一种用于检测微量血的板式化学发光法检测试剂盒制造技术

本发明专利技术提供一种用于检测微量血的板式化学发光法检测试剂盒，涉及化学发光检测技术领域。该用于检测微量血的板式化学发光法检测试剂盒，所述试剂盒包括待检测标准品溶液、膜糖蛋白单克隆抗体SZ‑21溶液、抗膜糖蛋白单克隆抗体包被的微孔板、辣根过氧化物酶标记的膜糖蛋白单克隆抗体SZ‑21溶液、浓缩清洗液、发光底物液、终止液。本发明专利技术中，使得微量血的血小板检测方式成本较低、减少了设备使用且设备操作简单、省时省力，检测过程中其灵敏度和抗干扰能力得到了明显提升，大大减少了现有技术中的弊端，能够适应对灵敏度的要求，实用性较强。

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测微量血的板式化学发光法检测试剂盒
本专利技术涉及化学发光检测
，具体为一种用于检测微量血的板式化学发光法检测试剂盒。
技术介绍
化学发光又称为冷光，是由化学反应而产生的光辐射，化学发光分析是一种新型的分析方法，具有极高的灵敏度、选择性较好、仪器简单、分析速度快、线性范围可宽达几个数量级等优点。在环境、生命、医学等领域得到愈来愈广泛的应用，化学发光与其它发光分析的本质区别是体系产生发光所吸收的能量来源不同。体系产生化学发光，必须具有一个产生可检信号的光辐射反应和一个可一次提供导致发光现象足够能量的单独反应步骤的化学反应。化学发光杂交检测，是同位素检测的一种高度灵敏的替代方法，酶标记抗体取代了放射性标记抗体，当它作用于底物时，可产生光信号，多数特异抗原检测方法以辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AP)二级抗体耦联物为基础，信号可通过感光胶片或专用的成像设备来采集，化学发光底物用于免疫印迹技术已有十几年的历史，大部分实验室做转印时都会采用化学发光技术进行检测，目前，基于微量血的血小板检测方式成本高、设备操作复杂、费时费力，检测过程中其灵敏度和抗干扰能力严重不足，存在很大的弊端，已无法适应对灵敏度的要求，有待进一步优化。
技术实现思路
(一)解决的技术问题针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种用于检测微量血的板式化学发光法检测试剂盒，解决了现有技术中存在的缺陷与不足。(二)技术方案为实现以上目的，本专利技术通过以下技术方案予以实现：一种用于检测微量血的板式化学发光法检测试剂盒，所述试剂盒包括待检测标准品溶液、膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21溶液、抗膜糖蛋白单克隆抗体包被的微孔板、辣根过氧化物酶标记的膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21溶液、浓缩清洗液、发光底物液、终止液。优选的，所述待检测标准品溶液的制备步骤如下：1)采集微量血；2)将采集的微量血置于抗凝离心管中，静置25-35min后离心处理，700-900rpm离心8-12min，取上清液；3)将上清液吸出并置于干净试管中，3000-4000rpm离心8-12min，弃去上清液，得到沉淀物即为血小板；4)将上述得到的血小板中加入pH值7.4的磷酸缓冲液进行稀释，即得待检测标准品溶液。优选的，所述浓缩清洗液为磷酸盐缓冲溶液与质量浓度为0.05％的吐温20组成，其中吐温20占浓缩清洗液质量的0.08-0.12％。优选的，所述膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21溶液的浓度为0.8-6.5μg/ml，其中膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21溶液为膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21与pH值7.4的磷酸缓冲液稀释而成。优选的，所述微孔板包被的抗膜糖蛋白单克隆抗体包被浓度为1-7μg/ml，其中包被微孔板的制备步骤如下：1)将抗膜糖蛋白单克隆抗体加入稀释液进行稀释，其中稀释液为pH值7.4的磷酸缓冲液；2)然后将稀释之后的抗膜糖蛋白单克隆抗体溶液加入到微孔板表面的微孔中，再将微孔板表面的微孔中加入封闭液；3)将加入抗膜糖蛋白单克隆抗体溶液的酶标板在温度为4℃的低温下过夜；4)取出微孔板，使用浓缩清洗液对其进行洗涤，洗涤次数为3-5次，除去未结合的游离成分，即得抗膜糖蛋白单克隆抗体包被的微孔板。优选的，所述辣根过氧化物酶标记的膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21溶液的浓度为1.5-7.5μg/ml，其中辣根过氧化物酶标记的膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21溶液的制备步骤如下：1)将辣根过氧化物酶与膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21偶联；2)加入酶反应物稀释液对上述产物进行稀释，即得辣根过氧化物酶标记的膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21溶液。优选的，所述发光底物液为过氧化氢溶液与鲁米诺溶液配置而成。优选的，所述终止液为Hcl溶液，其中Hcl溶液为12MHcl溶液加入去离子水稀释而成的2MHcl溶液。工作原理：使用时，将待检测标准品溶液加入到抗膜糖蛋白单克隆抗体包被微孔板的微孔中，同时加入膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21溶液，然后将微孔板送入温育设备中进行温育，形成固相复合物，然后使用浓缩清洗液对微孔板进行洗涤，去除未结合的游离成分，再将辣根过氧化物酶标记的膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21溶液加入到微孔中进行反应，反应之后，使用浓缩清洗液对微孔板进行洗涤，去除未结合的游离成分，再将发光底物液加入到微孔中进行发光反应，最后加入终止液终止反应。(三)有益效果本专利技术提供了一种用于检测微量血的板式化学发光法检测试剂盒。具备以下有益效果：该用于检测微量血的板式化学发光法检测试剂盒，使得微量血的血小板检测方式成本较低、减少了设备使用且设备操作简单、省时省力，检测过程中其灵敏度和抗干扰能力得到了明显提升，大大减少了现有技术中的弊端，能够适应对灵敏度的要求，实用性较强。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例：专利技术实施例提供一种用于检测微量血的板式化学发光法检测试剂盒，试剂盒包括待检测标准品溶液、膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21溶液、抗膜糖蛋白单克隆抗体包被的微孔板、辣根过氧化物酶标记的膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21溶液、浓缩清洗液、发光底物液、终止液。待检测标准品溶液的制备步骤如下：1)采集微量血；2)将采集的微量血置于抗凝离心管中，静置25-35min后离心处理，700-900rpm离心8-12min，取上清液；3)将上清液吸出并置于干净试管中，3000-4000rpm离心8-12min，弃去上清液，得到沉淀物即为血小板；4)将上述得到的血小板中加入pH值7.4的磷酸缓冲液进行稀释，即得待检测标准品溶液。浓缩清洗液为磷酸盐缓冲溶液与质量浓度为0.05％的吐温20组成，其中吐温20占浓缩清洗液质量的0.08-0.12％。膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21溶液的浓度为0.8-6.5μg/ml，其中膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21溶液为膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21与pH值7.4的磷酸缓冲液稀释而成。微孔板包被的抗膜糖蛋白单克隆抗体包被浓度为1-7μg/ml，其中包被微孔板的制备步骤如下：1)将抗膜糖蛋白单克隆抗体加入稀释液进行稀释，其中稀释液为pH值7.4的磷酸缓冲液；2)然后将稀释之后的抗膜糖蛋白单克隆抗体溶液加入到微孔板表面的微孔中，再将微孔板表面的微孔中加入封闭液；3)将加入抗膜糖蛋白单克隆抗体溶液的酶标板在温度为4℃的低温下过夜；4)取出微孔板，使用浓缩清洗液对其进行洗涤，洗涤次数为3-5次，除去未结合的游离成分，即得抗膜糖蛋白单克隆抗体包被的微孔板。辣根过氧化物酶标记的膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21溶液的浓度为1.5-7.5μ本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测微量血的板式化学发光法检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括待检测标准品溶液、膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21溶液、抗膜糖蛋白单克隆抗体包被的微孔板、辣根过氧化物酶标记的膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21溶液、浓缩清洗液、发光底物液、终止液。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于检测微量血的板式化学发光法检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括待检测标准品溶液、膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21溶液、抗膜糖蛋白单克隆抗体包被的微孔板、辣根过氧化物酶标记的膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21溶液、浓缩清洗液、发光底物液、终止液。


