一种抗新型冠状病毒的抗体及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种抗新型冠状病毒的抗体，所述抗体为从鸡卵黄中提取的高滴度的特异性抗体，所述鸡卵黄主要从免疫母鸡所产的鸡蛋中获得，所述免疫母鸡为注射有新型冠状病毒疫苗的健康母鸡。本发明专利技术还公开了以该抗新型冠状病毒的抗体为主要成分的用于新型冠状病毒的防控辅助用药，该药物发挥该抗新型冠状病毒的抗体的特性，能短时间与口咽部和鼻腔的新型冠状病毒特异性结合，停留时间长，无痛无刺激、安全性能好、无毒副作用，可用于新型冠状病毒感染的预防和阻断，以及早期感染的辅助治疗，可用于群体性病毒防控辅助用药。

【技术实现步骤摘要】
一种抗新型冠状病毒的抗体及其制备方法与应用
本专利技术涉及生物抗体免疫
，具体是指一种抗新型冠状病毒的抗体及其制备方法与应用。
技术介绍
冠状病毒属于套式病毒目(Nidovirales)、冠状病毒科(Coronaviridae)、冠状病毒属(Coronavirus)，是许多家畜、宠物包括人类疾病的重要病原，引起多种急慢性疾病。第九次国际病毒学分类委员会报告将冠状病毒科分为三个属即α、β和γ属。新型冠状病毒属于β冠状病毒的Sarbecovirus亚属。新型冠状病毒肺炎是一种新发传染病，人群没有免疫力，普遍易感。新型冠状病毒感染的肺炎在免疫功能低下和免疫功能正常人群均可发生，与接触病毒的量有一定关系。对于免疫功能较差的人群，例如老年人、孕产妇或存在肝肾功能异常，有慢性病人群，感染后病情更重。根据WHO对新冠病毒传播途径的最新证据分析，包括有症状、症状前和无症状三种传播途径。新型冠状病毒蔓延全球以来，病例数不断攀升，各国采取隔离、个人防护、限制出行、停止非必须经济活动等一系列措施来看控制疫情的发展。就目前针对新型冠状病毒的预防、治疗、控制还未有特效药或疫苗，不能够真正的将疫情传播控制，只能通过对症治疗及严密监控的方法来应对，为此国家出台了《关于印发新型冠状病毒肺炎诊疗方案(第七版)》。我们迫切的需要找到可以对因治疗的药物来对抗新型冠状病毒；新冠病毒肺炎治疗目前并无特效药，对于疾病的治疗仅限于对症治疗，部分抗病毒药物使用后，临床结果不明确，并且药物使用对病原体无法实现特异性杀灭，副作用大。以往，疫苗被认为是最有效的群体免疫防控手段。目前尚没有新型冠状病毒疫苗上市，对该病毒的防控最有效的方式即为隔离，这种措施下给人们的生产、生活带来了诸多不便及经济损失。全球也在大力开展疫苗研制，全球范围内已有115个针对COVID-2019的候选疫苗研究项目。目前正在研究的疫苗技术包括：核酸(DNA和RNA)、病毒样颗粒、合成肽、病毒载体(复制型和非复制型)、重组蛋白质、减毒病毒和灭活病毒。疫苗最快上市时间也要18个月以上。疫苗研制、上市时间长、短时间内难以大面积覆盖接种，与人们迫切需要群体保护产生了矛盾。目前灭杀新冠状病毒的主要方法为化学灭杀法和物理灭杀法。化学灭杀法即通过使用广谱杀灭细菌病毒的化学药剂来进行病毒的杀灭，如84消毒液，医用酒精等，化学药剂一般对人体均有一定的毒性，因此多作为环境的杀毒，而无法直接应用于人体敏感器官表面，如眼耳口鼻等，一些化学毒性较强的化学药剂甚至不能与人体皮肤有过量接触，因此对人体防护效果十分有限；而物理灭杀法则需要通过高温、高压、紫外线等物理手段进行病毒的灭杀，而这种方式对外部环境依赖程度高，更加无法直接应用于人体表面的防护，无论是化学灭杀法还是物理灭杀法均对病原体无法实现特异性杀灭，副作用大，对于群体性病毒的防控辅助作用极为有限。因此迫切需要能应用于人体表面，不会对人体造成不利影响有效手段来预防和应急阻断新型冠状病毒感染。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种的抗新型冠状病毒的抗体。本专利技术的另一个目的在于提供该抗新型冠状病毒的抗体的制备方法。