利用气相色谱-质谱联用技术检测白芍总苷原料药中22种有机氯农药残留的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用气相色谱‑质谱联用技术同时检测白芍总苷原料药中22种有机氯类农药残留的方法，包括以下步骤：制备混合标准品溶液、供试品溶液和基质标准曲线溶液；将基质标准曲线溶液以及供试品溶液按色谱条件和质谱条件依次进样，绘制出22种有机氯农药残留的基质标准曲线；分别代入供试品溶液的峰响应强度数据分别计算并得出供试品溶液中22种有机氯农药残留的浓度。本发明专利技术的方法中22种有机氯农药残留在5‑400ng/mL范围内线性拟合度高，22种有机氯农药残留在浓度为0.1mg/kg时的回收率在62％～128％，相对标准偏差≤15％，方法定量限≤0.05mg/kg。该方法快速简便，灵敏度高，精密度高，准确度高，适合于白芍总苷原料药中22种有机氯类农药残留的分析检测。

【技术实现步骤摘要】
利用气相色谱-质谱联用技术检测白芍总苷原料药中22种有机氯农药残留的方法
本专利技术属于化学分析及检测领域，特别是涉及一种利用气相色谱-质谱联用技术检测白芍总苷原料药中22种有机氯农药残留的方法。
技术介绍
白芍为毛茛科植物芍药PaeonialactifloraPall.的干燥根。夏、秋二季采挖，洗净，除去头尾和细根，置沸水中煮后除去外皮或去皮后再煮，晒干。白芍具养血调经，敛阴止汗，柔肝止痛，平抑肝阳的功能。用于血虚萎黄，月经不调，自汗，盗汗，胁痛，腹痛，四肢挛痛，头痛眩晕。白芍在种植过程中易感染多种病虫害且发病率高，滥用农药造成了白芍的直接污染。此外，白芍生长周期长(一般3-4年)，土壤和空气中残留的农药容易在植物组织中富集，又会对白芍产生间接污染。随着我国药品标准提高计划的实施和不断推进，国家药品标准体系已初步建立，药品监管信息化建设步伐加快，药品标准管理工作更加趋于规范和完善。但中药白芍总苷原料药标准化工作仍显得相对滞后。白芍总苷原料药是由白芍饮片经溶剂提取、萃取处理后得到的白色粉末，如将白芍饮片利用乙醇提取，再经乙酸乙酯、正丁醇萃取，经浓缩干燥后制成粉末。浦锦宝等人对白芍总苷原料药中芍药苷及总皂苷的含量研究发现，其中芍药苷含量均大于15％，总皂苷的含量均大于60％。贺妮等人研究发现白芍总苷原料药对小鼠有抗抑郁及抗炎作用，可能通过影响中枢单胺神经功能对抑郁及炎症进行调节。杨德芳等人研究发现当归/白芍组白芍总苷原料药可通过抑制子宫收缩，改善子宫供血，从而对原发性痛经产生治疗作用。目前针对白芍中农药残留的报道较多，尚未见有关白芍总苷原料药测试农药残留方面的资料。白芍总苷原料药中主要成分为皂苷类化合物，极性大，如参考常规药材前处理方法用酸水浸泡或乙腈等极性较大的溶剂对农药残留进行提取，会将皂苷类化合物同时萃取出来，干扰农药残留的检测。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于，提供一种前处理简单、灵敏度高、精密度高、准确度高、通量高的有机氯类农药残留检测方法，同时为中药及中药白芍总苷原料药中有机氯类农药残留分析检测提供新的思路。为解决上述技术问题，本专利技术提供的利用气相色谱-质谱联用技术检测白芍总苷原料药中22种有机氯农药残留的方法，可以通过下列方法来实现：(1)溶液的制备：混合标准品溶液的制备：分别称取22种有机氯农药残留标准品适量，配制成含有所述22种有机氯农药残留标准品的混合标准品溶液；供试品溶液的制备：精密称取适量白芍总苷原料药粉末供试品，经提取、硅胶净化、浓缩、定容得供试品溶液；基质标准曲线溶液的制备：精密称取适量白芍总苷原料药粉末供试品至少五份，按一定梯度分别加入不同体积的混合标准品溶液，然后按所述供试品溶液的制备相同的方法，配制得具有一定浓度梯度的至少五个基质标准曲线溶液；(2)采用气相色谱-质谱联用技术测定；气相色谱条件：色谱柱为HP-5MS，30m×0.25mm×0.25μm；程序升温：初始柱温55℃～65℃维持2min，然后以16℃/min升至150℃维持0min，然后以10℃/min升至200℃维持0min，然后以3℃/min升至220℃维持0min，然后以25℃/min升至290℃维持8min；质谱条件：离子源：电子轰击源(EI)；质谱监测模式：SIM模式。