一株适于酿造黄桃果酒的酿酒酵母及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株适于酿造黄桃果酒的酿酒酵母及其应用，属于生物工程发酵技术领域。本发明专利技术中的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)YP‑01已于2020年05月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.19781；该菌株能够适应黄桃果汁的发酵环境、起酵速度快，发酵彻底，且在保障产酒精能力较强的基础上所产的黄桃果酒口感协调且黄桃典型性明显。在工业化制备果酒中具备广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一株适于酿造黄桃果酒的酿酒酵母及其应用
本专利技术涉及一株适于酿造黄桃果酒的酿酒酵母及其应用，属于生物工程发酵

技术介绍
桃属于蔷薇科，李属，其发源于我国的西北高原，后广泛分布于亚、非、欧、美、澳五个大洲。桃品种按照果肉的颜色可以分为白肉桃、红肉桃、黄肉桃和绿肉桃。其中黄肉桃因颜色鲜艳、香气浓郁，在国内外市场上有很强的竞争力。黄桃果肉含有大量的维生素、膳食纤维、番茄红素、胡萝卜素以及锌、硒等多种微量元素，营养价值十分丰富。随着黄桃良种和良育的不断普及扩增，黄桃的产量也在不断上升。然而，目前黄桃的可用性受到季节和有限的货架期的限制，严重影响了我国黄桃果业的发展。黄桃的深加工可以满足无桃季节市场的需求，现阶段我国黄桃的加工产品主要是黄桃罐头、桃汁，速冻桃片，黄桃酸奶等低值产品。因此，为了避免黄桃上市时大量的资源浪费，同时提升黄桃果农开展农业生产的积极性，有必要开展黄桃深加工技术的研发，提升黄桃产品的附加值和市场竞争力。酿酒酵母菌在分类学上属于真核生物原界、真菌界、子囊菌门、酵母亚门、半子囊菌纲、酵母目、酵母科、酵母属。酿酒酵母菌落呈圆形，有光泽，平坦，边缘整齐，在麦芽汁中培养细胞呈小圆形或卵圆形。适宜生长温度为28-30℃，最适pH值为4-5。酿酒酵母在果酒发酵中起到至关重要的最用，不同酵母发酵后产生的风味物质存在很大差异。目前我国各种果酒的生产缺乏专用的酿酒酵母大多使用葡萄酒酿造的商业活性干酵母，大量使用商业活性干酵母进行发酵会导致发酵迟缓、果酒特征风味丧失，因此筛选出一株适用于黄桃果酒发酵的专用酵母就显得非常重要。
技术实现思路
为解决目前果酒酿造中的问题，本专利技术提供了一株适于酿造黄桃果酒的酿酒酵母及其应用，所述技术方案如下：本专利技术的第一个目的是提供一株适于酿造黄桃果酒的酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)YP-01，所述酿酒酵母已于2020年5月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNO.19781，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。本专利技术的第二个目的是提供一种酿酒酵母的培养方法，所述方法是将酿酒酵母YP-01接种至YPD液体培养基中培养。在本专利技术的一种实施方式中，在20～30℃、100～200rpm下培养。本专利技术的第三个目的是提供一种制备黄桃果酒的方法，所述方法是利用酿酒酵母YP-01制备黄桃果酒。在本专利技术的一种实施方式中，将所述酿酒酵母YP-01接种至灭菌后的含黄桃或黄桃汁的发酵原料中，在20～30℃发酵，至恒重。在本专利技术的一种实施方式中，所述酿酒酵母YP-01在发酵体系中的终浓度为终浓度不低于107cfu/mL。在本专利技术的一种实施方式中，所述发酵时间为6～9天。本专利技术的第四个目的是提供含有所述酿酒酵母YP-01的微生物菌剂。在本专利技术的一种实施方式中，所述微生物菌剂为固体菌剂或液体菌剂。在本专利技术的一种实施方式中，所述固体菌剂的制备方法为：取200～600μL的酿酒酵母YP-01接种于10～30mLYPD液体培养基中，28℃下活化2至3代，待酿酒酵母YP-01达到108cfu/mL以上活菌数时，5000～10000rpm下离心10～20min，去除上清液后，在无菌环境下依次加入缓冲液和冷冻保护剂，待细胞浓度不低于106cfu/mL时，真空冷冻干燥处理得到固体菌剂。在本专利技术的一种实施方式中，待细胞浓度不低于107cfu/mL时，真空冷冻干燥处理得到固体菌剂。在本专利技术的一种实施方式中，所述缓冲液为生理盐水或pH值为5～8的0.1～1M磷酸盐缓冲液，所述保护剂为浓度为10～25％(w/v)的蔗糖溶液。在本专利技术的一种实施方式中，所述缓冲液为双蒸水和/或生理盐水或pH值为7的0.2M磷酸盐缓冲液，所述冷冻保护剂为15％～20％(w/v)的蔗糖溶液。