本专利技术的另一个目的在于提供该抗新型冠状病毒的抗体制备成的局部施于鼻腔、口咽黏膜，既无全身用药的局限性和副作用，又有局部用药起效快、用药量少、疗效好；且该抗体不易被人体吸收、不易破坏鼻腔和口咽内正常菌群的生态环境、不会导致局部菌群失调等效果，无毒副作用；且不会激活补体系统，不易与类风湿因子产生非特异性结合，不易固定金黄色葡萄球菌A蛋白，不易与蛋白G以及人类细胞FC受体结合，因而不易发生变态反应，无全身用药的局限性和副作用，使其可用于新型冠状病毒的防控辅助用药。本专利技术通过下述技术方案实现：一种抗新型冠状病毒的抗体，其特征在于，所述抗体为从鸡卵黄中提取的高滴度的特异性抗体，所述鸡卵黄主要从免疫母鸡所产的鸡蛋中获得，所述免疫母鸡为注射有新型冠状病毒疫苗的健康母鸡。其中，所述新型冠状病毒疫苗主要由灭活新型冠状病毒或重组新型冠状病毒抗原制备而成。新冠病毒入侵细胞的尖刺蛋白只能用ACE2做定点去感染细胞。鸟类目前没被大量检测出具备ACE2蛋白酶。目前这个点位主要是哺乳动物细胞中包含。因此，相比于哺乳动物，鱼类、鸟类和爬行类成为新冠肺炎中间宿主的可能性非常小。因此，通过免疫母鸡，然后从鸡卵黄中来提取制备得到抗新冠状病毒的抗体，具有明显的偶然性。由灭活新型冠状病毒(SARS-CoV-2)或重组新型冠状病毒(SARS-CoV-2)S抗原制备疫苗免疫母鸡，在鸡卵黄中产生高滴度的特异性抗体(即特异性IgY)，用生物技术分离纯化提取该种特异性卵黄抗体，采用酶联免疫吸附法检测成品卵黄抗体效价，其效价≥1:5000，具有意料不到的技术效果。该抗新冠状病毒的抗体的制备过程如下：用重组表达的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)S抗原或经病毒灭活的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)抗原，经稀释、加佐剂乳化制成各免疫用的疫苗；用该疫苗注射产蛋母鸡，获得免疫后鸡蛋，经消毒、蛋黄蛋清分离，取蛋黄，水稀释法提取、离心分离获得水溶性组分，用硫酸铵提取获得新型冠状病毒抗体粗提物；将粗提物用缓冲液溶解后灭活，超滤纯化；根据抗体效价检测结果，配制新型冠状病毒卵黄抗体，经除菌过滤后加适量稳定剂制成新型冠状病毒卵黄抗体成品。本专利技术一种用于新型冠状病毒的防控辅助用药，该药物以抗新冠状病毒的抗体为主要成分，添加生物药学上能够接受的辅助性成分制备而成的药物组合物。该所述药物组合物为液体形式，其中液体形式为水溶液形式，所述防控辅助用药能够直接作用于口咽部和鼻腔，可在短时间与口咽部和鼻腔的新型冠状病毒特异性结合，且能够在作用表面长时间停留，有效中和新型冠状病毒，作用病原体全过程对口咽部和鼻腔黏膜无痛无刺激。本专利技术与现有技术相比，具有以下优点及有益效果：(1)本专利技术中所述抗新型冠状病毒的抗体可在短时间与新型冠状病毒特异性病原体结合，抗体在作用表面停留时间长，可有效中和新型冠状病毒，作用病原体全过程对口咽部和鼻腔黏膜无痛无刺激，保护范围更广；(2)本专利技术中所述以抗新型冠状病毒的抗体为主要成分的防控辅助用药能够局部施于鼻腔、口腔、咽、喉及支气管黏膜，既无全身用药的局限性和副作用，又有局部用药起效快、用药量少、疗效好，不易被人体吸收，不破坏鼻腔、口腔、咽、喉、支气管内正常菌群的生态环境，也不会引起局部菌群失调；(3)本专利技术中所述以抗新型冠状病毒的抗体为主要成分的防控辅助用药不易激活补体系统，不易与类风湿因子产生非特异性结合，不易固定金黄色葡萄球菌A蛋白，不易与蛋白G以及人类细胞FC受体结合，因而不易发生变态反应；(4)本专利技术中所述以抗新型冠状病毒的抗体为主要成分的防控辅助用药不产生急性毒性反应，属于实际无毒级，可独立发挥中和新型冠状病毒、阻断病毒经鼻和口咽部感染的作用，无需补体及其它免疫细胞的配合；(5)本专利技术中制备所得的抗新型冠状病毒的抗体成品生物学活性稳定，可较长时间常温保存，每毫升抗新型冠状病毒的抗本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗新型冠状病毒的抗体，其特征在于，所述抗体为从鸡卵黄中提取的高滴度的特异性抗体，所述鸡卵黄主要从免疫母鸡所产的鸡蛋中获得，所述免疫母鸡为注射有新型冠状病毒疫苗的健康母鸡。/n

