NALCN蛋白在食管鳞癌预后预测中的应用制造技术

本发明专利技术属于医药生物技术领域，具体公开了一种预测食管鳞癌预后的标志物——NALCN蛋白以及NALCN蛋白的检测试剂在制备预测食管鳞癌预后中的应用。NALCN蛋白在食管鳞癌癌旁正常上皮组织中为阴性表达，在食管鳞癌癌组织中有不同程度的阳性表达，NALCN蛋白阳性表达的食管鳞癌患者，其生存期短。通过检测组织样品中NALCN蛋白的表达，可以有效区分食管鳞癌患者的生存期，从而为食管鳞癌预后预测的判断提供了新途径，为临床医生对于食管鳞癌病情分析提供了参考依据。

【技术实现步骤摘要】
NALCN蛋白在食管鳞癌预后预测中的应用
本专利技术属于医药生物
，具体涉及NALCN蛋白在食管鳞癌预后预测中的应用。
技术介绍
食管癌是人类常见的消化道恶性肿瘤之一。食管癌的主要组织病理类型包括食管鳞癌和食管腺癌，中国是以食管鳞癌为主要类型，西方国家则是以食管腺癌为主要类型，中国是食管鳞癌的发病率和死亡率最高的国家之一。食管鳞癌起病隐匿，早期症状不明显，就诊的患者多为中晚期，所以食管鳞癌患者的预后极差，术后5年生存率不足25％。食管鳞癌的预后与确诊时疾病的进程密切相关，早期发现、早期诊断、早期治疗对提高食管鳞癌患者的生存期长短至关重要。目前，在临床诊疗中缺少食管鳞癌的预后预测的分子靶标，我们亟需找到一种敏感性高、特异性强的食管鳞癌相关的肿瘤标志物，并作为临床诊断、预后判断和个体化治疗的依据。因此，找到新的食管鳞癌预后相关的肿瘤标志物，有效区分食管鳞癌患者的预后，则可以有效指导临床治疗，实现个体化精准治疗，对提高食管鳞癌患者的生存率、改善患者生存质量至关重要。目前发现的有关食管鳞癌的肿瘤指标物极少，被临床接受应用的则更少，肿瘤标志物对食管鳞癌患者的辅助诊断仍处于探索阶段。本专利技术人所在研究团队在食管鳞癌中发现NALCN基因及其表达产物和食管鳞癌的发生发展及预后密切相关，但是，关于NALCN基因在消化道肿瘤相关领域的研究报道还是一片空白，特别是食管鳞癌的研究领域。
技术实现思路
本专利技术的目的在于旨在提供一种可用于食管鳞癌预后预测的标志物及其应用。为实现专利技术目的，本专利技术采用的技术方案如下：本专利技术首先提供了一种可以预测食管鳞癌病人预后的分子标志物，所述分子标志物为NALCN基因(sodiumleakchannel,non-selective，别名VGCNL1)编码的NALCN蛋白。所述NALCN蛋白(全名Sodiumleakchannelnon-selectiveprotein)，其GenBank登记号为NP_001337677.1。通过免疫组织化学检测NALCN蛋白表达具有以下特征：(1)NALCN蛋白在食管鳞癌癌旁正常上皮组织中为阴性表达，在食管鳞癌癌组织中有不同程度的阳性表达；(2)通过和临床病理特征的关联分析，发现NALCN蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达和肿瘤的浸润程度呈相关性；(3)NALCN蛋白阳性表达的食管鳞癌患者，其生存期短。本专利技术还提供了一种NALCN蛋白的检测试剂在制备预测食管鳞癌预后产品中的应用。根据上述的应用，优选地，所述产品通过WesternBlot(蛋白印迹)、免疫组织化学或酶联免疫吸附检测样本中NALCN蛋白的表达水平。根据上述的应用，优选地，所述产品中含有与NALCN蛋白特异性结合的抗体。根据上述的应用，优选地，所述抗体为多克隆抗体或单克隆抗体。根据上述的应用，优选地，所述抗体为单克隆抗体，该抗体为采用本领域公知的方法制备得到的抗体或购买的抗体。更加优选地，所述NALCN抗体购自NovusBiologicals公司，货号为NBP1-90028。根据上述的应用，优选地，所述样本为组织样品、血清或细胞。根据上述的应用，优选地，所述样本为食管鳞癌手术切除组织样品或内镜活检组织样品。根据上述的应用，优选地，所述组织样品的检测是采用免疫组织化学法对组织样品中的NALCN蛋白进行检测，确定组织样品中NALCN蛋白的表达水平。本专利技术还提供了一种预测食管鳞癌预后的产品，其特征在于，所述产品包含检测NALCN蛋白的表达水平的试剂。根据上述的产品，优选地，所述试剂为与NALCN蛋白特异性结合的抗体。根据上述的产品，优选地，所述抗体为多克隆抗体或单克隆抗体。根据上述的产品，优选地，所述抗体为单克隆抗体，该抗体为采用本领域公知的方法制备得到的抗体或购买的抗体。