双光子显微镜透明化标本适配器制造技术

本实用新型专利技术公开一种双光子显微镜透明化标本适配器，该双光子显微镜透明化标本适配器包括底座、设置在所述底座上的存储腔和位于所述存储腔上方、且与所述物镜相匹配的观察皿，所述存储腔用于放置所述生物标本，所述观察皿包括本体、设置在所述本体上的贯穿孔和位于所述贯穿孔下方的过渡套筒，所述过渡套筒的一端与所述贯穿孔连通，另一端与所述存储腔连通。本实用新型专利技术有利于提高生物标本在双/多光子显微镜成像深度和成像部位的精度。

【技术实现步骤摘要】
双光子显微镜透明化标本适配器
本技术涉及3D超景深多光子成像
，具体涉及一种双光子显微镜透明化标本适配器。
技术介绍
众所周知，随着组织光透明技术的出现，利用多光子显微成像技术(multi-photonmicroscopy,MPM)获取毫米至厘米量级介观系统(如完整的胚胎、体外器官及活体模式动物等)的高精度三维结构是当今医学分子诊断发展的潮流和趋势。现代的多光子显微镜在进行超景深成像时，一般需要对生物标本进行透明化并以特定折射率的透明化液置于培养皿或烧杯浸泡，观察时显微镜物镜必须与充分浸泡于透明液中，才能实现mm级以上的标本深层成像。常规的培养皿或烧杯常因高度过浅、过窄、过高或过宽，使得生物标本易在容器中出现与镜头间工作距离不足、漂浮等不利于成像的因素。此外，以生物胶水、琼脂糖或明胶将生物标本粘接在容器(培养皿或烧杯)的方式，往往又因与透明化试剂的接触面过大，使得标本或透明化试剂的折射率改变，进而影响生物标本的透明化效果和成像效果。为此，本技术提供了一种适合双/多光子显微镜成像的专用双光子显微镜透明化标本适配器，有效解决了在常规容器内透明化的生物标本难固定、寻找时间长和成像效果差的问题。
技术实现思路
本技术的主要目的在于提供一种双光子显微镜透明化标本适配器，旨在解决现有的固定方式会导致生物标本透明化程度和成像效果较差的技术问题。为解决上述技术问题，本技术提出一种双光子显微镜透明化标本适配器，该双光子显微镜透明化标本适配器包括底座以及设置在所述底座上并与光子显微镜物镜相匹配的观察皿，所述底座的顶面上设置有用于放置标本的存储腔，所述观察皿包括本体和设置在所述本体底部的过渡套筒，所述本体的底部设置有与所述过渡套筒连通的贯穿孔，所述贯穿孔可通过所述过渡套筒与所述存储腔内导通。优选地，所述双光子显微镜透明化标本适配器还包括透明套筒，所述过渡套筒通过所述透明套筒与所述底座连接。优选地，所述透明套筒的一端与所述过渡套筒螺纹连接，另一端可插装在所述存储腔内。优选地，所述存储腔位于所述底座的中心位置。优选地，所述本体的底部呈漏斗状结构。优选地，所述过渡套筒的外壁上设置有外螺纹，所述存储腔的内壁上设置有内螺纹，所述过渡套筒与所述底座螺纹配合连接。优选地，所述透明套筒的内径为1.8～2.6mm，外径为2.5～4.8mm，长度为4.2～8.4mm。优选地，所述底座为圆形板，所述圆形板的直径为35～80mm，厚度为3～5mm。优选地，所述存储腔为圆形凹槽，所述圆形凹槽的深度为1.5～4mm，直径为2～10mm。本技术实施例提供的双光子显微镜透明化标本适配器，通过在底座上设置用于存储生物标本的存储腔，以此方便在存储腔内注入少量凝胶、胶水后等对生物标本进行固定，并加入透明化试剂进行储存和观察，同时利用观察皿与底座可拆卸连接，从而方便根据物镜的规格更换不同观察皿，从而便于对采样标本的检测。相对现有技术而言，本技术有利于提高生物标本的成像深度和成像质量，并能节省透明化试剂的用量。附图说明图1为本技术中双光子显微镜透明化标本适配器一实施例的结构示意图；图2为本技术中双光子显微镜透明化标本适配器的观察皿的剖视图；图3为中双光子显微镜透明化标本适配器一实施例的爆炸示意图；图4为本技术中双光子显微镜透明化标本适配器的底座和透明套筒的结构示意图。具体实施方式下面详细描述本技术的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本技术，而不能理解为对本技术的限制，基于本技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本技术保护的范围。本技术提出一种双光子显微镜透明化标本适配器，用于与光子显微镜配合使用以获取生物标本的显微图像，光子显微镜包括用于成像的物镜，该双光子显微镜透明化标本适配器包括底座10、设置在所述底座10上的存储腔11和位于所述存储腔11上方、且与所述物镜相匹配的观察皿20，所述存储腔11用于放置所述生物标本，所述观察皿20包括本体21、设置在所述本体21上的贯穿孔23和位于贯穿孔230下方的过渡套筒22，过渡套筒22的一端与贯穿孔23连通，另一端与存储腔11连通。在本实施例中，如图1至图3所示，底座10和观察皿20优选采用圆盘形，当然底座10还可以是矩形或其他形状。其中，底座10的顶面上设置有可容纳标本的存储腔11，存储腔11的大小可根据实际情况(即标本的种类或大小)进行确定，而观察皿20则需要按照相应的光子显微镜物镜进行设置，以此可使物镜能通过观察皿20观察位于存储腔11内的标本。通过存储腔11容纳标本，以此有利于解决采用scaleA2、SeeDB等部分透明化试剂后，标本在存储腔11内容易产生形变从而影响光子显微镜成像深度和成像部位偏差的问题，同时实现了在8mm长工作距离下，光子显微镜商用物镜视野对吸针采样活检标本整体的多维度光学深层成像。此时，优选观察皿20包括本体21和过渡套筒22，本体21为现有实验室内培养皿的样式，而过渡套筒22则位于本体21的底部，且本体21上还开设有与过渡套筒22连通的贯穿孔23，而贯穿孔23可通过过渡套筒22与存储腔11导通，从而方便物镜通过贯穿孔23观察位于存储腔11内的标本。至于过渡套筒22与底座10连接的方式可以是直接连接，也可以是通过中间部件与底座10连接。本实施例中的双光子显微镜透明化标本适配器具体使用时，将观察皿20从底座10上取下，向存储腔11内注入2～3mm高度的凝胶，将经4％多聚甲醛固定好的穿刺采样标本插入凝胶内，从而可使生物标本悬空置于存储腔11内，后根据实验步骤进行抗体孵育、荧光标记后，根据不同标本的光折射率，加入相应的透明化试剂后，即可利用透明化试剂对生物样本全方位的透明化，从而增加了透明效果，以此提高了生物标本的成像效果。待光子显微镜成像时，在底座10上安装相应规格的观察皿20，注入相应的透明化试剂，将光子显微镜物镜移至标本正上方，设定好扫描波长，进行Z轴层扫，实现超景深的三维/四维光学成像。本实施例中，通过在底座10上设置用于存储生物标本的存储腔11，以此方便在存储腔11内注入凝胶后对生物标本进行存储，同时利用观察皿20与底座10可拆卸连接，从而方便根据物镜的规格更换不同观察皿20，从而便于对采样标本的检测，以及有利于提高光子显微镜成像深度和成像部位的精度。在一较佳实施例中，为了方便在存储腔11内放入采样标本，还包括透明套筒30。此时，透明套筒30的一端可安装存储腔11内，另一端可与过渡套筒22连接。本实施例中的双光子显微镜透明化标本适配器在使用时，将透明套筒30安装在存储腔11内，并通过透明套筒30向存储腔11内注入2～3mm高度的凝胶，此时有利于通过透明套筒30观察注入凝胶的情况(即凝胶量的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种双光子显微镜透明化标本适配器，用于与双光子显微镜配合使用以获取生物标本的显微图像，所述光子显微镜包括用于成像的物镜，其特征在于，所述双光子显微镜透明化标本适配器包括底座、设置在所述底座上的存储腔和位于所述存储腔上方、且与所述物镜相匹配的观察皿，所述存储腔用于放置所述生物标本，所述观察皿包括本体、设置在所述本体上的贯穿孔和位于所述贯穿孔下方的过渡套筒，所述过渡套筒的一端与所述贯穿孔连通，另一端与所述存储腔连通。/n

