糖尿病血管并发症诊断标记制造技术

本发明专利技术发现结缔组织生长因子（ＣＴＧＦ）可作为诊断标记，用于指征血管疾病的发生与恶化的风险的增加。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术发现结缔组织生长因子(CTGF)是指征血管疾病的发生与恶化 的风险增加的诊断标记。
技术介绍
糖尿病与主要来自心血管并发症的发病率和死亡率上升相关。血管病 变的恶化因糖尿病情而加快，且共存的高血压会大大增加这一风险 (Christlieb et al (1981) Diabetes 30 (Suppl 2): 90-96; Krolewski et al (1988) N Engl J Med 318:140-145.)。糖尿病和高血压共存并加速血管损伤的机制， 至今尚未明确。这两种病况都涉及内皮功能障碍、炎症细胞累积、血管平 滑肌细胞(VSMC)增殖和迁移、以及血管壁中的细胞外基质沉积(参见 Ross (1993) Nature 362:801-809; Clowes and Kamovsky (1977) Nature 265:625-626; Clowes et al (1983) Lab Invest 49:327-333;及Jackson and Schwartz (1992) Hypertension 20:713-736,)。在糖尿病和非糖尿患者个体中，微量和大量白蛋白尿的发生会增加发 生大血管疾病的风险。在I型糖尿病患者中，有蛋白尿的比无蛋白尿的， 患大血管疾病的风险增加了 10倍。最近，在I型糖尿病患者的 DCCT/EDIC人群中揭示了微量白蛋白尿与血管疾病并发症(例如颈动脉内 中膜厚度)的关系(The Diabetes Control and Complications Trial/Epidemiology of Diabetes and Complications Research Group (2003) N Engl J Med 348:2294-2303)。糖尿病肾病与血压升高和血脂异常有关，这 些症状通常在糖尿病患者血管疾病恶化前出现，并通常会加速血管疾病的 恶化(Perkins et al (2003) N Engl J Med 348:2285-2293)。CTGF最初被鉴定为人脐静脉内皮细胞的产物，它对成纤维细胞有趋 化和促有丝分裂的作用(参见例如，Bradham et al (1991) J Cell Biol 114:1285-1294和US5，408,040)。 CTGF属于CCN基因家族，而CCN是因 该家族的原型成员￡TGF、 ^yr61禾n Nov而得名(Bork (1993) FEBS Lett 327:125-130)。 CTGF样因子的分子量介于35-40 kDa之间，这些分子的结 构由四个模块组成N-末端IFGBP样结构域、Von Willebrand因子C型重 复结构域、I型凝血酶敏感蛋白重复结构域、禾卩C-末端二聚化结构域 (Bork (1993) FEBS Lett 327:125-130)。CTGF的特征在于构成其总氨基酸含量的11%以上的38个保守的半胱 氨酸残基。该分泌性蛋白的4个外显子编码的半胱氨酸内部配对，形成由 一种短而柔性的、蛋白酶敏感的32个氨基酸的肽相联的氨基和羧基末端 结构域(Bork (1993) FEBS Lett 327:125-130)。在这个所谓"铰链"的区域 内，CTGF容易被切割形成CTGF的氨基末端片段(CTGF N-片段；参见 WO 00/035936)，所述片段是CTGF在血液和尿液中存在的主要形式。由于CTGF N片段血浆水平的变化可预测CTGF激活和产生的程度， 本研究，是为确定是否血液循环中CTGF及CTGF N片段的水平标志着I 型糖尿病患者发生血管疾病和肾脏疾病的风险有所增加。因此，本专利技术提 供了指示血管疾病发生和恶化的风险有所增加的诊断标记。附图说明图1通过高血压状态显示了 CTGF N片段的对数(log)累积分布。 专利技术概述本专利技术提供了一种用于诊断患有糖尿病或具有患糖尿病的风险的对象中发生与糖尿病相关的血管并发症的风险的方法，该方法包括从所述对象获取生物学样品，测量该生物学样品中的CTGF或CTGF片段的水平，以 及将该生物学样品中的CTGF或CTGF片段的水平与CTGF或CTGF片段 的标准水平相比较，当所述生物学样品中CTGF或CTGF片段的水平升高 时，指示有发生与糖尿病相关的血管并发症的风险。典型地，所述患有糖尿病或具有患糖尿病的风险的对象是人。 在一些实施方式中，所述血管并发症是大血管并发症或微血管并发 症。特别地，所述血管并发症可以是心血管并发症或脑血管并发症、或外 周血管并发症。在一些实施方式中，所述血管并发症是颈动脉内膜中层厚度。典型地，利用WO 03/024308中描述的分析方法，所述生物学样品中 的CTGF片段或CTGF的水平是可探测和可量化的。在一些实施方式中，所述生物学样品是来自体液的样品。特别地，所 述生物学样品是尿液或血浆。在优选的实施方式中，所述对象患有I型糖尿病。该对象也可具有增 高的血压或微量白蛋白尿。专利技术详述应该理解，本专利技术不限于本文所描述的特定方法学、方案、细胞系、 分析方法和试剂，因为它们可以改变。也应理解本文所用术语意在描述本 专利技术的特定实施方式，而绝非为了限制权利要求书所示的本专利技术范围。必须注意，除非上下文清楚地指出，否则本文和权利要求书中所用的 单数形式"一种(a， 和"所述"包括复数形式。因此，例如"一种片段"包括众多这类片段， 一种"抗体"指一或多个抗体及本领域技术人 员己知的该抗体的等价物，等等。除非另有说明，本文所用所有技术和科学术语具有专利技术所属领域普通 技术人员所通常理解的相同含义。尽管类似或等价于本文描述的方法和材 料的任何方法和材料均可在实施和测试本专利技术中使用，但是现在描述的是 优选的方法、装置和材料。本文引用的所有出版物以其全文引入本文作参 考，其目的是描述和公开在这些出版物中所报道的可用于本专利技术的方法 学、药剂和工具。本文中的任何内容均不应被解释为承认本专利技术不先于现 有技术的公开。除非特别指明，本专利技术的实施将采用化学、生物化学、分子生物学、 细胞生物学、遗传学、免疫学和药理学的本领域内的常规方法。这些技术在文献中有充分解释。参见例如Gennaro, A.R.， ed. (1990) Remington's Pharmaceutical Sciences, l她ed" Mack Publishing Co.; Colowick, S. et al.， eds., Methods In Enzymology, Academic Press, Inc.; Handbook of Experimental Immunology, Vols. I-IV (D.M. Weir and C.C. Blackwell， eds" 1986, Blackwell Scientific Publications); Maniatis， T. et al.， eds. (1989) Moecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd edition, Vols. I-III, Cold Spring Harbor Laboratory Press; Ausubel， F. M. et a本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于诊断在患有糖尿病或具有患糖尿病的风险的对象中发生与糖尿病相关的血管并发症的风险的方法，该方法包括从所述对象获取生物学样品，测量该生物学样品中ＣＴＧＦ或ＣＴＧＦ片段的水平，以及将该生物学样品中ＣＴＧＦ或ＣＴＧＦ片段的水平与ＣＴＧＦ或ＣＴＧＦ片段的标准水平相比较，当所述生物学样品中ＣＴＧＦ或ＣＴＧＦ片段的水平升高时，指示有发生与糖尿病相关的血管并发症的风险。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：AA贾法，WR乌辛格，
申请(专利权)人：菲布罗根公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]