维生素D2在制备SARS-CoV-2新型冠状病毒抑制剂中的应用制造技术

本发明专利技术属于医药技术领域，具体涉及维生素D2在制备SARS‑CoV‑2新型冠状病毒抑制剂中的应用。本发明专利技术通过研究发现，维生素D2可以结合SARS‑CoV‑2新型冠状病毒的刺突蛋白S1上与ACE‑2受体结合的RBD区，阻断病毒进入细胞，从而抑制病毒复制。因此，维生素D2可以作为SARS‑CoV‑2新型冠状病毒的抑制剂，为预防和/或治疗SARS‑CoV‑2新型冠状病毒提供了新思路，为临床试验的开展提供了理论基础，具有重要的医学研究价值。

【技术实现步骤摘要】
维生素D2在制备SARS-CoV-2新型冠状病毒抑制剂中的应用
本专利技术涉及医药
，具体涉及维生素D2在制备SARS-CoV-2新型冠状病毒抑制剂中的应用。
技术介绍
高致病性冠状病毒感染成了这十年来广受关注公共卫生问题。如严重急性呼吸综合征(SARS，2002-2004)、中东呼吸综合征(MERS，2012-至今)、SARS-CoV-2(COVID-19)，每种疾病都对人类健康和经济发展都带了巨大的冲击。据报道，SARS-CoV-2是β属冠状病毒(Betacoronavirus，Beta-CoV)的一个新成员，与严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒(SARS-CoV)和几种蝙蝠冠状病毒密切相关。由于没有针对性的有效药物和疫苗，SARS-CoV-2新型冠状病毒的新药研发意义重大，在这场没有硝烟的战争中，全球多家科研机构和制药公司致力于研发新型冠状病毒疫苗和治疗药物。因此，研发SARS-CoV-2新型冠状病毒的治疗药物具有重大的社会学和经济学意义。维生素D2(VitaminD2；Ergocalciferol)是维生素D类似物，由某些植物在UVB光存在下合成。该药物用于治疗软骨症，美国FDA于1941年批准上市。根据美国2011年的诊断指南，Ergocalciferol也许可以作为饮食补充剂来补充维生素D，Ergocalciferol和皮肤在紫外线照射下产生的胆钙化醇(维生素D3)同样有效。Frank等(2020)发现在免疫反应中，维生素D依赖性抗菌途径对新冠病毒COVID-19等复制过程中产生的双链RNA有反应。这些途径随后上调受损细胞的清除(自噬)，以及各种抗菌和抗病毒肽水平。因此，维生素D缺乏可能通过阻碍宿主激活上述防御途径，并影响淋巴细胞和巨噬细胞的迁移，使宿主容易受到新冠病毒感染。但目前尚未见维生素D2是否能抑制SARS-CoV-2的相关报道，其作用机理也尚不清楚。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了维生素D2在制备SARS-CoV-2新型冠状病毒抑制剂中的应用。维生素D2可以结合SARS-CoV-2新型冠状病毒的刺突蛋白S1上与ACE-2受体结合的RBD区，阻断病毒进入细胞，从而抑制病毒复制。具体地，本专利技术提供了维生素D2在制备抑制SARS-CoV-2新型冠状病毒核酸增殖的制剂中的应用。具体地，本专利技术提供了维生素D2在制备阻断SARS-CoV-2新型冠状病毒进入细胞的制剂中的应用。具体地，本专利技术提供了维生素D2在制备预防和/或治疗SARS-CoV-2新型冠状病毒肺炎感染的药物中的应用。优选地，所述的维生素D2抑制SARS-CoV-2新型冠状病毒的刺突蛋白S1识别受体ACE-2。本专利技术的另一目的在于提供一种预防和/或治疗SARS-CoV-2新型冠状病毒肺炎感染的药物，所述药物含有维生素D2。优选地，所述的维生素D2的血药浓度为5-20μmol/L。更优选地，所述的维生素D2的血药浓度为10μmol/L。由于SARS-CoV-2新型冠状病毒进入细胞靠刺突蛋白spike(S1)识别受体ACE-2。因此，抑制spike与ACE-2靶点相互作用的小分子抑制剂可应用于针对SARS-CoV-2新型冠状病毒的预防和/或治疗。专利技术人将全部FDA获批的老药(2514个，Drugbank数据库)对S蛋白上与ACE-2受体结合区进行虚拟分子对接及AI评分系统进行评分获得19种候选老药，试验和筛选了多种老药，发现维生素D2可作为有效的2019新型冠状病毒抑制剂。维生素D2的结构式如图1所示。中文名称：麦角钙化醇(维生素D2)。