人NUFIP1的用途及相关产品制造技术

本发明专利技术属于生物医药研究领域，具体涉及人NUFIP1在制备大肠癌治疗产品或者在制备大肠癌诊断产品中的用途。本发明专利技术首次发现NUFIP1可作为诊断大肠癌的诊断标志物，首次发现干扰NUFIP1表达可用于治疗大肠癌，NUFIP1可以作为一个潜在的靶位点应用在制备治疗大肠癌的药物中。NUFIP1基因及其表达产物作为诊断大肠癌或预后判断大肠癌的标志物，使大肠癌诊断更加准确、快速，有效预测出高风险、预后差的大肠癌组织，作为制备治疗大肠癌药物的靶基因为治疗大肠癌提供了新的治疗靶点和治疗途径。

【技术实现步骤摘要】
人NUFIP1的用途及相关产品
本专利技术属于生物医药研究领域，具体涉及人NUFIP1的用途及相关产品。
技术介绍
癌症是世界范围内的主要公共卫生问题，作为人类常见的恶性疾病之一，据2018年全球癌症数据显示，大肠癌发病率和死亡率在所有肿瘤中分别排第三位和第二位。2019年美国癌症协会统计数据显示：美国预计将出现1762450例新癌症病例和606880例癌症死亡，其中预计大肠癌(包括结、直肠癌)新增病例145600，死亡病例51020，是美国男性和女性第三常见的癌症类型，仅次于男性的前列腺癌、肺癌，女性的乳腺癌、肺癌。在我国大肠癌的发病率在世界消化道肿瘤位居第二位，其死亡率位居第五位，每年死亡的患者约占全世界癌症相关死亡人数的25％。可见，大肠癌严重威胁着人类健康，也给社会带来沉重的经济负担。由于大肠癌早期起病隐匿，可无明显症状，早期诊断率低，大部分患者在诊断时已经是中晚期，甚至发生了转移，亟待寻找更加有效早期诊断手段。在治疗方法，尽管以手术为主包括化疗、放疗、生物治疗等综合治疗得到了长足的发展，大肠癌的预后有所改善，但仍有50％以上大肠癌根治术后患者最终发生复发转移。因此，寻找更加有效的早期诊断、靶向治疗及预后预测的基因对提高大肠癌治疗水平具有重要的意义。目前还未有NUFIP1用于大肠癌诊断或治疗的相关报道。
技术实现思路
为了克服现有技术中所存在的问题，本专利技术的目的在于提供人NUFIP1的用途及相关产品。为了实现上述目的以及其他相关目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术的第一方面提供人NUFIP1在制备以下任一种或多种产品中的用途：(1)大肠癌治疗产品；(2)大肠癌诊断产品；(3)大肠癌预后判断产品。本专利技术第二方面提供特异性识别NUFIP1的物质在制备大肠癌诊断产品和/或大肠癌预后判断产品中的用途。本专利技术第三方面提供一种大肠癌诊断试剂盒和/或大肠癌预后判断试剂盒，所述试剂盒中包括特异性识别NUFIP1的物质本专利技术第四方面提供8.NUFIP1抑制剂在制备至少具备以下功效之一的产品中的用途：治疗大肠癌；抑制大肠癌细胞生长；降低大肠癌细胞活力；抑制大肠癌细胞存活能力；阻滞大肠癌的细胞周期；诱导大肠癌细胞凋亡。本专利技术第五方面提供一种降低生物体中NUFIP1表达的核酸分子，所述核酸分子包含：a.双链RNA，所述双链RNA中含有能够与NUFIP1杂交的核苷酸序列；或者b.shRNA，所述shRNA中含有能够与NUFIP1杂交的核苷酸序列；其中，所述双链RNA包含第一链和第二链，所述第一链和所述第二链互补共同形成RNA二聚体，并且所述第一链的序列与NUFIP1中的靶序列相同；所述shRNA包括正义链片段和反义链片段，以及连接所述正义链片段和反义链片段的茎环结构，所述正义链片段和所述反义链片段的序列互补，并且所述正义链片段的序列与NUFIP1中的靶序列相同。本专利技术第六方面提供一种NUFIP1干扰核酸构建体，含有编码前述核酸分子中的shRNA的基因片段，能表达所述shRNA。本专利技术第七方面提供NUFIP1干扰病毒，由前述干扰核酸构建体在病毒包装质粒、细胞系的辅助下，经过病毒包装而成。本专利技术第八方面提供前述核酸分子，或前述NUFIP1干扰核酸构建体，或前述NUFIP1干扰病毒的用途，为：用于制备治疗大肠癌的药物，或用于制备降低生物体中NUFIP1表达的试剂盒。本专利技术第九方面提供一种用于预防或治疗大肠癌的组合物，其有效物质含有：前述的核酸分子；和/或，前述NUFIP1干扰核酸构建体；和/或，前述NUFIP1干扰病毒，以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：本专利技术首次发现NUFIP1可作为诊断大肠癌的诊断标志物，首次发现干扰NUFIP1表达可用于治疗大肠癌，NUFIP1可以作为一个潜在的靶位点应用在制备治疗大肠癌的药物中。NUFIP1基因及其表达产物作为诊断大肠癌或预后判断大肠癌的标志物，使大肠癌诊断更加准确、快速，有效预测出高风险、预后差的大肠癌组织，作为制备治疗大肠癌药物的靶基因为治疗大肠癌提供了新的治疗靶点和治疗途径。附图说明图1-1NUFIP1mRNA在大肠癌组织和癌旁组织中的表达。基因芯片检测结果中NUFIP1在14对大肠癌癌组织和癌旁组织中的差异表达(A)，Q-PCR检测结果中NUFIP1mRNA在大肠癌癌组织(80例)和癌旁组织(15例)中的差异表达(B)，GAPDH作为内参。T：癌组织，N：癌旁组织图1-2NUFIP1蛋白在大肠癌组织芯片中癌组织和癌旁组织中的表达。代表图选用×40和×200。T：癌组织，N：癌旁组织图1-3NUFIP1蛋白表达与大肠癌患者预后(生存期)之间的关系。图1-4ANUFIP1沉默对大肠癌细胞NUFIP1表达的影响。HT-29和HCT116细胞经包被sh-Ctrl和sh-NUFIP1的慢病毒感染72h后，将细胞按1.0×105/mL密度接种到6孔板(2mL)中继续培养72h。采用Q-PCR(A)检测NUFIP1的表达，Q-PCR以GAPDH为内参和以目的基因在sh-Ctrl的表达为1，计算NUFIP1mRNA的相对表达水平；注：与sh-Ctrl相比较，*P<0.05。图1-4BNUFIP1沉默对大肠癌细胞NUFIP1表达的影响。HT-29和HCT116细胞经包被sh-Ctrl和sh-NUFIP1的慢病毒感染72h后，将细胞按1.0×105/mL密度接种到6孔板(2mL)中继续培养72h。采用Western-blot(B)检测NUFIP1的表达；Western-blot以GAPDH为内参以目的基因在sh-Ctrl的表达为1，计算NUFIP1蛋白的相对表达水平。注：与sh-Ctrl相比较，*P<0.05。图1-5NUFIP1沉默对大肠癌细胞形态和数目的影响。通过倒置显微镜拍照观察细胞形态的变化；通过细胞计数仪计算细胞数目。HT-29细胞(A)；HCT116细胞(B)注：与sh-Ctrl相比较，*P<0.05图1-6NUFIP1沉默对大肠癌细胞活力的影响。采用CCK8法检测HT-29和HCT116细胞活力，并以第一天的吸光值为1，计算出2-5天细胞活力的改变倍数。HT-29细胞(A)；HCT116细胞(B)注：与sh-Ctrl相比较，*P<0.05图1-7集落形成实验检测NUFIP1沉默对大肠癌细胞存活能力的影响。细胞集落形成后经结晶紫染色并用数码相机拍照，计算各组细胞形成集落的数量，以sh-Ctrl组存活能力为100％，计算sh-NUFIP1组细胞的存活能力。HT-29细胞(A)；HCT116细胞(B)注：与sh-Ctrl相比较，*P<0.05图1-8NUFIP1沉默后诱导G0/G1期阻滞。HT-29和HCT116细胞分别经sh-Ctrl和sh-NUFIP1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.人NUFIP1在制备以下任一种或多种产品中的用途：(1)大肠癌治疗产品；(2)大肠癌诊断产品；(3)大肠癌预后判断产品。/n

