石香薷水提物在制备抗新型冠状病毒药中的应用制造技术

技术编号:25161610 阅读:56 留言:0更新日期:2020-08-07 20:52
本发明专利技术公开了石香薷水提物在制备抗新型冠状病毒药中的应用,同时还公开了石香薷水提物在制备预防新型冠状病毒药中的应用。本发明专利技术研究发现,石香薷水提物能够在细胞外直接杀灭新型冠状病毒,还能抑制新型冠状病毒在细胞内复制,且抑制病毒复制的能力优于利巴韦林,本发明专利技术据此首次提出将石香薷水提物用于制备抗新型冠状病毒药中,以在新型冠状病毒感染机体后发挥治疗作用。同时,本发明专利技术研究发现,在采用石香薷水提物预先处理细胞后,细胞感染新型冠状病毒后病毒在细胞内的复制能力受到抑制;表明石香薷提取物对新型冠状病毒具有预防作用,本发明专利技术据此首次提出将石香薷水提物用于制备预防新型冠状病毒药中,以缓解机体感染新型冠状病毒后的症状。

【技术实现步骤摘要】
石香薷水提物在制备抗新型冠状病毒药中的应用
本专利技术属于病毒感染治疗
,具体涉及石香薷水提物在制备抗新型冠状病毒药中的应用。
技术介绍
2019新型冠状病毒(Novelcoronaviruspneumonia,NCP),即“COVID-19”,因2019年病毒性肺炎病例而被发现,2020年1月12日被世界卫生组织命名。被2019新型冠状病毒感染的人会出现不同程度的症状,轻者只是发烧或轻微咳嗽,重者会发展成肺炎,更为严重者会导致死亡。2019新型冠状病毒是2019年底新发现的冠状病毒,疫情虽然得到很好的控制,但目前暂无特效药。自2019新型冠状病毒被发现以来,各科研单位、组织均积极迅速地展开了深入研究,以期盼能找到能够对2019新型冠状病毒感染具有疗效的药物。对待这种传染性强的病毒,为了能够快速地应用,疗效药的一个重要研究方向是老药新用。香薷(Elsholtziaciliata(Thunb.)Hyland.)是一种常见中药材,其具有发汗解表,化湿和中,利水消肿的功效;主治:夏月感寒饮冷,头痛发热,恶寒无汗,胸痞腹痛,呕吐腹泻,水肿,脚气。此外,文献(徐军烈,蒋维尔.石香薷水提物抗流感病毒作用研究.浙江中医杂志[J].2013,48(4):273-274.)公开了石香薷(MoslachinensisMaxim.)能够改善A型流感病毒适应株A/PR8感染小鼠的临床症状,减少小鼠死亡数,延长其平均存活时间。目前,尚未见有关石香薷(Elsholtziaciliata(Thunb.)Hyland.)水提物抗新型冠状病毒的任何报道。
技术实现思路
本专利技术的专利技术目的是提供石香薷水提物的新用途,同时也为研制新型冠状病毒防治药物提供一种新的活性成分来源。为实现上述专利技术目的,本专利技术的技术方案如下:其一、石香薷水提物(MoslachinensisMaxim.)在制备抗新型冠状病毒药中的应用。其二、石香薷水提物在制备预防新型冠状病毒药中的应用。本专利技术研究发现,石香薷水提物不仅能够在细胞外直接杀灭新型冠状病毒,而且,在将石香薷水提物作用于感染新型冠状病毒的细胞后,还能抑制新型冠状病毒在细胞内复制,且抑制病毒复制的能力优于利巴韦林,本专利技术据此首次提出将石香薷水提物用于制备抗新型冠状病毒药中,以在新型冠状病毒感染机体后发挥治疗作用。同时,本专利技术还研究发现,在采用石香薷水提物预先处理细胞后,细胞感染新型冠状病毒后病毒在细胞内的复制能力受到抑制;表明石香薷提取物对新型冠状病毒具有预防作用,本专利技术据此首次提出将石香薷水提物用于制备预防新型冠状病毒药中,以缓解机体感染新型冠状病毒后的症状。石香薷水提物的制备方法是本领域技术人员所熟知的,为便于对本专利技术进行实施,在上述的应用中,所述的石香薷水提物由以下方法制备获得:以水为溶剂,采用热回流提取法对石香薷药材回流提取,滤出提取液;加入新溶剂重新对药渣回流提取至少一次,合并所有提取液,经浓缩获得所述的石香薷水提物。在上述的应用中,首次回流提取时,水与石香薷药材的质量比为30:1,回流提取1-2h;在对药渣进行回流提取时,水的添加量可以适当减少。此外,本专利技术还提供了一种抗新型冠状病毒药以及一种预防新型冠状病毒药,并且,所述的抗新型冠状病毒药以及预防新型冠状病毒药的有效成分至少包括石香薷水提物。与现有技术相比,本专利技术的有益效果体现在:(1)本专利技术研究发现,石香薷水提物能够在细胞外直接杀灭新型冠状病毒,而且,在将石香薷水提物作用于感染新型冠状病毒的细胞后,还能抑制新型冠状病毒在细胞内复制,且抑制病毒复制的能力优于利巴韦林,本专利技术据此首次提出将石香薷水提物用于制备抗新型冠状病毒药中,以在新型冠状病毒感染机体后发挥治疗作用。