英文名称：Ergocalciferol(VitaminD2)。分子式：C28H44O。分子量：396.6484。CAS号：50-14-6。专利技术人发现Ergocalciferol可以结合SARS-CoV-2新型冠状病毒的刺突蛋白S1上与ACE-2受体结合的RBD区，阻断病毒进入细胞，是全新机制SARS-CoV-2新冠病毒的抑制剂。Ergocalciferol在细胞水平上10μM能抑制病毒核酸增殖57.53％。相对于现有技术，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术通过研究发现，维生素D2可以作为SARS-CoV-2新型冠状病毒的抑制剂，为预防和/或治疗SARS-CoV-2新型冠状病毒提供了新思路；维生素D2作为老药新用，不存在安全性问题，为临床试验的开展提供了理论基础，具有重要的医学研究价值。附图说明图1为Ergocalciferol的结构式。图2为Ergocalciferol与SARS-CoV-2新型冠状病毒S蛋白的RBD区的亲和力测定结果。具体实施方式值得说明的是，本专利技术中使用的原料均为普通市售产品，对其来源不做具体限定。以下原料来源，为示例性说明。一、实验试剂与耗材重组2019nCOVSpikeRBD蛋白(KACTUS,Cat.COV-VM5BD)；蛋白标记试剂盒(Cat#MO-L011)；上样毛细管(Cat#MO-K022)；DMSO(碧云天生物技术，货号ST-1276-500ml)；DMEM培养基(Gibco，货号12430-054)；CCK-8试剂盒(碧云天生物技术，货号C0039)；核酸提取试剂盒(Roche,Cat.03038505001)；2019新型冠状病毒核酸检测试剂盒(上海伯杰，货号SJ-HX-226-2)。二、主要仪器荧光定量PCR仪QuantStudioDx，厂家ABI，编号04-620；MagNAPureLC2.0全自动核酸提取仪，厂家Roche；二氧化碳培养箱(GALAXYS)，厂家RsBiotech，编号04-0303；三、SARS-CoV-2病毒株江苏省疾病预防控制中心BSL-3实验室通过分离培养实验室分离鉴定出新型冠状病毒毒株。本实验所采用的毒株编号为：BetaCoV/JS03/human/2020(EPI_ISL_411953)。四、化合物ErgocalciferolIUPAC名称：(1S,3Z)-4-亚甲基-3-[(2E)-2-[(1R,3aS,7aR)-八氢-7a-甲基-1-[Chemicalbook[1R,2E,4R)-1,4,5-三甲基-2-己烯-1-基]-4H-茚满-4-亚丙基]亚乙基]环己醇(1S,3Z)-4-Methylene-3-[(2E)-2-[(1R,3aS,7aR)-octahydro-7a-methyl-1-[(1R,2E,4R)-1,4,5-trimethyl-2-hexen-1-yl]-4H-inden-4-ylidene]ethylidene]cyclohexanol，分子量396.65,化学式:C28H44O,纯度：99.89％,保存条件：-20℃(粉末)；-80℃(溶剂)。货号：T1086。化合物样品及相关信息均由上海陶素生化科技有限公司提供。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.维生素D2在制备SARS-CoV-2新型冠状病毒抑制剂中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.维生素D2在制备SARS-CoV-2新型冠状病毒抑制剂中的应用。


2.维生素D2在制备抑制SARS-CoV-2新型冠状病毒核酸增殖的制剂中的应用。


3.维生素D2在制备阻断SARS-CoV-2新型冠状病毒进入细胞的制剂中的应用。


4.维生素D2在制备预防和/或治疗SARS-CoV-2新型冠状病毒肺炎感染的药物中的应用。


5.根据权利要求1至4任一项所述应用，...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋世东，孙媛媛，葛以跃，迟莹，江经纬，
申请(专利权)人：南京双运生物技术有限公司，江苏省疾病预防控制中心江苏省公共卫生研究院，
类型：发明
国别省市：江苏;32