高效增强人体抗结核分枝杆菌感染免疫功能的复合营养素制造技术

本发明专利技术属于人体营养素技术领域，具体为高效增强人体抗结核分枝杆菌感染免疫功能的复合营养素。本发明专利技术复合营养素主要包含三种成份：维生素D、维生素C、特殊泡制的绿茶；服用方法：维生素C，每天服用维生素C的量为0.6克，连续服用14天；将4g绿茶用煮沸的80‑120ml开水密封浸泡25‑35分钟，每天服用3次，连续服用14天；维生素D，规格8ml:15mg，每支含30万单位维生素D3；每次口服1支，相隔1月服1支。该复合营养素能够有效诱导活化人体的免疫系统，活化免疫细胞如Vγ2Vδ2 T细胞，增强人体对于病原体感染的免疫抵抗能力以及对于肿瘤的免疫功能，可用于临床结核病及相关感染性疾病以及肿瘤的辅助治疗。

【技术实现步骤摘要】
高效增强人体抗结核分枝杆菌感染免疫功能的复合营养素
本专利技术属于人体营养素
，具体涉及增强人体抗结核分枝杆菌感染免疫功能的复合营养素及其服用方法。
技术介绍
结核病tuberculosis（TB）是一种重大呼吸道传染病，其病原菌主要包括结核分枝杆菌（Mycobacteriumtuberculosis,Mtb）及其复合菌群。结核病的发生和发展与人体的免疫状况密切相关。结核分枝杆菌感染后，在人体免疫状况较差时，人体无法控制该病原菌在体内的感染和繁殖，将直接发生活动性结核病（activeTB）；在人体免疫状况一般时，人体有效控制了病原菌在体内的进一步繁殖，但是也没有彻底清除感染的病原菌，人体和病原菌形成一种平衡状态，即潜伏结核感染（Latenttuberculosisinfection,LTBI）。潜伏结核感染状态可以维持终生不发病，但是当宿主免疫状况变差时，就会诱发结核分枝杆菌繁殖，从而形成活动性结核病。最新的研究证实，当人体的免疫状况较强时，人体能够彻底清除感染的结核分枝杆菌，这类人群被称作结核感染抗性人群（Resisters）。所以，增强人体免疫力，将有助于结核病的预防和治疗。结核分枝杆菌属于胞内寄生菌，人体细胞免疫在抵抗结核菌感染过程中发挥重要作用。由此，提高人体细胞免疫水平将增强人体抗结核分枝杆菌感染的能力。专利技术人团队一直致力于结核病的免疫学研究，主要以灵长类动物模型和人体，深入探究机体对结核分枝杆菌感染的免疫作用机制。基于多年的研究经验，本专利技术提供一种新型的增强人体抗分枝杆菌感染的复合营养素及其制备方法。在人体试验证明服用该营养素后人体细胞对于分枝杆菌的杀灭功能显著增强。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种效果优异、制备方便、原料来源广泛的增强人体抗结核分枝杆菌感染免疫功能的复合营养素及其服用方法。本专利技术提供的增强人体抗结核分枝杆菌感染免疫功能的复合营养素，主要包含三种成份：（1）维生素D(vitaminD，简写为VitD)。众多的研究已经证实VitD在结核病治疗过程中具有很好的辅助治疗效果。VitD可诱导人体吞噬细胞产生抗菌肽，抑制病原体的生长；而且VitD辅助治疗有助于结核病人痰菌阴转，降低结核炎症反应等(1-4)；（2）维生素C(vitaminC，简写为VitC)。VitC能够抑制结核菌生长，刺激分泌抗结核因子IL-1和TNF-α，促进人体对结核菌的杀菌效果(5-7)；（3）特殊泡制的绿茶，其含alkylamine（羟胺）磷酸抗原，可活化人类外周循环γδT细胞里比例最高的Vγ2Vδ2T细胞亚群(占γδT总数的65-90%)。我们的系列研究证明在灵长类中Vγ2Vδ2T细胞可免疫调节及控制结核感染，对肺结核等有保护作用。而且有资料证明，连续2周每天饮用特殊泡制浓茶可使Vγ2Vδ2T细胞抗感染效应功能增加15倍，预防感冒及流感(8-11)。本专利技术复合营养素的服用方法：特殊泡制的绿茶和维生素C，连续服用14天；维生素D服用一次；具体如下：（1）维生素C，每天服用维生素C的量为0.6克，连续服用14天；（2）特殊泡制的绿茶，每次将4g绿茶（市购普通绿茶）用煮沸的约80-120ml开水密封浸泡25-35分钟，或者直接将4g绿茶加入煮沸的约80-120ml开水中继续煮沸4-6分钟；每天服用3次，连续服用14天；（3）维生素D，具体使用的产品为胆维丁乳，规格8ml:15mg，每支含30万单位维生素D3。每次口服1支，可相隔1月再服1支，以每年不超过4支为宜。