(3)数据分析：将所述至少五个基质标准曲线溶液以及供试品溶液按所述色谱条件和质谱条件依次进样，记录图谱数据；根据至少五个基质标准曲线溶液的峰响应强度数据和浓度数据绘制出22种有机氯农药残留的基质标准曲线；根据基质标准曲线分别代入供试品溶液的峰响应强度数据分别计算并得出供试品溶液中22种有机氯农药残留的浓度；所述22种有机氯农药残留及其对应的响应峰离子对分别为：α-六六六，离子219/183/181；六氯苯，离子284/286/282；β-六六六，离子181/183/219；五氯硝基苯，离子237/249/265；γ-六六六，离子181/183/219；δ-六六六，离子219/181/183；七氯，离子274/272/100；艾氏剂，离子262.8/260.8/292.9；氧化氯丹，离子386.8/388.8/390.8；顺式环氧七氯，离子353/351/355；反式环氧七氯，离子185/183/253；顺式氯丹，离子372.8/374.8/376.8；反式氯丹，离子372.8/236.8/271.8；β-硫丹，离子339/240.9/195.0；4,4'-滴滴伊，离子246/318/176；狄氏剂，离子277/263/79；2,4'-滴滴涕，离子235/237/165；4,4'-滴滴涕，离子237/235/165；异狄氏剂，离子243/281/263；α-硫丹离子194.9/240.9/338.8；4,4'-滴滴滴，离子235/237/165；硫丹硫酸酯，离子272/274/270。具体的，所述混合标准品溶液中，22种有机氯农药残留标准品的浓度均为1μg/mL。具体的，所述混合标准品溶液配制时，先用丙酮稀释定容至1mg/mL，再用丙酮稀释定容至10μg/mL，再用丙酮稀释定容至1μg/mL。在一种具体的实施方式中，混合标准品溶液的制备：分别称取22种对照品各10mg，精密称定，置于10mL容量瓶中，用丙酮溶解并定容至刻度，配置成1mg/mL储备液；农药残留标准品储备液-18℃保存；取100μL储备液，用丙酮定容至10mL，制成10μg/mL溶液，取1mL，用丙酮稀释至10mL，制备出1μg/mL(ppm)混合标准品溶液。具体的，所述供试品溶液配制时，提取操作以甲苯为提取溶剂。具体的，所述供试品溶液配制时，硅胶净化操作用无水硫酸镁，硅胶吸附处理经提取得到的提取液。然后，除去溶剂后，再用甲苯溶解、稀释定容。在一种具体的实施方式中，白芍总苷原料药供试品溶液的制备：白芍总苷原料药直接取样，称取供试品2g，称定，置15mL具塞离心管中，加入10mL甲苯，超声20min，4000r/min离心5min；取上清液至15mL离心管中，加入无水硫酸镁900mg，硅胶300mg，涡旋1min，4000r/min离心5min；取上清液，置于40℃水浴中氮吹至干，加入甲苯2mL定容，过0.45μm滤膜，得到供试品溶液。在一种具体的实施方式中，白芍总苷原料药基质标准曲线溶液的制备：白芍总苷原料药直接取样，称取供试品2g七份，称定，分别置于七个15mL具塞离心管中，各加入10mL甲苯，分别加入1μg/mL混标溶液(1ppm)10/20/40/100/200/400/800μL，超声20min，4000r/min，离心5min；分别取上清液至七个15mL离心管中，各加入无水硫酸镁900mg，硅胶300mg，涡旋1min，4000r/min，离心5min；分别取上清液，置于40℃水浴中氮吹至干，加入甲苯2mL定容，过0.45μm滤膜，得到呈浓度梯度的七个基质标准曲线溶液。具体的，基质标准曲线的浓度梯度为：5ng/mL、10本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用气相色谱-质谱联用技术检测白芍总苷原料药中22种有机氯农药残留的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)溶液的制备：/n混合标准品溶液的制备：分别称取22种有机氯农药残留标准品适量，配制成含有所述22种有机氯农药残留标准品的混合标准品溶液；/n供试品溶液的制备：精密称取适量白芍总苷原料药粉末供试品，经提取、硅胶净化、浓缩、定容得供试品溶液；/n基质标准曲线溶液的制备：精密称取适量白芍总苷原料药粉末供试品至少五份，按一定梯度分别加入不同体积的混合标准品溶液，然后按所述供试品溶液的制备相同的方法，配制得具有一定浓度梯度的至少五个基质标准曲线溶液；/n(2)采用气相色谱-质谱联用技术测定；/n气相色谱条件：色谱柱为HP-5MS，30m×0.25mm×0.25μm；程序升温：初始柱温55℃～65℃维持2min，然后以16℃/min升至150℃维持