LncRNA XIST及与其结合的miR-132作为抑制胃癌细胞增殖、侵袭与转移的用途制造技术

本发明专利技术公开了一种长链非编码RNA XIST和与之结合的miR‑132在抑制胃癌细胞增殖、侵袭与转移的用途。本发明专利技术的长链非编码RNA XIST的si‑XIST，能够沉默LncRNA XIST，导致LncRNA XIST对miR‑132的吸附能力下降，而miR‑132能与CUL4B的基因结合，最终下调CUL4B的表达，从而抑制胃癌细胞的增殖、侵袭转移及成瘤能力，促进胃癌细胞的凋亡。本发明专利技术公开的LncRNA XIST和miR‑132的应用可能有助于胃癌的靶向治疗和临床治疗。

【技术实现步骤摘要】
LncRNAXIST及与其结合的miR-132作为抑制胃癌细胞增殖、侵袭与转移的用途
本专利技术涉及一种与胃癌相关的长链非编码RNA和与其结合的microRNA在抑制胃癌细胞增殖、侵袭与转移中的用途，所述的长链非编码RNA为LncRNAXIST，所述的microRNA为miR-132，属于生物医药领域，具体属于分子生物学

技术介绍
胃癌(gastriccarcinoma,GC)是一种常见的恶性肿瘤，在我国各种恶性肿瘤中发病率居首位。由于绝大多数胃癌早期无明显症状或特异性症状，因此容易被忽略，导致目前胃癌的早期诊断率较低。一旦发现，其已经发展至中晚期，导致其病死率很高，能达到75％。造成胃癌发生发展的原因主要有4种，一是地域环境及饮食生活因素，二是幽门螺杆菌(helicobacterpylori，Hp)感染，三是癌前病变，四是遗传和基因因素；其中，幽门螺杆菌感染。有是胃癌最主要的危险因素。目前已出现许多针对胃癌的先进的检查和诊断方法。其中，诊断方法有：X线钡餐检查、纤维胃镜检查、腹部超声、螺旋CT与正电子发射成像检查；或针对肿瘤标志物进行检测(如CEA、CA50、CA72-4、CA19-9等)；治疗方法有标准治疗，如手术治疗、化疗或靶向药物治疗。化疗药物常采用伊立替康(irinotecan)、紫杉烷(taxanes)、氟嘧啶(fluoropyrimidine)和铂碱(platinumbase)等；靶向治疗药物有细胞凋亡促进剂、表皮生长因子受体抑制剂、基质金属蛋白酶抑制剂、血管生成抑制剂、细胞周期抑制剂等。但胃癌患者的平均生存期仍然很低，只有约8-10个月，且预后很差，造成该现象的主要原因可能是胃癌的早期检测困难以及缺乏有效的治疗靶点。因此，研究者们将胃癌防控与治疗的方向的重点集中于针对胃癌的早期诊断和有效治疗靶点的研究。进入21世纪后，随着现代生物技术突风猛进的发展，尤其是基因测序技术和基因组分析技术的成熟，科学家们发现大部分基因被转录为非编码RNA(non-codingRNA，ncRNAs)。根据RNA编码长度的不同，非编码RNA分为两种。一种为长度小于200个核苷酸的RNA，主要有微小RNA(miRNAs)，小干扰RNA(siRNAs)等。其中，miRNAs是一种小的(约22个核苷酸)非编码RNA，在细胞增殖、分化、凋亡和癌变等多种生物学和病理过程中起着重要作用；miRNAs参与了肿瘤发展的各个阶段，表明在肿瘤发展过程中，miRNA的异常表达对已知癌基因或抑癌基因的表达起着重要的调节作用。有文献报道，在胃癌发生发展过程中，miRNA可以发挥促进肿瘤发生发展或抑制肿瘤发生发展的作用，其在胃癌的诊断、预后、检测和治疗中有着巨大的研究和应用前景。另外一种非编码RNA由于长度超过200个核苷酸，因此被称为长链非编码RNA(longnon-codingRNA,LncRNA)。长链非编码RNA的长度一般在200-100000个核苷酸之间，位于细胞核或胞质内，按照其来源可分为反义长非编码RNA(AntisenseLncRNA)，内含子非编码RNA(Intronictran)，LongintergencnoncodingRNA(lincRNA)，启动子相关LncRNA(Promoter-associatedLncRNA)，非翻译区LncRNA(UTRassociatedLncRNA)五种类型。LncRNA功能繁多，与人类疾病的发生、发展和防治息息相关。例如LncRNA可以参与调控表观遗传、转录及转录后水平上基因的表达；参与X染色体沉默、基因组印记以及染色质修饰、转录激活、转录干扰、核内运输等多种重要的调控过程。另外，也有文献报道，长链非编码RNA参与胃癌细胞的侵袭、迁移和淋巴结转移的过程中，其在胃癌的诊断、预后、检测和治疗中可能有着很好的研究价值和应用前景。因此，针对胃癌的早期诊断和/或治疗，筛选和进一步研究与胃癌发生发展相关的miRNAs和/或LncRNA是一个非常有前景的方向。