蛋白质精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)的选择性抑制剂制造技术

本公开涉及式(I)和式(II)的化合物。式(I)和式(II)及其药学上可接受的盐或溶剂化物。还描述了包含式(I)或式(II)的化合物的药物组合物，以及其使用和制备方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】蛋白质精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)的选择性抑制剂相关申请的交叉引用本申请要求2017年10月26日提交的美国临时申请第62/577,448号和2018年5月4日提交的美国临时申请第62/666,724号的优先权权益。这些申请中的每一个都通过引用整体并入本文。
本公开涉及PRMT5抑制剂及其使用方法。
技术介绍
蛋白质精氨酸甲基化是一种常见的翻译后修饰，其调节众多细胞过程，包括基因转录、mRNA剪接、DNA修复、蛋白质细胞定位、细胞命运确定和信号转导。存在三种类型的甲基-精氨酸物质：ωNG单甲基精氨酸(MMA)、ωNG,NG不对称二甲基精氨酸(ADMA)和ωNG,N'G对称二甲基精氨酸(SDMA)。通过蛋白质精氨酸甲基转移酶(PRMT)家族的甲基转移酶来催化甲基化精氨酸的形成。目前，在人类基因组中有九种PRMT被注释。这些酶中的大多数是I型酶(PRMT1、PRMT-2、PRMT-3、PRMT-4、PRMT-6、PRMT-8)，它们能够以S-腺苷甲硫氨酸(SAM)为甲基供体，对精氨酸进行单甲基化和不对称二甲基化。PRMT-5、PRMT-7和PRMT-9被认为是催化精氨酸的对称二甲基化的II型酶。每个PRMT物质都具有七种β链甲基转移酶的特征基序(Katz等,2003)，以及PRMT亚家族特有的额外“双E”和“THW”序列基序。PRMT5是一种通用的转录阻遏物，其可与许多转录因子和阻遏复合物(包括BRG1和hBRM、Blimp1和Snail)一起发挥作用。该酶一旦被募集到启动子上，就将H3R8和H4R3对称地二甲基化。重要的是，H4R3位点是PRMT1甲基化(ADMA)的主要靶标并且通常被视为转录激活标记。因此，在体内产生了H4R3me2s(阻遏性；me2s表示SDMA修饰)和H4R3me2a(活性；me2a表示ADMA修饰)两种标记。PRMT5对H3R8和H4R3的特异性可以通过其与COPR5的相互作用而改变，并且这可能或许在确定PRMT5辅阻遏状态中起重要作用。PRMT在癌症中的作用已在人类癌症中鉴定到PRMT的异常表达，并且PRMT被认为是治疗靶标。对前列腺癌中组蛋白修饰的整体分析表明，组蛋白H4R3的二甲基化与等级增加呈正相关，并且这些变化可预测临床结果。在一组淋巴样癌细胞系以及套细胞淋巴瘤临床样品中，PRMT5水平已显示升高。PRMT5与参与各种细胞过程的多种底物相互作用，所述细胞过程包括RNA加工、信号转导和转录调控。PRMT5可以直接修饰组蛋白H3和H4，导致基因表达的阻遏。PRMT5过表达可以通过直接阻遏肿瘤抑制基因来刺激细胞生长并诱导转化。Pal等,Mol.Cell.Biol.2003,7475；Pal等,Mol.Cell.Biol.2004,9630；Wang等,Mol.Cell.Biol.2008,6262；Chung等,JBiolChem2013,5534。除了其证据充分的在转录和翻译中的致癌作用外，转录因子MYC还维护适当的前信使RNA剪接，所述前信使RNA剪接是淋巴瘤发生中必不可少的步骤。Koh等,Nature2015,5237558；Hsu等,Nature2015525,384。癌症依赖性的发现有可能为治疗策略提供信息并鉴定假定的药物靶标。将来自癌细胞系的全面基因组分析和来自癌细胞依赖性的功能表征的数据整合，最近发现，酶甲基硫代腺苷磷酸化酶(MTAP)的损失赋予了对蛋白质精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)及其结合搭配物WDR77的选择性依赖。