抗CD27抗体、其抗原结合片段及其医药用途制造技术

本发明专利技术提供了一种抗CD27抗体、其抗原结合片段及其医药用途。进一步地，本发明专利技术提供了包含所述抗CD27抗体CDR区的人源抗体，以及包含所述人源抗CD27抗体及其抗原结合片段的药物组合物，以及其作为抗癌药物的用途。尤其地，本发明专利技术提供了一种人源抗CD27抗体及其在制备用于治疗CD27介导的疾病或病症的药物中的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗CD27抗体、其抗原结合片段及其医药用途本申请要求申请日为2018年3月28日的中国专利申请CN201810267050.4的优先权。本申请引用上述中国专利申请的全文。
本专利技术涉及一种抗CD27抗体，CD27的抗原结合片段，包含所述抗体CDR区的嵌合抗体、人源化抗体，以及包含人抗CD27抗体及其抗原结合片段的药物组合物，以及其作为抗癌药物的用途。
技术介绍
肿瘤免疫疗法是抗癌药物领域的一个长期热点。它充分利用和调动肿瘤患者体内的杀伤性T细胞，对肿瘤进行杀伤摧毁，可能是最有效且最安全的肿瘤治疗途径之一。人体内T细胞的活化是具备两条信号通路的系统，除了需通过抗原呈递细胞递呈MHC抗原肽给T细胞提供第一信号，同时需要一系列协同刺激分子提供第二信号，才能使T细胞产生正常的免疫应答。T细胞和抗原呈递细胞之间的相互作用包括有利于产生免疫应答的多种辅助分子，而CD27正是其中重要一种，它属于肿瘤坏死因子受体(TNF-R)超家族并结合T细胞表面的CD70。CD27是糖基化的I型跨膜蛋白，通常是由二硫桥连结的同源二聚体。二硫桥处在胞外域的近细胞膜区域(Camerini等，J Immunol.147:3165-69,1991)。在T细胞上，交联的CD27抗原可提供协同剌激信号，而与T细胞受体一起交联时可诱导T细胞增殖和细胞免疫活化。CD27在成熟胸腺细胞、大多数CD4+和CD8+外用血T细胞、自然杀伤细胞和B细胞上表达，也在B细胞非霍奇金淋巴瘤和B细胞慢性淋巴细胞白血病中高表达；而在寄生虫、巨细胞病毒(CMV)等感染、多发性硬化、结节病和B细胞慢性淋巴细胞白血病中，血清或疾病活动性部位也观测到可溶CD27蛋白水平升高(Kobata T等，Proc.Nat l.Acad.Sci.USA.1995(24):11249-53；Ranheim EA等，Blood.1995 85(12):3556-65；Loenen WA等，Eur.J.Immunol.1992 22:447)。近年的研究表明，抗CD27单克隆抗体激动剂可促进T细胞应答，并可作为潜在的抗癌治疗剂(参见专利WO2008051424，WO2011130434、PCT/CN2017/103842)。虽然迄今获得的研究结果已将CD27鉴定为免疫疗法的有用靶标，但抗CD27单克隆抗体哪些具体特征对治疗尤为有利则仍然有待探明。本领域仍然需要深入了解抗CD27抗体的哪些具体功能特性在治疗学上有效，以至进一步获得潜在的对防治疾病更有效的改进型抗CD27抗体。目前已有多家国际公司研发针对CD27靶点的肿瘤抗体药物。美国Celldex的抗CD27抗体已处在II期临床试验阶段，而默克、Aduro和Apogenix等公司的相关产品尚在临床前开发之中。因此，提供具备高亲和力、高选择性、高生物活性和高稳定性的抗CD27抗体，且所述抗体具有可与期望的有利治疗效果相关联的特定功能特性，是本领域亟需解决的问题。
技术实现思路
本专利技术的一些实施方式中，提供一种抗CD27抗体或其抗原结合片段，其包含：轻链可变区和重链可变区，其中，所述的抗体轻链可变区包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:6所示的LCDR1、SEQ ID NO:7所示的LCDR2、和/或SEQ ID NO:8所示的LCDR3；和/或，所述的抗体重链可变区包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:3所示的HCDR1、SEQ ID NO:4所示的HCDR2、和/或SEQ ID NO:5所示的HCDR3。一些实施方式中，提供一种抗CD27抗体或其抗原结合片段，其包含：轻链可变区和重链可变区，其中所述的抗体轻链可变区包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；和/或，所述的抗体重链可变区包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3。一些实施方式中，上述的抗CD27抗体或其抗原结合片段，其为鼠源抗体、嵌合抗体、人抗体、人源化抗体或其片段。一些实施方式中，上述抗CD27抗体或其抗原结合片段还包含人类种系轻链可变区Vκ1序列的构架区或其衍生序列，在至少一个实施方式中，所述抗体轻链可变区的框架区衍生自Vκ1-12序列；和/或，所述抗CD27抗体或其抗原结合片段还包含人类种系重链可变区VH3序列的框架区或其衍生序列；在至少一个实施方式中，所述重链可变区序列的框架区衍生自VH3-74序列。一些实施方式中，上述抗CD27抗体或其抗原结合片段的所述抗体重链可变区VH3序列的框架区序列中Kabat位置73的天冬酰胺被苏氨酸替换。一些实施方式中，上述人源化抗体的重链包含人源IgG1、IgG2、IgG3或IgG4或其变体的重链恒定区，抗原结合片段为Fab、Fab’-SH、Fv、scFv和/或(Fab’)2片段。在至少一个实施方式中，所述人源化抗体的重链包含人源IgG1、IgG2或IgG4的重链恒定区。一些实施方式中，上述抗CD27抗体或其抗原结合片段的所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，或与SEQ ID NO:2有至少90％、92％、94％、95％、96％、97％、98％、99％同一性；和/或所述重链可变区序列的氨基酸序列如SEQ ID NO:1或者SEQ ID NO:11所示，或与SEQ ID NO:1或者SEQ ID NO:11有至少90％、92％、94％、95％、96％、97％、98％、99％同一性。在至少一个实施方式中，上述抗CD27抗体或其抗原结合片段的所述抗体轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示或与SEQ ID NO:9有至少90％、92％、94％、95％、96％、97％、98％、99％同一性；和/或所述抗CD27抗体或其抗原结合片段的所述抗体重链的氨基酸序列如SEQ ID NO:10或者SEQ ID NO:12所示，或与SEQ ID NO:10或者SEQ ID NO:12有至少90％、92％、94％、95％、96％、97％、98％、99％同一性。一些实施方式中，提供一种抗CD27抗体或其抗原结合片段，其包含：轻链可变区和重链可变区，其中所述的抗体轻链可变区包含分别如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3。抗CD27抗体或其抗原结合片段包含人类种系轻链可变区Vκ1序列的框架区；所述的抗体重链可变区包含分别如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，还包含人类种系重链可变区VH3序列的框架区。在至少一个实施方式中，所述抗CD27抗体轻链可变区的框架区选自衍生自Vκ1-12序列的框架区；重链可变区序列的框架区选自衍生自VH3-74序列的框架区。如下提供了人类种系VH3-74本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗CD27抗体或其抗原结合片段，其包含：轻链可变区和重链可变区，其中，所述的抗体轻链可变区包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；和/或，/n所述的抗体重链可变区包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180328 CN 2018102670504一种抗CD27抗体或其抗原结合片段，其包含：轻链可变区和重链可变区，其中，所述的抗体轻链可变区包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；和/或，
所述的抗体重链可变区包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3。


