放射性配基Ｎ↓［２］Ｓ↓［２］－Ｍｅｍａｎｔｉｎｅ和脑受体显像剂↑［９９ｍ］Ｔｃ－Ｍｅｍａｎｔｉｎｅ的油水分配系数测定方法，属于核医学分析检测技术领域。放射性配基↑［９９ｍ］Ｔｃ标记前体Ｎ－［２－（Ｎ－（２－巯基乙基））氨基甲酰甲基］－Ｎ－（２－巯基乙基）－３，５－二甲基金刚烷胺基乙酰胺，简称Ｎ↓［２］Ｓ↓［２］－Ｍｅｍａｎｔｉｎｅ。本发明专利技术方法采用在正辛醇－水或正辛醇－磷酸盐缓冲液体系中，用ＨＰＬＣ法测定Ｎ↓［２］Ｓ↓［２］－Ｍｅｍａｎｔｉｎｅ的油水分配系数，２５℃时，Ｎ↓［２］Ｓ↓［２］－Ｍｅｍａｎｔｉｎｅ的油水分配系数ｌｇＰ约为１．７０，及脑受体显像剂↑［９９ｍ］Ｔｃ－Ｍｅｍａｎｔｉｎｅ的油水分配系数测定方法，采用Ｎ↓［２］Ｓ↓［２］－Ｍｅｍａｎｔｉｎｅ先进行↑［９９ｍ］Ｔｃ标记，再在正辛醇－水体系中用γ计数仪测定↑［９９ｍ］Ｔｃ－Ｍｅｍａｎｔｉｎｅ的油水分配系数，ｌｇ Ｐ趋于１．９。结论Ｎ↓［２］Ｓ↓［２］－Ｍｅｍａｎｔｉｎｅ和↑［９９ｍ］Ｔｃ－Ｍｅｍａｎｔｉｎｅ均呈脂溶性。
【技术实现步骤摘要】
放射性配基N2S2-Memantine和脑受体显像剂99mTc-Memantine的油水分配系 数测定方法，属于核医学分析检测
技术介绍
病理学研究证实，许多精神疾病包括痴呆、精神分裂、帕金森疾病等与脑 内NMDA (N-甲基天冬氨酸)受体异常有关。研究和开发能够有效量化局部脑 组织NMDA受体和该受体活性状态改变的显像剂,从分子水平上展现脑的生理、 病理状态，对与受体有关的疾病作出诊断，并用于指导合理用药以及疗效评价 和预后判断，是至关重要的。目前国外有用、 或标记不同类型的 N-甲基天冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂的报道，但""Tc标记的NMDA受体 显像剂国内外均无报道。美金刚胺(Memantine)是一种具有中等亲和力的NMDA 受体拮抗剂，可以抑制兴奋性氨基酸的神经毒性而不干扰学习、记忆所需的短 暂的谷氨酸生理性释放，具有神经元保护作用，我们以美金刚胺为原料，经过 结构改造，引入N2S2基团，得到一种全新的双功能化合物N--N-(2-巯基乙基)-3 ， 5- 二甲基金刚烷胺基乙酰胺 (N2S2-Memantine)，与锝络合得到新的锝标记化合物99mTc-Memantine (结构式见 图1)。经改造后的拮抗剂与NMDA受体结合情况也会相应的改变，能否成为 一种更有效的NMDA受体拮抗剂，99mTc-Memantine能否成为一种新的SPECT 显像药物，必须对其性质进行深入研究，其中油水分配系数的测定极为重要。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种放射性配基N2S2-Memantine和脑受体显像剂 99mTc-Memantine的油水分配系数测定方法，99mTc-Memantine的油水分配系数与 药物在体内的溶解、吸收、分布、转运有关，是决定药物能否进脑的一个重要 因素之一，通过油水分配系数测定，可推测新药的一些药理作用，因此通过体 外测定N2S2-Memantine及99mTc-Memantine的油水分配系数，可以模拟生物体内 药物在水相和生物相之间的分配情况。本专利技术的技术方案 一种放射性配基N2S2-Memantine的油水分配系数测定 方法，放射性配基99mTc标记前体N--N-(2-巯 基乙基)-3， 5-二甲基金刚烷胺基乙酰胺，简称N2S2-Mernantine ，采用 N2S2-Memantine在正辛醇-水或正辛醇-磷酸盐缓冲液体系中，用HPLC法测定N2S2-Memantine的油水分配系数，25。