钠调节MS液体培养基的pH。进一步优选采用碳酸氢钠和碳酸钠调节MS液体培养基的pH，再进一步优选采本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种耐碱性猕猴桃种质资源的鉴定方法，其特征在于，包括如下步骤：/n(1)培养猕猴桃组培苗：剪取前一年休眠的猕猴桃枝条，浸泡在水中长出新芽，剪下带有新芽的茎段，进行消毒，然后置于出芽培养基中培养，待新长出的腋芽长至1.5～2.5cm时，剪下腋芽转入增殖培养基中进行继代培养，即可得到猕猴桃组培苗；/n(2)组培苗的碱害模拟处理：配制MS液体培养基，调节MS液体培养基的pH至8.0～8.5，将猕猴桃组培苗接入所述的MS液体培养基中，培养35～50天；/n(3)碱害指数的统计分析；/n(4)耐碱性鉴定。/n

【技术特征摘要】
1.一种耐碱性猕猴桃种质资源的鉴定方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)培养猕猴桃组培苗：剪取前一年休眠的猕猴桃枝条，浸泡在水中长出新芽，剪下带有新芽的茎段，进行消毒，然后置于出芽培养基中培养，待新长出的腋芽长至1.5～2.5cm时，剪下腋芽转入增殖培养基中进行继代培养，即可得到猕猴桃组培苗；
(2)组培苗的碱害模拟处理：配制MS液体培养基，调节MS液体培养基的pH至8.0～8.5，将猕猴桃组培苗接入所述的MS液体培养基中，培养35～50天；
(3)碱害指数的统计分析；
(4)耐碱性鉴定。


2.如权利要求1所述的耐碱性猕猴桃种质资源的鉴定方法，其特征在于，所述猕猴桃组培苗的高度为1.5～2cm，具有3～4片小叶，生长状态一致。


3.如权利要求1所述的耐碱性猕猴桃种质资源的鉴定方法，其特征在于，在步骤(2)采用碳酸氢钠和/或碳酸钠调节MS液体培养基的pH。


4.如权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟云鹏，方金豹，齐秀娟，陈锦永，孙雷明，顾红，王然，林苗苗，
申请(专利权)人：中国农业科学院郑州果树研究所，
类型：发明
国别省市：河南;41