病理切片制作过程中一种新型的脱蜡方法技术

本发明专利技术公开了一种病理切片的制作方法，包括取材、固定、脱水、透明、浸蜡、组织包埋、切片、拷片、脱蜡、染色等步骤。本发明专利技术的病理切片的制作方法采用自己实验室自主室创新的一种新型脱蜡方法，大大的缩短了脱蜡时间，并且在脱蜡过程中避免了使用二甲苯，简化实验操作步骤，而且省时环保。

【技术实现步骤摘要】
病理切片制作过程中一种新型的脱蜡方法
本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种新型的脱蜡方法。
技术介绍
取一定大小的病变组织，用病理组织学方法制成病理切片〔通常将病变组织包埋在石蜡块里，用切片机切成薄片，再用苏木精－伊红(H-E)染色〕,用显微镜进一步检查病变。病变的发生发展过程，最后做出病理诊断。病理切片制作时，将部分有病变的组织或脏器经过各种化学品和埋藏法的处理，使之固定硬化，在切片机上切成薄片，粘附在载玻片上，染以各种颜色，供在显微镜下检查，以观察病理变化，做出病理诊断，为临床诊断和治疗提供帮助，或支持药物临床前药理毒理研究。然而，目前病理实验室采用现有技术，该现有技术不仅制作麻烦，费工费时，而且污染环境，不利于环保。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种新型的脱蜡方法。为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：一种病理切片的制作方法，具体包括以下步骤：S1、取材：选择其体积大致为2cm×2cm×3mm；如果取动物的脑子等比较大的器官时，注意要当中切两下，这样会使福尔马林溶液完全浸透组织；S2、固定：选择适量的固定液迅速固定动物新鲜的组织；S3、脱水、透明、浸蜡：选择合适的脱水剂把S2固定后含有较多水分的组织脱水；选择不同浓度的酒精作为脱水剂，然后选择二甲苯作为酒精和石蜡相互作用的溶剂，该二甲苯也是最好的透明剂；用石蜡的目的是浸蜡来除去二甲苯，使得石蜡完全占据组织，便于后续的包埋；S4、组织包埋：把脱水后的组织放入包埋专用的小铁盒内，注意组织下面的平整度，然后接一点石蜡，刚覆盖包埋盒就好，然后置于冷却板冷却；S5、切片：所述切片包括初切和细切，该初切目的是让组织完全暴露在蜡块表面，初切的厚度一般可以选择40微米，初切完蜡块之后要把蜡块置于包埋机冷却板或者冰块里面；然后细切，细切的厚度一般可以选择3到5微米；细切的时候注意运用加湿器，这样切出来的组织片不会干的太厉害，挑选褶皱少的，相对很整齐的切片放入展片机内，展片机里面的水要用水温在40-450C的蒸馏水；S6、拷片：等组织片完全展开之后，用载玻片捞上来，注意捞的时候在组织片和载玻片之间尽量不要有水分，捞起来之后，要甩一甩，这样能使组织和载玻片之间的水分变得更少一些，把标记好的及甩完之后的载玻片放置在温度为60摄氏度的拷片机中烤干；S7、脱蜡：选择石蜡——二甲苯——酒精——水的方法脱蜡或者一种新型脱蜡方法；S8、染色：常用的染色方法为苏木素-伊红染色法，简称he染色，具体过程如下：（1）百分之零点五的苏木素四分钟；（2）百分之一的盐酸十五秒；（3）伊红十五秒，每次过程都要经过流水两到三分钟；S9、最后一步吹干及封片。优选的，在S2中，所述固定液为百分之十的甲醛溶液或者百分之七十五的无水乙醇。优选的，所述甲醛溶液中的甲醛的浓度为百分之三十五到百分之四十。