吲达帕胺原料药中DCC和DCU含量的检测方法技术

本发明专利技术涉及吲达帕胺原料药中DCC和DCU含量的检测方法，其是利用高效液相色谱法对吲达帕胺原料药中的DCC和DCU进行检测，包括以下步骤：(1)配制吲达帕胺原料药供试品溶液；(2)分别配制DCC对照品溶液、DCU的对照品溶液和DCC&DCU对照品溶液；(3)进样，按以下条件对步骤(1)供试品溶液和步骤(2)中的对照品溶液分别进行检测：色谱条件：流动相：乙腈‑水；梯度洗脱：0‑30min乙腈比例由10‑40％逐渐升至90‑98％；柱温为33‑37℃；流速为1.4‑1.6ml/min；检测波长为190‑210nm；(4)将供试品DCC、DCU对应的峰面积与对照品溶液计算得到DCC、DCU的含量。本发明专利技术所提供的吲达帕胺原料药中DCC和DCU含量的检测方法，使用的试剂毒性小，杂质干扰少，检测方法可靠稳定。

【技术实现步骤摘要】
吲达帕胺原料药中DCC和DCU含量的检测方法
本专利技术涉及吲达帕胺原料药中杂质含量的检测方法，具体涉及一种吲达帕胺原料药中DCC和DCU含量的检测方法。
技术介绍
吲达帕胺为磺胺类利尿药，具有利尿和钙拮抗作用，是一种强效、长效的降压药，临床上还用于充血性心力衰竭时水钠潴留的治疗。DCC(二环己基碳二亚胺)和DCU(二环己基脲)为吲达帕胺合成工艺中的残留物，目前国标HG/T5320-2018仅公开了DCC质量分数的测定方法，现有技术中并没有任何关于DCC和DCU含量的检测方法，更没有同时能够进行DCC和DCU含量的检测方法。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术中存在的技术问题，提供一种吲达帕胺原料药中DCC和DCU含量的检测方法，该检测方法可以同时进行DCC和DCU含量的检测，检出限低、节省时间且检测结果准确。本专利技术解决上述技术问题的技术方案如下：吲达帕胺原料药中DCC和DCU含量的检测方法，利用高效液相色谱法对吲达帕胺原料药中的DCC和DCU进行检测，包括以下步骤：(1)配制吲达帕胺原料药供试品溶液；(2)分别配制DCC对照品溶液、DCU的对照品溶液和DCC&DCU对照品溶液；(3)进样，按以下条件对步骤(1)供试品溶液和步骤(2)中的对照品溶液分别进行检测：色谱条件：流动相：乙腈-水；梯度洗脱：0-30min乙腈比例由10-40％逐渐升至90-98％；柱温为33-37℃；流速为1.4-1.6ml/min；检测波长为190-210nm；>(4)将供试品DCC、DCU对应的峰面积与对照品溶液计算得到DCC、DCU的含量。其中，色谱柱为C18液相色谱柱。优选地，色谱柱为AgelaVenusilC18Plus，4.6*200mm,5μm。优选地，色谱柱为AgelaVenusilXBPC18，4.6*200mm，5μm。其中，步骤(3)中色谱条件为：进样量为10μl。优选地，步骤(3)中色谱条件为：检测波长为205nm。优选地，步骤(3)中色谱条件为：梯度洗脱：0-30min乙腈比例由35％逐级升高至95％；柱温为35℃；流速为1.5ml/min；检测波长为205nm。其中，步骤(1)中吲达帕胺原料药供试品溶液的浓度为3-7mg/ml。其中，步骤(1)中DCC的浓度为5-10μg/ml，DCU的浓度为5-10μg/ml。1、本专利技术对色谱条件中的波长进行优化：优化时：色谱柱：AgelaVenusilC18Plus，4.6*200mm,5μm；流速：1.5ml/min；柱温：35℃；进样量：10μl；流动相：乙腈-水；梯度洗脱：0-30min乙腈比例由35％逐渐升至95％。取DCC、DCU对照品溶液在160-400nm波长范围内进行扫描，根据扫描所得色谱图可知，DCC、DCU的响应值在190-210nm范围内响应值较高，考虑到溶剂的末端吸收干扰，因此以波长在205nm时为最佳。2、本专利技术对色谱条件中的梯度洗脱条件进行优化：优化时：色谱柱：AgelaVenusilC18Plus，4.6*200mm,5μm；流速：1.5ml/min；柱温：35℃；检测波长：205nm；进样量：10μl；流动相:乙腈-水。分别改变乙腈的起始比例为5％、10％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％，其中以乙腈起始比例为35％时，分离和保留时间为最佳。本专利技术检测吲达帕胺原料药中DCC和DCU的含量，DCC的线性范围在0.9279～14.8464μg/ml之间，检出限为0.4639μg/ml，平均回收率大于99.2％，DCU的线性范围在0.9336μg/ml～14.9372μg/ml之间，检出限为0.4668μg/ml，平均回收率大于102.4％。本专利技术所提供的吲达帕胺原料药中DCC和DCU含量的检测方法，使用的试剂毒性小，杂质干扰少，检测方法可靠稳定，对吲达帕胺原料药的质量控制具有重要意义。附图说明图1为实施例1中加标样品溶液的色谱图；图2为实施例2中加标样品溶液的色谱图；图3为实施例3中加标样品溶液的色谱图；图4为实施例4中加标样品溶液的色谱图；图5为实施例5中加标样品溶液的色谱图；图6为实施例6中编号为1的供试品溶液的色谱图；图7为实施例6中编号为2的供试品溶液的色谱图；图8为实施例6中编号为3的供试品溶液的色谱图；图9为实施例6中编号为4的供试品溶液的色谱图；图10为实施例6中对照品溶液的色谱图；图11为实施例6中DCC对照品溶液的色谱图；图12为实施例6中DCU对照品溶液的色谱图。具体实施方式以下结合附图对本专利技术的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本专利技术，并非用于限定本专利技术的范围。1.仪器药品与试剂仪器：高效液相色谱(型号DIONEXUltimate3000)试剂：乙腈(默克，JA076530)、DCC(TCI，AG7CH-QN)、DCU(阿拉丁，H1809065)2.实验方法2.1供试品溶液的配制：精密称取吲达帕胺原料药125mg至25ml量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度。2.2DCC对照品溶液的配制：精密称取DCC对照品75mg至100ml量瓶中，用乙醇溶解并稀释至刻度，作为DCU对照品贮备液，再移取对照品贮备液1ml至100ml量瓶中，用乙腈稀释至刻度。2.3DCU对照品溶液的配制：精密称取DCU对照品75mg至100ml量瓶中，用乙醇溶解并稀释至刻度，作为DCC对照品贮备液，再移取对照品贮备液1ml至100ml量瓶中，用乙腈稀释至刻度。2.4DCC&DCU对照品溶液的配制：分别各移取1mlDCC对照品贮备溶液和DCU对照品贮备溶液至同一100ml量瓶中，用乙腈稀释至刻度制得对照品溶液。实施例1流动相乙腈起始比例的确定加标样品溶液的配制：精密称取DCC和DCU各75mg置于同一200ml量瓶中，用乙腈稀释至刻度，作为对照储备液。精密称取吲达帕胺原料药125mg置于25ml量瓶中，用上述对照储备液溶解并稀释至刻度，作为加标样品溶液。色谱条件：色谱柱：AgelaVenusilC18Plus4.6*200mm,5μm；流动相：乙腈-水梯度洗脱，0-30min乙腈比例由5％逐级升高至95％；柱温为35℃；流速为1.5ml/min；检测波长为205nm；进样量为10μl，结果见图1。结论：DCC未出峰实施例2流动相乙腈起始比例的确定加标样品溶液的配制：精密称取DCC和DCU各75mg置于同一200ml量瓶中，用乙腈稀释至刻度，作为对照储备液。精密称取吲达帕胺原料药125mg置于25ml量瓶中，用上述对照储备液溶解并稀释至刻度，作为加标样品溶液。色谱条件：色谱柱：AgelaVenusilC18Plus4本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.吲达帕胺原料药中DCC和DCU含量的检测方法，其特征在于，利用高效液相色谱法对吲达帕胺原料药中的DCC和DCU进行检测，包括以下步骤：/n(1)配制吲达帕胺原料药供试品溶液；/n(2)分别配制DCC对照品溶液、DCU的对照品溶液和DCC&DCU对照品溶液；/n(3)进样，按以下条件对步骤(1)中供试品溶液和步骤(2)中的对照品溶液分别进行检测：/n色谱条件：流动相：乙腈-水；梯度洗脱：0-30min乙腈比例由10-40％逐渐升至90-98％；柱温为33-37℃；流速为1.4-1.6ml/min；检测波长为190-210nm；/n(4)将供试品中DCC、DCU对应的峰面积与对照品溶液计算得到DCC、DCU的含量。/n