如权利要求1所述的抗CD27抗体或其抗原结合片段，其中所述抗CD27抗体或其抗原结合片段还包含人类种系轻链可变区Vκ1序列的构架区或其衍生序列；优选地，所述抗体轻链可变区的框架区衍生自Vκ1-12序列；
和/或，所述抗CD27抗体或其抗原结合片段还包含人类种系重链可变区V
H3序列的框架区或其衍生序列；优选地，所述重链可变区序列的框架区衍生自V
H3-74序列。



如权利要求1或2所述的抗CD27抗体或其抗原结合片段，其中所述的抗体重链可变区V
H3序列的框架区序列中Kabat位置73的天冬酰胺被苏氨酸替换。



如前述任一项权利要求所述的抗CD27抗体或其抗原结合片段，其中所述的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示或与SEQ ID NO:2有至少90％同一性；和/或所述重链可变区序列的氨基酸序列如SEQ ID NO:1或者SEQ ID NO:11所示，或与SEQ ID NO:1或者SEQ ID NO:11有至少90％同一性。


如前述任一项权利要求所述的抗CD27抗体或其抗原结合片段，其为人抗体或其片段。


如前述任一项权利要求所述的抗CD27抗体或其抗原结合片段，所述人抗体的重链包含人源IgG1、IgG2、IgG3或IgG4或其变体的重链恒定区，抗原结合片段为Fab、Fab’-SH、Fv、scFv或(Fab’)
2片段；优选地，所述人抗体的重链包含人源IgG1、IgG2或IgG4的重链恒定区。



如前述任一项权利要求所述的抗CD27抗体或其抗原结合片段，其中所述抗CD27抗体或其抗原结合片段的抗体轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示或与SEQ ID NO:9有至少90％同一性；和/或所述抗CD27抗体或其...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄浩，方言，颜贞，石瑞君，蒋家骅，曹国庆，张连山，
申请(专利权)人：江苏恒瑞医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32