优选的，在S7中，所述石蜡——二甲苯——酒精——水的方法为：石蜡和水不相溶，脱蜡一般要溶于二甲苯和酒精，因为石蜡溶于二甲苯，二甲苯又溶于酒精，酒精又溶于水，所以这样逐级置换就能把石蜡和二甲苯完全置换出来；具体步骤如下：（1）先倒入同样浓度的二甲苯分两次；第一次二甲苯十分钟，第二次二甲苯十分钟；（2）然后就是倒入不同浓度的无水乙醇，无水乙醇依照次序：百分之百的无水乙醇一分钟；百分之百的无水乙醇一分钟；百分之九十五的无水乙醇两分钟；百分之九十五的无水乙醇两分钟；百分之八十的无水乙醇两分钟；（3）最后流水冲洗。优选的，在S7中，该新型脱蜡方法仅有三步，并且所需时间很短；具体步骤如下：（1）把水烧至特定温度下；（2）把5毫升的特殊溶剂（环保材料，手可以直接触碰）置于一个小铁锅内，倒入刚烧的热水，把载玻片置于小铁锅内，定时相应时间；重复以上步骤；（3）最后流水冲洗。该方法大大的缩短了脱蜡时间，并且在脱蜡过程中避免了使用二甲苯，省时环保。本专利技术提供的一种病理切片的制作方法，与现有技术相比，本专利技术的病理切片的制作方法采用自己实验室自主室创新的一种新型脱蜡方法，大大的缩短了脱蜡时间，并且在脱蜡过程中避免了使用二甲苯，简化实验操作步骤，而且省时环保。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。实施例1一种病理切片的制作方法，具体包括以下步骤：S1、取材：选择其体积大致为2cm×2cm×3mm；如果取动物的脑子等比较大的器官时，注意要当中切两下，这样会使福尔马林溶液完全浸透组织；S2、固定：选择百分之十的甲醛溶液迅速固定动物新鲜的组织，其甲醛的浓度为百分之三十八到百分之四十；S3、脱水、透明、浸蜡：选择合适的脱水剂把S2固定后含有较多水分的组织脱水；选择不同浓度的酒精作为脱水剂，然后选择二甲苯作为酒精和石蜡相互作用的溶剂，该二甲苯也是最好的透明剂；用石蜡的目的是浸蜡来除去二甲苯，使得石蜡完全占据组织，便于后续的包埋；S4、组织包埋：把脱水后的组织放入包埋专用的小铁盒内，注意组织下面的平整度，然后接一点石蜡，刚覆盖包埋盒就好，然后置于冷却板冷却；S5、切片：所述切片包括初切和细切，该初切目的是让组织完全暴露在蜡块表面，初切的厚度一般可以选择40微米，初切完蜡块之后要把蜡块置于包埋机冷却板或者冰块里面；然后细切，细切的厚度一般可以选择3到5微米；细切的时候注意运用加湿器，这样切出来的组织片不会干的太厉害，挑选褶皱少的，相对很整齐的切片放入展片机内，展片机里面的水要用水温在40-450C的蒸馏水；S6、拷片：等组织片完全展开之后，用载玻片捞上来，注意捞的时候在组织片和载玻片之间尽量不要有水分，捞起来之后，要甩一甩，这样能使组织和载玻片之间的水分变得更少一些，把标记好的及甩完之后的载玻片放置在温度为60摄氏度的拷片机中烤干；S7、脱蜡：选择石蜡——二甲苯——酒精——水的方法脱蜡；石蜡和水不相溶，脱蜡一般要溶于二甲苯和酒精，因为石蜡溶于二甲苯，二甲苯又溶于酒精，酒精又溶于水，所以这样逐级置换就能把石蜡和二甲苯完全置换出来；具体步骤如下：（1）先倒入同样浓度的二甲苯分两次；第一次二甲苯十分钟，第二次二甲苯十分钟；（2）然后就是倒入不同浓度的无水乙醇，无水乙醇依照次序：百分之百的无水乙醇一分钟；百分之百的无水乙醇一分钟；百分之九十五的无水乙醇两分钟；百分之九十五的无水乙醇两分钟；百分之八十的无水乙醇两分钟。（3）最后流水冲洗。经实验鉴定该方法相对太过于繁琐，所花费的时间很长，并且二甲苯对人体是有害的。