更加优选地，所述NALCN抗体购自NovusBiologicals公司，货号为NBP1-90028。根据上述的产品，优选地，所述产品为芯片、制剂或试剂盒。本专利技术中食管鳞癌预后预测的判断方法为：NALCN蛋白表达阳性，则食管鳞癌患者生存期短(食管鳞癌患者生存期短是指与NALCN蛋白表达阴性的患者相比，生存期更短)；NALCN蛋白表达阴性，则食管鳞癌患者生存期长；其中，NALCN蛋白表达阳性的判断标准为本领域公知，在进行表达阳性判断时，可以设立NALCN蛋白表达阳性的阳性对照和NALCN蛋白不表达的阴性对照。所述生存期的计算方式为本领域所公知，是指从患者经病理诊断确诊开始至患者因任何原因引起死亡的时间或健在患者由病理诊断确诊时间至末次随访的时间。与现有技术相比，本专利技术取得的积极有益效果为：(1)本专利技术提供了一种可以有效区分食管鳞癌患者生存期的分子标志——NALCN蛋白，NALCN蛋白阳性表达的患者组生存时间较NALCN阴性表达的患者组短(P<0.05)，说明NALCN蛋白的阳性表达与食管鳞癌的不良预后相关，因此，通过检测组织样品中NALCN蛋白的表达水平，能够对食管鳞癌患者预后进行预测，从而为食管鳞癌预后预测的判断提供了新途径，为临床医生对于食管鳞癌病情分析提供了参考依据。(2)本专利技术提供的预测食管鳞癌预后的试剂盒能够快速检测食管鳞癌手术切除组织样品或内镜活检组织样品中NALCN蛋白的表达水平，可用于食管鳞癌的预后预测。该试剂盒操作简单，使用方便，使得食管鳞癌的预后预测更加方便易行。附图说明图1为食管鳞癌癌组织中不同染色评分的NALCN蛋白免疫组织化学染色显微图。图2为食管鳞癌癌组织及配对癌旁正常鳞状上皮组织中NALCN蛋白免疫组化染色显微图。图3为Kaplan-Meier分析食管鳞癌癌组织中NALCN蛋白表达的生存曲线图。图4为Kaplan-Meier分析食管鳞癌内镜活检组织中NALCN蛋白表达的生存曲线图。具体实施方式以下结合具体实施例对本专利技术作进一步的阐明，这些实施例仅用于说明本专利技术但并不限制本专利技术范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，均采用本
常规技术，或按照生产厂商所建议的条件；所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。SPSS25.0软件用于数据统计和分析。P<0.05代表统计结果有意义。采用卡方检验分析NALCN蛋白表达水平与临床病理特征之间的联系。Kaplan-Meier曲线和Log-rank检验用于分析NALCN蛋白表达水平与食管鳞癌患者的生存时间的相关性，分析NALCN蛋白表达水平用于食管鳞癌预后评估的价值。采用Cox风险比例回归模型进行单因素和多因素回归分析。本专利技术中食管鳞癌病理分级根据UICC(TheUnionforInternationalCancerControl)分期第六版病理标准进行分级，具体地，原发肿瘤(T)分期，Tx：原发肿瘤无法评估；T0：没有原发肿瘤的证据；Tis：原位癌：上皮内癌或粘膜内癌未穿透粘膜肌层而达本文档来自技高网...

【技术保护点】
1. NALCN蛋白的检测试剂在制备预测食管鳞癌预后产品中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.NALCN蛋白的检测试剂在制备预测食管鳞癌预后产品中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品通过WesternBlot、免疫组织化学或酶联免疫吸附检测样本中NALCN蛋白的表达水平。


3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述产品中含有与NALCN蛋白特异性结合的抗体。


4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述抗体为多克隆抗体或单克隆抗体。


5.根据权利要求1-4任一所...

【专利技术属性】
技术研发人员：王立东，靳艳，范宗民，宋昕，杨苗苗，王苒，周福有，李恩民，高社干，秦艳茹，杨道科，常志伟，陈志国，李秀敏，
申请(专利权)人：郑州大学第一附属医院，新乡医学院，安阳市肿瘤医院，汕头大学医学院，河南科技大学第一附属医院，
类型：发明
国别省市：河南;41