【技术特征摘要】
20200424 CN 20201033387591.一种抗新型冠状病毒的抗体，其特征在于，所述抗体为从鸡卵黄中提取的高滴度的特异性抗体，所述鸡卵黄主要从免疫母鸡所产的鸡蛋中获得，所述免疫母鸡为注射有新型冠状病毒疫苗的健康母鸡。


2.根据权利要求1所述一种抗新型冠状病毒的抗体，其特征在于，所述新型冠状病毒疫苗主要由灭活新型冠状病毒或重组新型冠状病毒抗原制备而成。


3.权利要求1或2所述的一种抗新型冠状病毒的抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）制备新型冠状病毒疫苗；
（2）使用制备得到的新型冠状病毒疫苗对健康的产蛋母鸡进行免疫；
（3）收集免疫母鸡产下的免疫鸡蛋；
（4）从免疫鸡蛋中进行新型冠状病毒抗体的粗提与纯化；
（5）检测抗体原液效价，配加稳定剂，从而获得抗新型冠状病毒的抗体制剂。


4.根据权利要求3所述的一种抗新型冠状病毒的抗体的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中，制备新型冠状病毒疫苗的具体过程为：取重组表达的新型冠状病毒抗原或经病毒灭活的新型冠状病毒抗原，加入等体积的弗氏完全佐剂或弗氏不完全佐剂，在组织裂解仪上20~25Hz共振3~5min进行乳化，经物理性状检验合格后，供健康产蛋母鸡免疫使用。


5.根据权利要求3或4所述的一种抗新型冠状病毒的抗体的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中，对母鸡进行免疫的具体过程为：取健康适龄的产蛋母鸡，取制备好的新型冠状病毒疫苗在产蛋母鸡的翅基部三角肌或胸肌等位置进行肌肉、皮下多点注射，用量为0.25～1.0ml/羽；初次免疫后间隔2～8周进行疫苗加强免疫，即在产蛋母鸡的皮下和肌肉多点注射，用量为0.25～1.0ml/羽。


6.根据权利要求3或4所述的一种抗新型冠状病毒的抗...

【专利技术属性】
技术研发人员：林小军，杨鹏辉，武婕，廖明，王欢，朱玲，雷雨，胡方炎，叶向阳，叶琳，
申请(专利权)人：成都钰康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51