长链非编码RNA起到miRNA的海绵作用，能够调控靶基因的表达。LncRNAXIST(lncRNAX-inactivespecifictranscript，LncRNAXIST)是一种长链非编码RNA，该长链非编码RNA在人类细胞基因维护、增殖和分化中具有重要作用，可对X染色体在转录水平上进行调控。科学家们发现LncRNAXIST在非小细胞肺癌(NSCLC)表达上调，而miR-137在非小细胞肺癌中表达异常下调。这说明LncRNAXIST是miR-137的竞争性内源性RNA(ceRNA)，可以促进NSCLC细胞的存活和侵袭；而miR-137靶向paxillin(PXN)的3'UTR，则可以抑制非小细胞肺癌细胞的活力和侵袭；同时，miR-137与PXN表达呈负相关，即LncRNAXIST与PXN表达呈正相关。Paxillin(PXN)作为一种具有多种功能的局灶性粘附适配蛋白，在局灶性粘附、肿瘤进展和迁移、内皮细胞屏障功能障碍、炎症反应和氧化应激等方面发挥重要作用。PXN在人类癌症进展中也经常出现异常表达，有报道称PXN与胃癌细胞系AGS的细胞侵袭性相关。同时，有研究发现，PXN基因敲除或miR-137异常表达可明显抑制结直肠癌细胞体外增殖、迁移和侵袭，抑制肿瘤生长和转移。因此抑制miR-137诱导的PXN过表达促进了结直肠癌肿瘤的转移和发展，其可作为结直肠癌患者独立的预后指标。此外，miR-132在胃癌组织中的表达水平明显高于相应的正常组织，其与更多的淋巴结转移、更多的淋巴管癌栓和更多的胃癌晚期有关，因此，miR-132也可作为胃癌患者的有效预后因素，成为胃癌的另一个有希望的诊断和/或治疗靶标。在胃癌的发生和发展中，miR-132和/或LncRNAXIST可能通过PXN或者其他的靶点起着重要作用，为科学家们在胃癌的诊断和/或治疗中提供成为一个新的研究方向。
技术实现思路
为了研究与胃癌相关的miRNA和相关的长链非编码RNA在胃癌中的作用，从而筛选合适的可以作为抑制胃癌细胞增殖、侵袭与转移的用途的相关的长链非编码RNA或miRNA。我们从医院收集了手术切除的65例胃癌及癌旁组织，通过相关的技术手段，从中找到了可以作为抑制胃癌细胞增殖、侵袭与转移中的用途的LncRNAXIST和与其能够直接结合的miR-132。因此，本专利技术一方面提供了一种LncRNAXIST，所述的LncRNAXIST的si-XIST作为抑制胃癌细胞增殖、侵袭与转移的用途。优选地，本专利技术所述的LncRNAXIST的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示。优选地，本专利技术所述的si-XIST的核苷酸序列如SEQIDNO：2所示。优选地，本专利技术所述的si-XIST的核苷酸序列如SEQIDNO：3所示。另一方面，本专利技术还提供了一种能与LncRNAXIST直接结合的miR-132作为抑制胃癌细胞增殖、侵袭与转移的用途。优选地，本专利技术所述的miR-132的核苷酸序列如SEQIDNO：4所示。优选地，本专利技术所述的miR-132的靶基因为本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种长链非编码RNA，所述长链非编码RNA为LncRNAXIST，其特征在于，所述的LncRNAXIST的si-XIST作为抑制胃癌细胞增殖、侵袭与转移的用途。/n

【技术特征摘要】
1.一种长链非编码RNA，所述长链非编码RNA为LncRNAXIST，其特征在于，所述的LncRNAXIST的si-XIST作为抑制胃癌细胞增殖、侵袭与转移的用途。


2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的LncRNAXIST的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示。


3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的si-XIST的核苷酸序列如SEQIDNO：2所示。


4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的si-XIST的核苷酸序列如S...

【专利技术属性】
技术研发人员：李丽丽，刘佳利，黄娅，
申请(专利权)人：湖南省科域生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43