C时，N2S2-Memantine的油水分配系数lgP 为1.70，步骤为(1) 溶液配制精密称取N2S2-Memantinel.0g，置于100mL量瓶中，加入适量甲醇溶解， 加甲醇至刻度，摇匀，得浓度为10mg/mL的贮备液；(2) 线性关系确定精密量取贮备液适量，置于10mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀， 分别得到质量浓度为0.1、 0.2、 0.3、 0.4、 0.5、 0.6、 0.7、 0.8、 0.9、 1.0 mg/mL 的系列标准溶液，分别精密吸取各系列标准溶液20pL注入高效液相色谱仪，记 录峰面积J;以N2S2-Memantine质量浓度mg/mL计/ 为横坐标，峰面积^为纵 坐标进行线性回归，得N2S2画Memantine的线性回归方程为」=4><106/>+3173.1， r2=0.9996,结果表明N2S2-Memantine在0.1~1.0 mg/mL内呈良好线性关系；另取0.1mg/mL的N2S2-Memantine溶液加流动相稀释配成0.005、0.01、0.02、 0.04、 0.06、 0.08、 0.10mg/mL的系列标准溶液，分别精密吸取各系列标准溶液 20pL注入高效液相色谱仪，记录峰面积乂，得到N2S2-Memantine的回归方程为 」=4xl06/ —1855.7， r2=0.9989，表明N2S2-Memantine在0.005~0.1mg/mL内也呈 良好的线性关系；色谱条件色谱柱Lichospher C18 (4.6x250mm)，流动相为乙腈、水和三氟乙酸，其 中乙腈水体积比为2:1，三氟乙酸为流动相总体积的2%;紫外检测波长 230nm，流速1.00mL/min，柱温25°C;(3) 油水分配系数的测定精密称取N2S2-Memantine适量溶于水饱和的正辛醇中配成质量浓度为 l.Omg/mL的溶液，取该溶液2mL于10mL具塞管中，加入2mL正辛醇饱和的 水、氮气保护25'C摇床振摇72h，离心，分別取油相和水相各20mL注入高效液 相色谱仪，记录峰面积，代入标准曲线计算N2S2-Memantine的浓度，油相浓度 为AV水相浓度为Av，由公式P，n/z)w得25"C时N2S2-Memantine的正辛醇-水油 水分配系数P为50.51，即lgP-I.70;或以正辛醇-磷酸盐缓冲液体系代替正辛醇-水作为N2S2-Memantine的溶液 配制液进行油水分配系数的测定。一种脑受体显像剂99mTC-Memantine的油水分配系数测定方法，步骤为 (1) 99fflTc标记精密称取N2S2-Memantine适量用70%乙醇配成N2S2-Memantine质量浓度为 5mg/mL的溶液，精密量取20pL，依次加入20pL lmg/mL用O.lmol/L HC1新鲜 配制的SnF2， 50!iL 100mg/mL葡庚糖酸钠，50pL 10mg/mL EDTA和800pL pH二6.0的PBS，混匀，加入放射性强度约为lmCi"mTc淋洗液，沸水煮30min;(2) 量取上述溶液O.lmL，加入3mL正辛醇和3mL O.lmol/LpH=7.4的PBS, 涡旋5min，静置分层，4000rpm离心10min，取有机相、水相各lmL，分别测y 计数；(3) 取步骤(2)的有机相lmL，加入2mL正辛醇和3mLO.lmol/LpH=7.4 的PBS，涡旋5min，静置分层，4000rpm离心10min，取油相、水相各lmL， 分别测Y计数为Y油、^每次取油相进行倍比稀释，至少进行5次，每次对倍 比稀释后的油相、水相进行测Y计数Y油、Y水，测定分配系数P=y油/y水，至样 品在两相中的分配比趋于稳定，lgP趋于1.9。本专利技术的有益效果本专利技术采用HPLC法测定N2S2-Memantine的油水分配 系数和99mTc标记测定99mTc-Memantine的油水分配系数。