本发明专利技术公开了一种检测新型冠状病毒的检测试剂盒，包括抗2019‑nCoV IgM反应结合物、抗2019‑nCoV IgG反应结合物、2019‑nCoV IGRAs反应结合物、抗2019‑nCoV IgM标记物、抗2019‑nCoV IgG标记物、2019‑nCoV IGRAs标记物等试剂。本发明专利技术的试剂盒联合抗2019‑nCoV IgM、抗2019‑nCoV IgG和2019‑nCoV IGRAs的检测结果，有助于2019‑nCoV急性感染期和复发期的早期辅助诊断，2019‑nCoV近期感染和远期感染的判断，以及2019‑nCoV感染者抗体未出现时的显性感染者和隐性感染者的辅助诊断。可以更简便、快速、准确检测确认阳性感染者，提高对新型冠状病毒核酸阴性疑似患者的检出率，对轻型或无症状新型冠状病毒肺炎恢复者的追踪。
【技术实现步骤摘要】
一种新型冠状病毒的检测试剂盒以及检测方法
本专利技术涉及生物医学检测
，尤其涉及一种新型冠状病毒的检测试剂盒以及检测方法。
技术介绍
新型冠状病毒(2019-nCoV)，冠状病毒是一个大型病毒家族，已知可引起感冒以及中东呼吸综合征(MERS)和严重急性呼吸综合征(SARS)等较严重疾病。新型冠状病毒是以前从未在人体中发现的冠状病毒新毒株。人感染了冠状病毒后常见体征有呼吸道症状、发热、咳嗽、气促和呼吸困难等。在较严重病例中，感染可导致肺炎、严重急性呼吸综合征、肾衰竭，甚至死亡。目前对于新型冠状病毒所致疾病没有特异治疗方法。目前，疑似病例，具备以下病原学证据之一者即可确诊：1.实时荧光RT-PCR检测新型冠状病毒核酸阳性；2.病毒基因测序，与已知的新型冠状病毒高度同源。目前核酸和病毒基因测序检测难度大，核酸检出率不高，目前核酸对于真实病例的检测率不过30％至50％，操作繁琐，新冠肺炎临床确诊慢，核酸假阴性是检测实验所面临的一个常见问题，与诸多试验因素相关，比如：不同的原材料供货方、生产工艺、研发人员能力、技术手段使用、患者病毒感染周期、样本类型选择、采样质量、取样过程、运送过程、核酸提取的纯度和得率以及实验操作因素等都会影响到核酸检测试剂的准确度。病毒抗原检测标本一般为上呼吸道标本，一般采用口咽拭子或鼻咽拭子进行取样，在发病初期具有良好的检测效果，但随病情的发展和治疗其检测阳性率有所下降，抗原检测试剂的敏感性受到抗体原料和标记物性能的影响极大，也受患者病毒感染周期、样本类型选择、采样质量和取样过程等因素影响，使不同厂家检测试剂的敏感性跨度较大，一般在20％～70％之间，并且在病毒载量较低时无法检测到目标病毒，检测阴性不能作为排除感染的诊断标准，且核酸检测只有当病毒仍然存在时，检测结果才会呈阳性。检测不能识别经历过感染、康复并清除了体内病毒的人。另外也报道了2019-nCoVIgM/IgG抗体可用作对新型冠状病毒核酸检测阴性疑似病例的补充检测指标或疑似病例诊断中与核酸检测协同使用，IgM抗体是初次体液免疫应答中最早出现的抗体，IgG抗体是血清和体液中含量最高的抗体，占血清总Ig的75％～80％，其亲和力高，在体内分布广泛，IgG抗体水平恢复期比急性期呈4倍或以上升高仅有回顾性诊断意义，一般在患者恢复期才大量产生，时效性差，IgG抗体无法作为病毒感染的早期诊断，对传染性极高新型冠状病毒2019-nCoV的诊断和防控毫无意义。而目前市面上的2019-nCoVIgM抗体检测采用间接法，受IgG抗体含量高的影响极大，造成敏感性低，检出率不高，且易受血样本中干扰因素的交叉反应的影响，容易造成假阳性。因此急需研制一种特异、敏感的2019-nCoV检测试剂，为目前的诊断手段提供补充。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：一种检测新型冠状病毒的检测试剂盒，包括抗2019-nCoVIgM反应结合液、抗2019-nCoVIgG反应结合液、2019-nCoVIGRAs反应结合液、抗2019-nCoVIgM标记物、抗2019-nCoVIgG标记物、2019-nCoVIGRAs标记物、抗2019-nCoVIgM样本稀释液、抗2019-nCoVIgG样本稀释液、抗2019-nCoVIgM阴性对照品、抗2019-nCoVIgM阳性对照品、抗2019-nCoVIgG低亲和力对照品、抗2019-nCoVIgG高亲和力对照品、2019-nCoVIGRAs校准品、2019-nCoVIGRAs空白培养管、2019-nCoVIGRAs测试培养管、2019-nCoVIGRAs阳性培养管、抗2019-nCoVIgG亲和力对照缓冲液、抗2019-nCoVIgG亲和力解离缓冲液。优选地，所述试剂盒还包括2019-nCoVIGRAs生物素化抗体。优选地，所述抗2019-nCoVIgM反应结合液中含有鼠抗人IgM单克隆抗体或2019-nCoV抗原。优选地，所述抗2019-nCoVIgG反应结合液中含有2019-nCoV抗原。优选地，所述2019-nCoV抗原为2019-nCoV的N蛋白、S蛋白、S1蛋白、RBD蛋白任意一种或其任一组合。优选地，所述2019-nCoV抗原为2019-nCoV的N蛋白和S1蛋白的组合。优选地，所述2019-nCoVIGRAs反应结合液中含有鼠抗人γ-干扰素单克隆抗体。优选地，所述抗2019-nCoVIgM标记物是2019-nCoVAg*抗2019-nCoV标记物或2019-nCoVAg-Mark*抗Mark标记物。所述2019-nCoVAg表示新型冠状病毒的抗原，“*”表示两者之间采用桥接方式连接，Mark为蛋白标签。