(2)本专利技术研究发现,在采用石香薷水提物预先处理细胞后,细胞感染新型冠状病毒后病毒在细胞内的复制能力受到抑制;表明石香薷提取物对新型冠状病毒具有预防作用,本专利技术据此首次提出将石香薷水提物用于制备预防新型冠状病毒药中,以缓解机体感染新型冠状病毒后的症状。附图说明图1为石香薷水提物的抗新型冠状病毒效果图;其中,“杀灭组”即为石香薷水提物对新型冠状病毒的直接杀灭能力评价结果,“抑制组”即为石香薷水提物对新型冠状病毒在细胞内复制的抑制能力评价结果,“预防组”即为石香薷水提物对新型冠状病毒的预防效果评价结果。具体实施方式下面结合附图和具体实施方式对专利技术的技术方案做进一步详细说明。实施例1本实施例中使用到的新型冠状病毒株ZJ001为浙江省疾病预防控制中心从2020年新冠肺炎患者标本中分离获得,病毒株经全序列基因测序,并由中国疾病预防控制中心确认。病毒滴度为105.5TCID50/0.1mL,保存于-80℃下备用。本实施例中采用Vero细胞(ATCC来源,实验中使用代数为P128-P135),Vero细胞能够支持新型冠状病毒株ZJ001繁殖。1、制备石香薷水提物称取石香薷药材(石香薷的干燥地上部分)100g,以水为溶剂,采用热回流提取法,对石香薷药材回流提取。首次提取时加30倍量的水回流提取1h,减压滤出提取液;而后再次加入20倍量的水对药渣再重复提取2次,减压滤出提取液;合并3次获得的提取液,浓缩至相当于含生药量为1g/ml,获得本实施例的石香薷水提物,于-20℃冷藏,备用。2、Vero细胞上药物最大无毒浓度(TC0)试验前,采用Vero细胞维持液(含2%胎牛血清)将石香薷水提物(浓度为1g/mL)分别稀释至20mg/mL,10mg/mL,5mg/mL,2.5mg/mL,1.25mg/mL后备用。将Vero细胞接种于24孔板中,待Vero细胞长成单层后,弃生长液,将各浓度梯度的石香薷水提物分别加入细胞中,添加量为1ml/孔,同时设置空白细胞对照;而后置37℃培养48h,观察细胞形态。以不引起细胞形态改变的最高浓度为药物的TC0。本试验中石香薷水提物在Vero细胞上的TC0为10mg/mL。3、石香薷水提物抗新型冠状病毒效果评价(1)石香薷水提物对新型冠状病毒的直接杀灭能力评价将10mg/mL的石香薷水提物与100TCID50/0.1mL的新型冠状病毒等体积混合,作为试验药物组;同时,将Vero细胞维持液与100TCID50/0.1mL的新型冠状病毒等体积混合,作为阴性对照组(即病毒对照组)。将试验药物组和阴性对照组的混合液分别至于37℃下孵育1h后,分别吸取0.2mL药物病毒混合液(即试验药物组)、维持液病毒混合液(即阴性对照组)加入长成单层的Vero细胞中,于37℃吸附1h后,弃上清(也就是病毒液),用PBS洗细胞两次(1ml/孔),再加入1mLVero细胞维持液,于37℃下培养48h;收获培养物,在-80℃下冻化1次,取200uL收获的培养液提取病毒RNA,采用荧光定量RT-PCR法检测,比较阴性对照组与试验药物组的病毒核酸水平。本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.石香薷(Mosla chinensis Maxim.)水提物在制备抗新型冠状病毒药中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.石香薷(MoslachinensisMaxim.)水提物在制备抗新型冠状病毒药中的应用。


2.如权利要求1所述的石香薷水提物在制备抗新型冠状病毒药中的应用,其特征在于,所述的石香薷水提物由以下方法制备获得:
以水为溶剂,采用热回流提取法对石香薷药材回流提取,滤出提取液;加入新溶剂重新对药渣回流提取至少一次,合并所有提取液,经浓缩获得所述的石香薷水提物。


3.如权利要求2所述的石香薷水提物在制备抗新型冠状病毒药中的应用,其特征在于,水与石香薷药材的质量比为30:1,回流提取1-2h。


4.石香薷水提物在制备预防新型冠状病毒药中的应用。


5.如权利要求4所述的石香薷水提物在制备预防新型冠状病毒药中的应用,其特征在于,所述的石香薷水提物由以下方法制备获得:
以水为溶剂,采用热回流提取法对石香薷药材回流提取,滤出提取液;加入新溶剂重新对药渣回流提取至少一次,合并所有提取液,经浓缩获得所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员:冯燕徐昌平卢亦愚高见葛琼茅海燕吴卓颖
申请(专利权)人:浙江省疾病预防控制中心
类型:发明
国别省市:浙江;33

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