MTAP由于其与通常缺失的肿瘤抑制基因CDKN2A的接近性而频繁损失。带有MTAP缺失的细胞具有增加的甲基硫代腺苷(MTA，被MTAP切割的代谢物)细胞内浓度。此外，MTA特异性抑制PRMT5酶活性。MTA或小分子PRMT5抑制剂的施用显示，与同基因的表达MTAP的对应物相比，无MTAP的癌细胞系的细胞活力优先受损。总之，这些发现揭示了PRMT5是通过共同的“乘客”基因组改变而增强的多个癌症谱系间的潜在弱点。PRMT5在血红蛋白病中的作用从胎儿到成人的人类珠蛋白基因亚型的发育转换从出生开始，预示着血红蛋白病、b型地中海贫血和镰状细胞病(SCD)的发作。观察到成人珠蛋白基因表达增加(在胎儿血红蛋白[HPFH]突变的遗传持续存在的情形下)显著改善了地中海贫血和SCD的临床严重程度，这促使人们寻求逆转γ-珠蛋白基因沉默的治疗策略。γ基因沉默的核心是DNA甲基化，这标记了成人骨髓红系细胞中与基因转录起始位点侧接的关键CpG二核苷酸。已经显示出这些标记是由于蛋白质精氨酸甲基转移酶PRMT5将DNA甲基转移酶DNMT3A募集到γ-启动子而产生的。Zhao等,NatStructMolBiol.200916,304。PRMT5介导的组蛋白H4R3甲基化募集了DNMT3A，从而在基因沉默中将组蛋白和DNA甲基化偶联。PRMT5诱导阻遏性组蛋白标记H4R3me2s，它充当DNMT3A直接结合以及后续DNA甲基化的模板。PRMT5结合或其酶活性的丧失导致CpG二核苷酸的去甲基化和基因激活。除了H4R3me2s标记和DNA甲基化以外，PRMT5与γ-启动子的结合及其酶促活性对于在γ-启动子上组装多蛋白复合物来说必不可少，这诱导一系列协同的阻遏性表观遗传标记。该复合物的破坏导致γ基因表达的重新激活。这些研究为开发PRMT5抑制剂作为地中海贫血和SCD的靶向疗法提供了基础。
技术实现思路
本公开涉及式I和式II的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物：其中A是N、C-H或C-R4，其中R4是卤素或C1-C6卤代烷基；R1是-C1-C6烷-稠合芳基或-C1-C6烷-稠合杂芳基；R2是卤素、-C1-C6烷基、-C2-C4烯基、-C1-C6烷-OH、-C1-C6烷-卤素、-C1-C6烷-O-C1-C6烷基、-C1-C6烷-O-C1-C6烷-芳基、-O-C1-C6烷基、-NR5R5'、-NHC(O)NR5R5'、-NHC(S)NR5R5'、-NH-O-R5或-NH-NR5R5'；R3是H、卤素、NH2或-C1-C6烷基；R5和R5'各自独立地是H、C1-C6烷基或-C1-C6烷-OC1-C6烷基；或R5和R5'与其所连接的原子一起形成C2-C6杂环烷基环；并且R6是H或-C1-C6烷基。还描述了式I和式II的化合物的立体异构体，及其药用盐和溶剂化物。描述了式I和式II的化合物的使用方法，以及包含式I和式II的化合物的药物组合物。附图说明图1显示了实施例11的化合物的ORTEP表示。具体实施方式通过参考以下描述，包括以下定义和实施例，可以更充分地理解本公开。本文在分开的方面的上下文中描述的所公开的组合物和方法的某些特征也可以在单个方面中组合提供。或者，为简洁起见，在单个方面的上下文中描述的所公开的组合物和方法的各种特征也可以分开地或以任何子组合的形式提供。术语“烷基”当单独使用或作为取代基基本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种式I或式II的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171026 US 62/577,448;20180504 US 62/666,7241.一种式I或式II的化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，