或者，所述抗2019-nCoVIgM标记物是鼠抗人IgM单克隆抗体标记物。优选地，所述2019-nCoV抗原为2019-nCoV的N蛋白、S蛋白、S1蛋白、RBD蛋白任意一种或其任一组合。优选地，所述2019-nCoV抗原为2019-nCoV的N蛋白和S1蛋白的组合。优选地，所述Mark为myc标签、HA标签、Flag标签、His标签或GST标签中的任意一种；相对应的抗Mark标记物为抗myc、抗HA、抗Flag、抗His或抗GST中的任意一种。优选地，所述抗2019-nCoVIgG标记物为鼠抗人IgG单克隆抗体标记物。优选地，所述2019-nCoVIGRAs标记物为鼠抗人γ-干扰素单克隆抗体标记物或是链霉亲和素标记物。优选地，所述抗2019-nCoVIgM样本稀释液是含有抗人IgG、酪蛋白、小牛血清的Tris-HCl缓冲液；更优选地，是含有抗人IgG、酪蛋白和小牛血清的Tris-HCl缓冲液。优选地，所述抗2019-nCoVIgG样本稀释液是含有酪蛋白、小牛血清的Tris-HCl缓冲液；更优选地，是含有酪蛋白和小牛血清的Tris-HCl缓冲液。优选地，所述抗2019-nCoVIgM阴性对照品为人阴性混合血清。优选地，所述抗2019-nCoVIgM阳性对照品为抗2019-nCoVIgM阳性血清。优选地，所述抗2019-nCoVIgG低亲和力对照品为抗2019-nCoVIgG低亲和力血清。优选地，所述抗2019-nCoVIgG高亲和力对照品为抗2019-nCoVIgG高亲和力血清。优选地，所述2019-nCoVIGRAs校准品为不同浓度的γ-干扰素。优选地，所述2019-nCoVIGRAs空白培养管中不添加任何刺激抗原。优选地，所述2019-nCoVIGRAs测试培养管中以2019-nCoVAg作为测试刺激抗原。优选地，所述2019-nCoVIGRAs阳性培养管中以植物血凝素作为阳性刺激抗原。优选地，所述抗2019-nCoVIgG亲和力对照缓冲液为含有牛血清白蛋白的Tris-HCl缓冲液。优选地，所述抗2019-nCoVIgG亲和力解离缓冲液为含有尿素的Tris-HCl缓冲液。本发本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种检测新型冠状病毒的检测试剂盒，其特征在于，包括抗2019-nCoV IgM反应结合物、抗2019-nCoV IgG反应结合物、2019-nCoV IGRAs反应结合物、抗2019-nCoV IgM标记物、抗2019-nCoV IgG标记物、2019-nCoV IGRAs标记物、抗2019-nCoV IgM样本稀释液、抗2019-nCoV IgM阴性对照品、抗2019-nCoV IgM阳性对照品、抗2019-nCoV IgG低亲和力对照品、抗2019-nCoV IgG高亲和力对照品、2019-nCoV IGRAs校准品、2019-nCoV IGRAs空白培养管、2019-nCoV IGRAs测试培养管、2019-nCoV IGRAs阳性培养管、抗2019-nCoV IgG亲和力对照缓冲液、抗2019-nCoV IgG亲和力解离缓冲液。/n
【技术特征摘要】
1.一种检测新型冠状病毒的检测试剂盒，其特征在于，包括抗2019-nCoVIgM反应结合物、抗2019-nCoVIgG反应结合物、2019-nCoVIGRAs反应结合物、抗2019-nCoVIgM标记物、抗2019-nCoVIgG标记物、2019-nCoVIGRAs标记物、抗2019-nCoVIgM样本稀释液、抗2019-nCoVIgM阴性对照品、抗2019-nCoVIgM阳性对照品、抗2019-nCoVIgG低亲和力对照品、抗2019-nCoVIgG高亲和力对照品、2019-nCoVIGRAs校准品、2019-nCoVIGRAs空白培养管、2019-nCoVIGRAs测试培养管、2019-nCoVIGRAs阳性培养管、抗2019-nCoVIgG亲和力对照缓冲液、抗2019-nCoVIgG亲和力解离缓冲液。
2.如权利要求1所述的新型冠状病毒的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括2019-nCoVIGRAs生物素化抗体。
3.如权利要求1所述的新型冠状病毒的检测试剂盒，其特征在于，所述抗2019-nCoVIgM反应结合物中含有鼠抗人IgM单克隆抗体或2019-nCoV抗原；所述抗2019-nCoVIgG反应结合物中含有2019-nCoV抗原；所述2019-nCoVIGRAs反应结合物中含有鼠抗人γ-干扰素单克隆抗体。
4.如权利要求3所述的新型冠状病毒的检测试剂盒，其特征在于，所述2019-nCoV抗原为2019-nCoV的N蛋白、S蛋白、S1蛋白、RBD蛋白任意一种或其任一组合。
5.如权利要求4所述的新型冠状病毒的检测试剂盒，其特征在于，所述2019-nCoV抗原为2019-nCoV的N蛋白和S1蛋白的组合。
6.如权利要求1所述的新型冠状病毒的检测试剂盒，其特征在于，所述
抗2019-nCoVIgM标记物是2019-nCoVAg*抗2019-nCoV标...
【专利技术属性】
技术研发人员：谭玉华，冯建明，
申请(专利权)人：广州市丰华生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44
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