多杂环-吡唑啉类衍生物在制备抗非小细胞肺癌药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种化合物2‑(5‑(苯并[d][1,3]二氧杂‑5‑基)‑3‑苯基‑4,5‑二氢‑1H‑吡唑‑1‑基)‑4‑(吡啶‑4‑基)噻唑(简略记为BPT)在制备抗非小细胞肺癌药物中的应用。实验证实本发明专利技术提供的化合物BPT能够显著抑制A549细胞生长，并且抑制作用优于临床药物5‑FU。BPT有望作为一种有效的抑制肿瘤生长工具，为开发非小细胞肺癌治疗药物奠定基础。

【技术实现步骤摘要】
多杂环-吡唑啉类衍生物在制备抗非小细胞肺癌药物中的应用
本专利技术涉及多杂环-吡唑啉类衍生物在制备抗肺癌药物中的应用，尤其涉及荧光化合物2-(5-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-基)-3-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-1-基)-4-(吡啶-4-基)噻唑(简略记为BPT)在制备抑制A549癌细胞生长的抗非小细胞肺癌药物中的应用。
技术介绍
肿瘤是众所周知的严重危害人类健康的疾病之一，发病率和死亡率逐年上升。预计在2030年，全世界将有2140万新诊断肿瘤病例，而肿瘤死亡人数将达1320万。肺癌因其发现晚，高致死率，在癌症治疗中成为一个全球性难题。大气污染等环境因素和吸烟等不良生活习惯，也加剧了肺癌的发展。在肺癌病例当中非小细胞肺癌约占85％的比重，约75％的患者在发现时已处于中晚期，5年存活率极低。化学药物治疗在肺癌的各种治疗方法中占有重要的地位。小分子化合物可以作为肿瘤抑制因子，成为一种有前景的新治疗策略。然而临床上肺癌化疗所面临的一个非常大的挑战就是药物选择性差，即在肿瘤治疗的同时对正常组织造成毒副作用导致治疗失败，而且选择性差的药物很容易引起肿瘤细胞的耐药。因此，迫切需要研发更多具有抑制肺癌细胞生长的化合物或制剂。经检索，有关荧光化合物2-(5-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-基)-3-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-1-基)-4-(吡啶-4-基)噻唑在制备抑制A549癌细胞生长的抗肺癌药物中的应用尚未见报道。
技术实现思路
针对现有技术的不足，本专利技术要解决的问题是提供一种化合物2-(5-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-基)-3-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-1-基)-4-(吡啶-4-基)噻唑(简略记为BPT)在制备抑制A549癌细胞生长的抗非小细胞肺癌药物中的应用。本专利技术所述的化合物2-(5-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-基)-3-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-1-基)-4-(吡啶-4-基)噻唑在制备抗非小细胞肺癌药物中的应用，其中所述2-(5-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-基)-3-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-1-基)-4-(吡啶-4-基)噻唑简略记为BPT，其结构式如式(I)所示：上述的应用中：所述2-(5-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-基)-3-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-1-基)-4-(吡啶-4-基)噻唑能够有效抑制A549细胞生长的剂量为1～5μM。上述化合物2-(5-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-基)-3-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-1-基)-4-(吡啶-4-基)噻唑抑制A549癌生长的细胞生物学实验及结果如下：1.化合物BPT对A549细胞存活率的影响。实验组：分别将浓度为0.1μM，1μM，5μM，10μM的BPT处理A549细胞24h和48h。阴性对照：DMSO(0.02％，v/v)，阳性对照：临床抗癌药物五氟尿嘧啶(5-FU)。结果表明：在用1μM，5μM，10μM的BPT处理A549细胞24h和48h后能够显著抑制A549细胞的存活，见图1。具体作用结果见下表：2.化合物BPT对A549细胞形态的影响。实验组：分别用浓度为0.1μM，1μM，5μM，10μM的BPT处理A549细胞12h，24h和48h后拍摄细胞形态变化。