其中
A是N、C-H或C-R4，其中R4是卤素或C1-C6卤代烷基；
R1是-C1-C6烷-稠合芳基或-C1-C6烷-稠合杂芳基；
R2是卤素、-C1-C6烷基、-C2-C4烯基、-C1-C6烷-OH、-C1-C6烷-卤素、-C1-C6烷-O-C1-C6烷基、-C1-C6烷-O-C1-C6烷-芳基、-O-C1-C6烷基、-NR5R5'、-NHC(O)NR5R5'、-NHC(S)NR5R5'、-NH-O-R5或-NH-NR5R5'；
R3是H、卤素、NH2或-C1-C6烷基；
R5和R5'各自独立地是H、C1-C6烷基或-C1-C6烷-OC1-C6烷基；
或者R5和R5'与其所连接的原子一起形成C2-C6杂环烷基环；并且
R6是H或-C1-C6烷基。


2.权利要求1的化合物，其中R1是-C1-C6烷-稠合芳基。


3.权利要求2的化合物，其中所述稠合芳基是双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基；7-氟双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基；或7,7-二氟双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基。


4.权利要求2的化合物，其中所述稠合芳基是7-甲基双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基；7,7-二甲基双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基；双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-7-醇-3-基；双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-7-酮-3-基；7-甲基双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-7-甲腈-3-基；或2,3-二氢-1H-茚-5-基。


5.权利要求2的化合物，其中R1是-CH2-(双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-CH2-(7-氟双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-CH2-(7,7-二氟双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-CH(OH)-(双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-CH(OH)-(7-氟双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-CH(OH)-(7,7-二氟双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-CH(F)-(双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-CH(F)-(7-氟双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-CH(F)-(7,7-二氟双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-CH(NH2)-(双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-CH(NH2)-(7-氟双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-CH(NH2)-(7,7-二氟双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-CH(Me)-(双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-CH(Me)-(7-氟双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-CH(Me)-(7,7-二氟双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-C(Me)(OH)-(双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-C(Me)(OH)-(7-氟双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)或-C(Me)(OH)-(7,7-二氟双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)。


6.权利要求2的化合物，其中R1是-CH2-(7-甲基双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-CH2-(7,7-二甲基双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-CH2-(双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-7-醇-3-基)、-CH2-(双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-7-酮-3-基)、-CH2-(7-甲基双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-7-甲腈-3-基)、-CH2-(2,3-二氢-1H-茚-5-基)、-CH(OH)-(7-甲基双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-CH(OH)-(7,7-二甲基双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-CH(OH)-(双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-7-醇-3-基)、-CH(OH)-(双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-7-酮-3-基)、-CH(OH)-(7-甲基双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-7-甲腈-3-基)、-CH(OH)-(2,3-二氢-1H-茚-5-基)、-CH(F)-(7-甲基双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-CH(F)-(7,7-二甲基双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-CH(F)-(双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-7-醇-3-基)、-CH(F)-(双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-7-酮-3-基)、-CH(F)-(7-甲基双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-7-甲腈-3-基)、-CH(F)-(2,3-二氢-1H-茚-5-基)、-CH(NH2)-(7-甲基双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-CH(NH2)-(7,7-二甲基双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-CH(NH2)-(双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-7-醇-3-基)、-CH(NH2)-(双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-7-酮-3-基)、-CH(NH2)-(7-甲基双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-7-甲腈-3-基)、-CH(NH2)-(2,3-二氢-1H-茚-5-基)、-CH(Me)-(7-甲基双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-CH(Me)-(7,7-二甲基双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)、-CH(Me)-(双环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-7-醇-3-基)、...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡安·卢恩戈，林虹，迈克尔·霍金斯，
申请(专利权)人：普莱鲁德疗法有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US