结果25'C时， N2S2-Memantine的油水分配系数lgP为1.70， 99mTc-Memantine的油水分配系数 为lgP为1.9， 结论N2S2-Memantine和99mTc-Memantine呈脂溶性。 附图说明图1 ,Tc-Memantine的结构式。图2 N2S2-Memantine色谱图。图3乙腈-水体系的油相色谱图。图4乙腈-水体系的水相色谱图。 具体实施例方式材料600型高效液相色谱仪及色谱工作站(美国Waters公司)，pH300型pH计(上 海天达仪器有限公司)，AC-2105型分析天平(德国sartorius)， 80-2型离心机(上 海手术机械厂)，1470型自动，计数仪(美国P本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种放射性配基Ｎ↓［２］Ｓ↓［２］－Ｍｅｍａｎｔｉｎｅ的油水分配系数测定方法，其特征在于：放射性配基［９９ｍ］↑Ｔｃ标记前体Ｎ－［２－（Ｎ－（２－巯基乙基））氨基甲酰甲基］－Ｎ－（２－巯基乙基）－３，５－二甲基金刚烷胺基乙酰胺，简称Ｎ↓［２］Ｓ↓［２］－Ｍｅｍａｎｔｉｎｅ，采用Ｎ↓［２］Ｓ↓［２］－Ｍｅｍａｎｔｉｎｅ在正辛醇－水或正辛醇－磷酸盐缓冲液体系中，用ＨＰＬＣ法测定Ｎ↓［２］Ｓ↓［２］－Ｍｅｍａｎｔｉｎｅ的油水分配系数，２５℃时，Ｎ↓［２］Ｓ↓［２］－Ｍｅｍａｎｔｉｎｅ的油水分配系数ｌｇ Ｐ为１．７０，步骤为： （１）溶液配制 精密称取Ｎ↓［２］Ｓ↓［２］－Ｍｅｍａｎｔｉｎｅ １．０ｇ，置于１００ｍＬ量瓶中，加入适量甲醇溶解，加甲醇至刻度，摇匀，得浓度为１０ｍｇ／ｍＬ的贮备液； （２）线性关系确定 精密量取贮备液适量，置于１０ｍＬ量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，分别得到质量浓度为０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０ｍｇ／ｍＬ的系列标准溶液，分别精密吸取各系列标准溶液２０μＬ注入高效液相色谱仪，记录峰面积Ａ；以Ｎ↓［２］Ｓ↓［２］－Ｍｅｍａｎｔｉｎｅ质量浓度ｍｇ／ｍＬ计ρ为横坐标，峰面积Ａ为纵坐标进行线性回归，得Ｎ↓［２］Ｓ↓［２］－Ｍｅｍａｎｔｉｎｅ的线性回归方程为：Ａ＝４×１０↑［６］ρ＋３１７３．１，ｒ↑［２］＝０．９９９６，结果表明Ｎ↓［２］Ｓ↓［２］－Ｍｅｍａｎｔｉｎｅ在０．１～１．０ｍｇ／ｍＬ内呈良好线性关系； 另取０．１ｍｇ／ｍＬ的Ｎ↓［２］Ｓ↓［２］－Ｍｅｍａｎｔｉｎｅ溶液加流动相稀释配成０．００５、０．０１、０．０２、０．０４、０．０６、０．０８、０．１０ｍｇ／ｍＬ的系列标准溶液，分别精密吸取各系列标准溶液２０μＬ注入高效液相色谱仪，记录峰面积Ａ，得到Ｎ↓［２］Ｓ↓［２］－Ｍｅｍａｎｔｉｎｅ的回归方程为：Ａ＝４×１０↑［６］ρ－１８５５．７，ｒ↑［２］＝０．９９８９，表明Ｎ↓［２］Ｓ↓［２］－Ｍｅｍａｎｔｉｎｅ在０．００５～０．１ｍｇ／ｍＬ内也呈良好的线性关系； 色谱条件： 色谱柱：Ｌｉｃｈｏｓｐｈｅｒ Ｃ１８，４．６×２５０ｍｍ，流动相为乙腈、水和三氟乙酸，其中：乙腈∶水体积比为２∶１，三氟乙酸为流动相总体积的２％；紫外检测波长：２３０ｎｍ，流速：１．００ｍＬ／ｍｉｎ，柱温：２５℃； （３）油水分配系数的测定 精密称取Ｎ↓［２］Ｓ↓［２］－Ｍ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：钦晓峰，周杏琴，张建康，徐希杰，颜成龙，曹国宪，邹美芬，
申请(专利权)人：江苏省原子医学研究所，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]
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