【技术特征摘要】
1.一种双光子显微镜透明化标本适配器，用于与双光子显微镜配合使用以获取生物标本的显微图像，所述光子显微镜包括用于成像的物镜，其特征在于，所述双光子显微镜透明化标本适配器包括底座、设置在所述底座上的存储腔和位于所述存储腔上方、且与所述物镜相匹配的观察皿，所述存储腔用于放置所述生物标本，所述观察皿包括本体、设置在所述本体上的贯穿孔和位于所述贯穿孔下方的过渡套筒，所述过渡套筒的一端与所述贯穿孔连通，另一端与所述存储腔连通。


2.根据权利要求1所述的双光子显微镜透明化标本适配器，其特征在于，还包括透明套筒，所述过渡套筒通过所述透明套筒与所述底座连接。


3.根据权利要求2所述的双光子显微镜透明化标本适配器，其特征在于，所述透明套筒的一端与所述过渡套筒螺纹连接，另一端可插装在所述存储腔内。


4.根据权利要求1所述的双光子显微镜透明化标本适配器，其特征在于，所述存储腔位于所...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴科锋，赖子嘉，吴翰，韦俊任，林灵辉，莫小敏，
申请(专利权)人：南方海洋科学与工程广东省实验室湛江，
类型：新型
国别省市：广东;44