【技术特征摘要】
1.吲达帕胺原料药中DCC和DCU含量的检测方法，其特征在于，利用高效液相色谱法对吲达帕胺原料药中的DCC和DCU进行检测，包括以下步骤：
(1)配制吲达帕胺原料药供试品溶液；
(2)分别配制DCC对照品溶液、DCU的对照品溶液和DCC&DCU对照品溶液；
(3)进样，按以下条件对步骤(1)中供试品溶液和步骤(2)中的对照品溶液分别进行检测：
色谱条件：流动相：乙腈-水；梯度洗脱：0-30min乙腈比例由10-40％逐渐升至90-98％；柱温为33-37℃；流速为1.4-1.6ml/min；检测波长为190-210nm；
(4)将供试品中DCC、DCU对应的峰面积与对照品溶液计算得到DCC、DCU的含量。


2.根据权利要求1所述的吲达帕胺原料药中DCC和DCU含量的检测方法，其特征在于，步骤(3)中色谱条件为：色谱柱为C18液相色谱柱。


3.根据权利要求2所述的吲达帕胺原料药中DCC和DCU含量的检测方法，其特征在于，步骤(3)中色谱柱为AgelaVenusilC18Plus，4.6*200mm,5μm。


4.根据权利要求2所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：詹志斌，秦巨波，谢秀萍，陈小波，龚明峰，张志刚，
申请(专利权)人：远大医药中国有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42