在本专利技术的一种实施方式中，所述液体菌剂的制备方法为：取200～600μL的酿酒酵母YP-01接种于10～30mLYPD液体培养基中，20～30℃下活化2至3代，待酿酒酵母YP-01达到108cfu/mL以上活菌数时，5000～10000rpm下离心10～20min，去除上清液后，接种于黄桃汁培养基中，20～30℃、150～200rpm活化20～30h得到液体菌剂。本专利技术第五个目的是提供一种提高黄桃果酒发酵效率的方法，在含黄桃或黄桃汁的发酵原料中加入所述酿酒酵母，或所述微生物菌剂。在本专利技术的一种实施方法中，所述液体菌剂中酵母细胞浓度不低于108cfu/mL。在本专利技术的一种实施方式中，所述黄桃汁中含糖量为150～200g/L，可滴定酸5.00～6.00g/L，100～110℃灭菌5～15min。本专利技术第六个目的是提供一种提高黄桃果酒风味的方法，所述方法是在含黄桃或黄桃汁的发酵原料中加入所述酿酒酵母，或所述微生物菌剂，发酵5～8天，制备得到果酒。本专利技术还保护所述酿酒酵母YP-01或微生物菌剂，或所述制备黄桃果酒的方法，或所述加速黄桃果酒起酵的方法，或所述提高黄桃果酒风味的方法在制备果汁或酒精饮品中的应用。在本专利技术的一种实施方式中，所述果汁包括黄桃果汁、白桃果汁、蜜桃果汁。在本专利技术的一种实施方式中，所述酒精饮品包括黄桃果酒、蜜桃果酒、白桃果酒、橙酒、菠萝酒。本专利技术有益效果是：本专利技术提供的酿酒酵母CGMCCNO.19781用于黄桃果酒的酿造，能够适应黄桃果汁高亚硫酸盐和高乙醇的发酵环境、起酵速度快、发酵彻底，发酵后果酒口感柔和，香气浓郁，并有典型黄桃香气。制备得到的果酒中与香味有关的物质总量较商用菌株D254发酵果酒含量提高了20.7％，其中，苯乙醇的含量提高了1.45倍，乙酸苯乙酯提高了66.44％，(R)-(+)-β-香茅醇提高了42.01％，乙酸乙酯提高了36.95％。在工业化生产中具备良好的应用前景。生物材料保藏本专利技术所提供的酿酒酵母YP-01，分类学命名为酿酒酵母Saccharomycescerevisiae，已于2020年05月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNO.19781，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。附图说明图1是菌株产气情况分类图。图2是BIGGY琼脂平板筛选。图3是碳酸钙琼脂平板筛选。图4是感官品评雷达图。图5是酵母18SrDNAPCR产物凝胶糖电泳图。图6是基于18SrDNA测序构建酵母菌株系统发育树。具体实施方式为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本专利技术实施方式作进一步地详细描述。本专利技术实施例中菌株筛选和性能测定中所用的培养基：YPD培养基(g/L)：葡萄糖20.0，蛋白胨20.0，酵母粉10.0YPD培养基平板、斜面(g/L)：葡萄糖20.0，蛋白胨20.0，酵母粉10.0，琼脂粉20.0本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)，已于2020年05月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.19781。/n

【技术特征摘要】
1.一株酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)，已于2020年05月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNO.19781。


2.一种制备黄桃果酒的方法，其特征在于，所述方法是用含黄桃或黄桃汁的发酵原料，利用权利要求1所述的酿酒酵母发酵，制备黄桃果酒。


3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，将所述酿酒酵母加入含黄桃或黄桃汁的发酵原料中，在20～30℃发酵。


4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述酿酒酵母在发酵体系中的终浓度为终浓度不低于106cfu/mL。


5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，发酵5～8天。

【专利技术属性】
技术研发人员：李崎，李明瑕，刘宜嵩，刘春凤，王金晶，钮成拓，郑飞云，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32