其它来源的可食用维生素D3都可以加入本复合营养素。本专利技术复合营养素中的三种成分，来源广泛，平时人们经常食用的、安全的食品或保健品。该复合营养素能够有效诱导活化人体的免疫系统，活化免疫细胞如Vγ2Vδ2T细胞，增强人体对于病原体（包括结核分枝杆菌，其它分枝杆菌以及胞内感染细菌，病毒）感染的免疫抵抗能力以及对于肿瘤的免疫功能。该复合营养素可以用于临床结核病及相关感染性疾病以及肿瘤的辅助治疗。附图说明图1为血浆对于分枝杆菌生长的影响。图2为外周淋巴细胞对于巨噬细胞内结核分枝杆菌生长的影响。图3为外周淋巴细胞中Vγ2Vδ2T细胞占CD3T细胞的比例。具体实施方式下面通过实验例子进一步介绍本专利技术。1、外周淋巴细胞分离及刺激条件受试者在服用复合营养素之前和服用14天后，各采集一次外周血。每次采集外周血10ml，用抗凝管收集。外周血离心，收集上清血浆。细胞层采用Ficoll分离方法，来分离外周淋巴细胞（PBMC）。2、细胞对胞内结核菌的杀菌实验外周淋巴细胞（PBMC）与感染结核分枝杆菌巨噬细胞THP-1按10:1的比例混合，共同培养5天后，采用SDS裂解细胞，按照一定比例稀释后，将裂解液涂到7H10平板上，在37℃条件下培养3-4周，进行菌落计数。3、血浆对分枝杆菌的杀菌实验受试者血浆按照1/10的比例加入含有分枝杆菌（例如BCG等）7H9培养基中，培养5天后，按照一定比例稀释，将裂解液涂到7H10平板上，在37℃条件下培养3-4周，进行菌落计数。4、流式细胞分析方法检测特异细胞亚群的比例收集待测细胞，按照我们已经建立的方法采用特异流式抗体与细胞混合孵育，洗掉未结合的抗体，在流式细胞分析仪进行分析。实验结果1、服用复合营养素后受试者的血浆对于分枝杆菌体外生长具有显著抑制作用为了验证复合营养素对人体抗结核分枝杆菌免疫力的影响，分别收集受试者在服用复合营养素前和服用后的血浆，然后检测血浆在体外对于结核分枝杆菌生长的抑制效果。受试者在服用复合营养素前和服用复合营养素后的外周血分离的血浆按照1/10的比例加入结核分枝杆菌的培养基中，培养7天后，培养液稀释涂布7H10平板，3-4周后的菌落计数结果（图1）。结果表明，在服用复合营养素后，受试者的血浆处理组的菌落数目显著低于服用前的血浆处理组。结果证明服用复合营养素能够增强人体血浆对于结核分枝杆菌的抑制或杀灭作用效果。2、服用复合营养素后受试者的外周淋巴细胞对巨噬细胞内感染结核杆菌的杀菌能力显著增强为了检测服用复合营养素对人体免疫细胞活性的影响，在受试者服用复合营养素前和服用后分别采集外周血，分离外周淋巴细胞。淋巴细胞与感染了分枝杆菌BCG的巨噬细胞THP-1混合培养。然后裂解细胞，稀释后涂板进行菌落计数。受试者在服用复合营养素前和服用复合营养素后的外周淋巴细胞与感染结核分枝杆菌感染的巨噬细胞混合培养3天，然后裂解细胞，稀释裂解液涂布7H10平板，3-4周后的菌落计数结果（图2）。结果表明，所有受试者服用复合维生素之后的淋巴细胞处理组的菌落数目都低于各自服用复合维生素前的淋巴细胞处理组。结果证明人体服用复合营养素后，外周淋巴细胞对胞内感染结核分枝杆菌的杀菌能力显著增强。3、服用复合营养素后受试者的外周淋巴细胞中Vγ2Vδ2T细胞的比例显著增强为了检测特殊泡制的绿茶汤中的磷酸抗原是否本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高效增强人体抗结核分枝杆菌感染免疫功能的复合营养素，其特征在于，主要包含三种成份：/n（1）维生素D ；/n（2）维生素C ；/n（3）特殊泡制的绿茶，其含羟胺磷酸抗原，可活化人类外周循环γδ T细胞里比例最高的Vγ2Vδ2 T细胞亚群。/n

【技术特征摘要】
1.一种高效增强人体抗结核分枝杆菌感染免疫功能的复合营养素，其特征在于，主要包含三种成份：
（1）维生素D；
（2）维生素C；
（3）特殊泡制的绿茶，其含羟胺磷酸抗原，可活化人类外周循环γδT细胞里比例最高的Vγ2Vδ2T细胞亚群。


2.一种如权利要求1所述复合营养素的服用方法，其特征在于，特殊泡制的绿茶和维生素C，连续服用14天；维生素D服用一次；具体如...

【专利技术属性】
技术研发人员：王菲菲，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：上海;31