对照组：DMSO(0.02％，v/v)。结果表明：在上述时间条件下，用5μM，10μM的BPT处理能够减少A549细胞的数量，见图2。3.化合物BPT对A549细胞的抑制作用优于临床药物5-FU。实验组：分别计算化合物BPT以及5-FU处理A549细胞48h的半抑制浓度(IC50)。发现BPT的IC50值为2.6μM，优于临床药物5-FU(9.4μM)。上述的实验数据统计学处理：实验数据以平均值±标准误差表示，经t检验：*P<0.05表示有显著性差异；**P<0.01表示有极显著性差异。由上述实验及其结果，可以得出如下结论：BPT能够显著抑制A549细胞生长，并且抑制作用优于临床药物5-FU。本专利技术提供的BPT所显示的抑制A549癌细胞生长的结果，预示BPT有望作为一种有效的抑制肿瘤生长工具，为开发抗非小细胞肺癌治疗药物奠定基础。附图说明图1：BPT抑制A549细胞存活。其中：A:BPT处理A549细胞24h后，检测A549细胞存活率。B:BPT处理A549细胞48h后，检测A549细胞存活率。图2：BPT促进A549形态改变并减少细胞数量。不同浓度BPT处理A549细胞12h，24h和48h后，显微镜拍照观察A549细胞形态和数量变化。具体实施方式下面结合具体附图和实施例对本
技术实现思路
进行详细说明。如下所述例子仅是本专利技术的较佳实施方式而已，应该说明的是，下述说明仅仅是为了解释本专利技术，并非对本专利技术作任何形式上的限制，凡是依据本专利技术的技术实质对实施方式所做的任何简单修改，等同变化与修饰，均属于本专利技术技术方案的范围内。下述实施例中，所使用的材料、细胞、试剂等，如无特殊说明，均从商业途径得到。实施例1：BPT处理A549细胞后SRB法存活率检测。(1)加入不同浓度的化合物BPT处理事先种于96孔板的细胞。(2)化合物处理24h以及48h后弃旧培养液，加入100μL的三氯醋酸，置于4℃固定细胞1h。(3)弃固定液。用双蒸水洗五遍，动作轻柔，室温晾干。(4)每孔加入50μL的SRB，室温摇床，10分钟。(5)用1％醋酸洗5遍，室温晾干。(6)每孔加入100μL浓度10mM的缓冲液Tris碱，置于摇床10分钟。(7)选择540nm激发光，测OD值。结果表明：1μM，5μM，10μM的BPT处理A549细胞24h以及48h后能够显著抑制A549细胞的存活，见图1。实施例2：BPT处理A549细胞后，倒置显微镜下检测细胞形态和数量变化。将A549细胞接种于直径6cm的培养皿中，37℃，CO2孵箱内培养12h之后，加入不同浓度BPT处理12h,24h以及48h后置于倒置显微镜下拍摄细胞形态，观察数量。结果表明：上述条件下，5μM，10μM的BPT能够使细胞形态发生变化，有些细胞呈现出细窄狭长和变圆等变化，明显减少A549细胞的数量。见图2。实施例3：BPT的制备在100mL的圆底烧瓶中加入1.20克苯乙酮(0.01摩尔)，1.50克胡椒醛(0.01摩尔)，氢氧化钠水溶液(8毫升，2.5摩尔)以及乙醇(20毫升)，装置回流冷凝器，上部接干燥管。加热回流5小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。黄色沉淀物经水洗，干燥得到(E)-3-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-基)-1-苯基丙-2-烯-1-酮。在1.512克(0.006摩尔)(E)-3-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-基)-1-苯基丙-2-烯-1-酮的乙醇(本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.化合物2-(5-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-基)-3-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-1-基)-4-(吡啶-4-基)噻唑在制备抗非小细胞肺癌药物中的应用，其中所述2-(5-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-基)-3-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-1-基)-4-(吡啶-4-基)噻唑简略记为BPT，其结构式如式(I)所示：/n

【技术特征摘要】
1.化合物2-(5-(苯并[d][1,3]二氧杂-5-基)-3-苯基-4,5-二氢-1H-吡唑-1-基)-4-(吡啶-4-基)噻唑在制备抗非小细胞肺癌药物中的应用，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：林兆民，高冬芳，张璐，张明，陈元，王鹏，林御星，
申请(专利权)人：山东大学第二医院，
类型：发明
国别省市：山东;37