0min，然后以10℃/min升至200℃维持0min，然后以3℃/min升至220℃维持0min，然后以25℃/min升至290℃维持8min；/n质谱条件：离子源：电子轰击源(EI)；质谱监测模式：特征离子扫描；/n(3)数据分析：/n将所述至少五个基质标准曲线溶液以及供试品溶液按所述色谱条件和质谱条件依次进样，记录图谱数据；根据至少五个基质标准曲线溶液的峰响应强度数据和浓度数据绘制出22种有机氯农药残留的基质标准曲线；根据基质标准曲线分别代入供试品溶液的峰响应强度数据分别计算并得出供试品溶液中22种有机氯农药残留的浓度；/n所述22种有机氯农药残留及其对应的响应峰离子对分别为：α-六六六，离子219/183/181；六氯苯，离子284/286/282；β-六六六，离子181/183/219；五氯硝基苯，离子237/249/265；γ-六六六，离子181/183/219；δ-六六六，离子219/181/183；七氯，离子274/272/100；艾氏剂，离子262.8/260.8/292.9；氧化氯丹，离子386.8/388.8/390.8；顺式环氧七氯，离子353/351/355；反式环氧七氯，离子185/183/253；顺式氯丹，离子372.8/374.8/376.8；顺式氯丹，离子372.8/374.8/376.8；β-硫丹，离子339/240.9/195.0；4,4'-滴滴伊，离子246/318/176；狄氏剂，离子277/263/79；2,4'-滴滴涕，离子235/237/165；4,4'-滴滴涕，离子237/235/165；异狄氏剂，离子243/281/263；α-硫丹，离子194.9/240.9/338.8；4,4'-滴滴滴，离子235/237/165；硫丹硫酸盐，离子272/274/270。/n...

【技术特征摘要】
1.一种利用气相色谱-质谱联用技术检测白芍总苷原料药中22种有机氯农药残留的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)溶液的制备：
混合标准品溶液的制备：分别称取22种有机氯农药残留标准品适量，配制成含有所述22种有机氯农药残留标准品的混合标准品溶液；
供试品溶液的制备：精密称取适量白芍总苷原料药粉末供试品，经提取、硅胶净化、浓缩、定容得供试品溶液；
基质标准曲线溶液的制备：精密称取适量白芍总苷原料药粉末供试品至少五份，按一定梯度分别加入不同体积的混合标准品溶液，然后按所述供试品溶液的制备相同的方法，配制得具有一定浓度梯度的至少五个基质标准曲线溶液；
(2)采用气相色谱-质谱联用技术测定；
气相色谱条件：色谱柱为HP-5MS，30m×0.25mm×0.25μm；程序升温：初始柱温55℃～65℃维持2min，然后以16℃/min升至150℃维持0min，然后以10℃/min升至200℃维持0min，然后以3℃/min升至220℃维持0min，然后以25℃/min升至290℃维持8min；
质谱条件：离子源：电子轰击源(EI)；质谱监测模式：特征离子扫描；
(3)数据分析：
将所述至少五个基质标准曲线溶液以及供试品溶液按所述色谱条件和质谱条件依次进样，记录图谱数据；根据至少五个基质标准曲线溶液的峰响应强度数据和浓度数据绘制出22种有机氯农药残留的基质标准曲线；根据基质标准曲线分别代入供试品溶液的峰响应强度数据分别计算并得出供试品溶液中22种有机氯农药残留的浓度；
所述22种有机氯农药残留及其对应的响应峰离子对分别为：α-六六六，离子219/183/181；六氯苯，离子284/286/282；β-六六六，离子181/183/219；五氯硝基苯，离子237/249/265；γ-六六六，离子181/183/219；δ-六六六，离子219/181/183；七氯，离子274/272/100；艾氏剂，离子262.8/260.8/292.9；氧化氯丹，离子386.8/388.8/390.8；顺式环氧七氯，离子353/351/355；反式环氧七氯，离子185/183/253；顺式氯丹，离子372.8/...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈君子，殷红，傅鼎鼎，武晓剑，钱勇，谢天培，
申请(专利权)人：宁波立华制药有限公司，上海佰年诗丹德检测技术有限公司，上海诗丹德标准技术服务有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33