Hilic-CAD联合检测脱氢抗坏血酸的方法技术

本发明专利技术涉及一种Hilic‑CAD联合检测脱氢抗坏血酸的方法，它包括以下方法：流动相配制步骤、脱氢抗坏血酸待测溶液配制步骤、高效液相色谱仪参数设置步骤与检测并输出对应的色谱图步骤。本发明专利技术与在普通氨基柱上检测相比，脱氢抗坏血酸的保留明显增强，方法重现性好，无需使用昂贵且不易清除的离子对试剂，更经济方便。本发明专利技术与用DAD及ELSD检测器相比，脱氢抗坏血酸的响应度明显提高，与质谱检测器相比，操作更简便。

【技术实现步骤摘要】
Hilic-CAD联合检测脱氢抗坏血酸的方法
本专利技术涉及一种脱氢抗坏血酸的方法，具体地说是一种Hilic-CAD联合检测脱氢抗坏血酸的方法。
技术介绍
脱氢抗坏血酸是抗坏血酸（维生素C）的一种氧化降解杂质。通过监测脱氢抗坏血酸的含量，可以优化含有维生素C的食品及药品的生产工艺，控制维生素C的降解，优化含有维生素C产品的贮存条件。脱氢抗坏血酸的定量检测方法有报道，多采用普通氨基柱分离，离子对作为流动相添加剂，检测器通常为DAD、ELSD或者质谱检测器。这些方法普遍存在脱氢抗坏血酸在色谱柱上保留时间不足、响应度不足或者采用离子对试剂的问题。目前，尚未见Hilic-CAD联用且不需使用离子对试剂的技术检测脱氢抗坏血酸的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术中存在的不足，提供一种重现性好且更加经济方便的Hilic-CAD联合检测脱氢抗坏血酸的方法。按照本专利技术提供的技术方案，所述Hilic-CAD联合检测脱氢抗坏血酸的方法包括以下方法：步骤一、将体积浓度为0.01%~1%的甲酸水溶液与乙腈按照体积比（1~5）:（95~99）混合形成流动相；步骤二、称取脱氢抗坏血酸，加甲酸水溶液与乙腈配成的体积比为（1~5）:（95~99）混合溶剂溶解稀释后得到10~100μg/ml的脱氢抗坏血酸待测溶液；步骤三、高效液相色谱仪采用Hilic色谱柱，色谱柱产品参数为50~300mm×2.1~10mm、1.7~10μm，柱温设置为25℃~40℃，流速为0.5~1.5ml/min，CAD温度为30℃~50℃，载气压力为：50~70psi，进样量为：5~50μl；步骤四、采用高效液相色谱仪对脱氢抗坏血酸待测溶液进行检测并输出对应的色谱图。作为优选，步骤一和步骤二中，甲酸水溶液中甲酸的体积浓度为0.01%~1%。作为优选，步骤一和步骤二中，甲酸水溶液中甲酸的体积浓度为0.1%。作为优选，步骤一和步骤二中，甲酸水溶液与乙腈的体积比为3:97。作为优选，步骤二中，脱氢抗坏血酸待测溶液的质量浓度为100μg/ml。作为优选，步骤三中，柱温设置为25℃。作为优选，步骤三中，流速设置为1ml/min。作为优选，步骤三中，CAD温度设置为35℃。作为优选，步骤三中，载气压力设置为50psi。作为优选，步骤三中，进样量设置为5μl。本专利技术与在普通氨基柱上检测相比，脱氢抗坏血酸的保留明显增强，方法重现性好，无需使用昂贵且不易清除的离子对试剂，更经济方便。本专利技术与用DAD及ELSD检测器相比，脱氢抗坏血酸的响应度明显提高，与质谱检测器相比，操作更简便。附图说明图1是实施例1中脱氢抗坏血酸溶液的色谱图。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步说明。实施例1一种采用亲水作用色谱法（Hilic）与电喷雾检测器（CAD）联用检测脱氢抗坏血酸的方法包括以下步骤：步骤一、将体积浓度为0.1%的甲酸水溶液与乙腈按照体积比3:97混合形成流动相；步骤二、称取一定量的脱氢抗坏血酸，加甲酸水溶液与乙腈配成的体积比为3:97混合溶剂溶解稀释后得到100μg/ml的脱氢抗坏血酸待测溶液，该步骤中甲酸水溶液体积浓度为0.1%；步骤三、高效液相色谱仪采用Hilic色谱柱，色谱柱产品参数为100mm×4.6mm、2.7μm，将高效液相色谱仪柱温设置为25℃，流速为1.0ml/min，CAD温度为35℃，载气压力为：50psi，进样量为：5μl；步骤四、采用高效液相色谱仪对脱氢抗坏血酸待测溶液进行检测并输出对应的色谱图。检测结果：脱氢抗坏血酸的保留时间为7.476分钟，响应度为22PA。以上所述仅为本专利技术的较佳实施例，并不用以限制本专利技术，凡在本专利技术的精神和原则之内，所作的任何修改、等他替换、改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种Hilic-CAD联合检测脱氢抗坏血酸的方法，其特征是该方法包括以下方法：/n步骤一、将体积浓度为0.01%~1%的甲酸水溶液与乙腈按照体积比（1~5）:（95~99）混合形成流动相；/n步骤二、称取脱氢抗坏血酸，加甲酸水溶液与乙腈配成的体积比为（1~5）:（95~99）混合溶剂溶解稀释后得到10~100μg/ml的脱氢抗坏血酸待测溶液；/n步骤三、高效液相色谱仪采用Hilic色谱柱，色谱柱产品参数为50~300mm×2.1~10mm、1.7~10μm，柱温设置为25℃~40℃，流速为0.5~1.5ml/min，CAD温度为30℃~50℃，载气压力为：50~70psi，进样量为：5~50μl；/n步骤四、采用高效液相色谱仪对脱氢抗坏血酸待测溶液进行检测并输出对应的色谱图。/n

【技术特征摘要】
1.一种Hilic-CAD联合检测脱氢抗坏血酸的方法，其特征是该方法包括以下方法：
步骤一、将体积浓度为0.01%~1%的甲酸水溶液与乙腈按照体积比（1~5）:（95~99）混合形成流动相；
步骤二、称取脱氢抗坏血酸，加甲酸水溶液与乙腈配成的体积比为（1~5）:（95~99）混合溶剂溶解稀释后得到10~100μg/ml的脱氢抗坏血酸待测溶液；
步骤三、高效液相色谱仪采用Hilic色谱柱，色谱柱产品参数为50~300mm×2.1~10mm、1.7~10μm，柱温设置为25℃~40℃，流速为0.5~1.5ml/min，CAD温度为30℃~50℃，载气压力为：50~70psi，进样量为：5~50μl；
步骤四、采用高效液相色谱仪对脱氢抗坏血酸待测溶液进行检测并输出对应的色谱图。


2.根据权利要求1所述的Hilic-CAD联合检测脱氢抗坏血酸的方法，其特征是：步骤一和步骤二中，甲酸水溶液中甲酸的体积浓度为0.01%~1%。


3.根据权利要求1所述的Hilic-CAD联合检测脱氢抗坏血酸的方法，其特征是：步骤一和步骤二中，甲酸水溶液中甲酸的体积浓度...

【专利技术属性】
技术研发人员：林洁，何翠翠，
申请(专利权)人：费森尤斯卡比华瑞制药有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32