【技术特征摘要】
1.人NUFIP1在制备以下任一种或多种产品中的用途：(1)大肠癌治疗产品；(2)大肠癌诊断产品；(3)大肠癌预后判断产品。


2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，还包括以下特征中的一项或多项：
a.在制备大肠癌诊断产品和/或大肠癌预后判断产品的用途中，NUFIP1为生物标志物；
b.所述大肠癌诊断产品用于大肠癌的判断、诊断；
c.所述大肠癌预后判断产品用于对大肠癌病人的病程和/或结局进行预后判断；
d.所述大肠癌诊断产品和/或大肠癌预后判断产品包括特异性识别NUFIP1的物质。


3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述特异性识别NUFIP1的物质选自NUFIP1抗体或特异性识别NUFIP1的引物对或NUFIP1抗体。


4.如权利要求3所述的用途，所述特异性识别NUFIP1的引物对包括SEQIDNO：1所示的上游引物和SEQIDNO：2所示的下游引物。


5.特异性识别NUFIP1的物质在制备大肠癌诊断产品和/或大肠癌预后判断产品中的用途。


6.如权利要求5所述的用途，其特征在于，所述特异性识别NUFIP1的物质选自NUFIP1抗体或特异性识别NUFIP1的引物对。


7.如权利要求5所述的用途，其特征在于，所述特异性识别NUFIP1的引物对包括SEQIDNO：1所示的上游引物和SEQIDNO：2所示的下游引物。


8.一种大肠癌诊断试剂盒和/或大肠癌预后判断试剂盒，所述试剂盒中包括特异性识别NUFIP1的物质。


9.NUFIP1抑制剂在制备至少具备以下功效之一的产品中的用途：
治疗大肠癌；
抑制大肠癌细胞生长；
降低大肠癌细胞活力；
抑制大肠癌细胞存活能力；
阻滞大肠癌的细胞周期；
诱导大肠癌细胞凋亡。


10.如权利要求9述的用途，其特征在于，还包括以下特征中的一项或多项：
1)所述NUFIP1抑制剂是指对NUFIP1具有抑制效果的分子；
2)所述NUFIP1抑制剂为产品的唯一有效成分或有效成分之一；
3)所述NUFIP1抑制剂选自双链RNA、shRNA、抗体或小分子化合物，所述双链RNA中含有能够与NUFIP1杂交的核苷酸序列；所述shR...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈阿灵，彭军，褚剑锋，吴美珠，魏丽慧，林晓英，
申请(专利权)人：福建中医药大学，
类型：发明
国别省市：福建;35