2.根据权利要求1所述的一种用于检测微量血的板式化学发光法检测试剂盒，其特征在于：所述待检测标准品溶液的制备步骤如下：
1)采集微量血；
2)将采集的微量血置于抗凝离心管中，静置25-35min后离心处理，700-900rpm离心8-12min，取上清液；
3)将上清液吸出并置于干净试管中，3000-4000rpm离心8-12min，弃去上清液，得到沉淀物即为血小板；
4)将上述得到的血小板中加入pH值7.4的磷酸缓冲液进行稀释，即得待检测标准品溶液。


3.根据权利要求1所述的一种用于检测微量血的板式化学发光法检测试剂盒，其特征在于：所述浓缩清洗液为磷酸盐缓冲溶液与质量浓度为0.05％的吐温20组成，其中吐温20占浓缩清洗液质量的0.08-0.12％。


4.根据权利要求1所述的一种用于检测微量血的板式化学发光法检测试剂盒，其特征在于：所述膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21溶液的浓度为0.8-6.5μg/ml，其中膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21溶液为膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21与pH值7.4的磷酸缓冲液稀释而成。


5.根据权利要求1所述的一种用于检测微量血的板式化学...

【专利技术属性】
技术研发人员：张无量，
申请(专利权)人：武汉康珠生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42