S8、染色：常用的染色方法为苏木素-伊红染色法，简称he染色，具体过程如下：（1）百分之零点五的苏木素四分钟；（2）百本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.病理切片制作过程中一种新型的脱蜡方法，其特征在于，具体包括以下步骤：/nS1、取材：选择其体积大致为2cm×2cm×3mm；如果取动物的脑子等比较大的器官时，注意要当中切两下，这样会使福尔马林溶液完全浸透组织；/nS2、固定：选择适量的固定液迅速固定动物新鲜的组织；/nS3、脱水、透明、浸蜡：选择合适的脱水剂把S2固定后含有较多水分的组织脱水；选择不同浓度的酒精作为脱水剂，然后选择二甲苯作为酒精和石蜡相互作用的溶剂，该二甲苯也是最好的透明剂；用石蜡的目的是浸蜡来除去二甲苯，使得石蜡完全占据组织，便于后续的包埋；/nS4、组织包埋：把脱水后的组织放入包埋专用的小铁盒内，注意组织下面的平整度，然后接一点石蜡，刚覆盖包埋盒就好，然后置于冷却板冷却；/nS5、切片：所述切片包括初切和细切，该初切目的是让组织完全暴露在蜡块表面，初切的厚度一般可以选择40微米，初切完蜡块之后要把蜡块置于包埋机冷却板或者冰块里面；然后细切，细切的厚度一般可以选择3到5微米；细切的时候注意运用加湿器，这样切出来的组织片不会干的太厉害，挑选褶皱少的，相对很整齐的切片放入展片机内，展片机里面的水要用水温在40-45

【技术特征摘要】
1.病理切片制作过程中一种新型的脱蜡方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
S1、取材：选择其体积大致为2cm×2cm×3mm；如果取动物的脑子等比较大的器官时，注意要当中切两下，这样会使福尔马林溶液完全浸透组织；
S2、固定：选择适量的固定液迅速固定动物新鲜的组织；
S3、脱水、透明、浸蜡：选择合适的脱水剂把S2固定后含有较多水分的组织脱水；选择不同浓度的酒精作为脱水剂，然后选择二甲苯作为酒精和石蜡相互作用的溶剂，该二甲苯也是最好的透明剂；用石蜡的目的是浸蜡来除去二甲苯，使得石蜡完全占据组织，便于后续的包埋；
S4、组织包埋：把脱水后的组织放入包埋专用的小铁盒内，注意组织下面的平整度，然后接一点石蜡，刚覆盖包埋盒就好，然后置于冷却板冷却；
S5、切片：所述切片包括初切和细切，该初切目的是让组织完全暴露在蜡块表面，初切的厚度一般可以选择40微米，初切完蜡块之后要把蜡块置于包埋机冷却板或者冰块里面；然后细切，细切的厚度一般可以选择3到5微米；细切的时候注意运用加湿器，这样切出来的组织片不会干的太厉害，挑选褶皱少的，相对很整齐的切片放入展片机内，展片机里面的水要用水温在40-450C的蒸馏水；
S6、拷片：等组织片完全展开之后，用载玻片捞上来，注意捞的时候在组织片和载玻片之间尽量不要有水分，捞起来之后，要甩一甩，这样能使组织和载玻片之间的水分变得更少一些，把标记好的及甩完之后的载玻片放置在温度为60摄氏度的拷片机中烤干；
S7、脱蜡：选择石蜡——二甲苯——酒精——水的方法脱蜡或者一种新型脱蜡方法；
S8、染色：常用的染色方法为苏木素-伊红染色法，简称he染色，具体过程如下...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱稳森，
申请(专利权)人：北京恩睿康农业技术咨询有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11