泥鳅肌原纤维蛋白质的高效提取方法技术

本发明专利技术涉及泥鳅肌原纤维蛋白质的高效提取方法，属于水产品加工技术领域。该方法包括以下步骤：从新鲜活泥鳅中取肉，用自来水清洗至少三遍。向泥鳅肉中加入低离子强度的冷的磷酸盐缓冲溶液，高速匀浆并在高压微射流技术下进行处理，之后将料液离心，取沉淀，上述步骤至少重复三次。然后向沉淀中加入高离子强度的冷的磷酸盐缓冲溶液，高速匀浆并在高压微射流技术下进行处理，之后利用采用循环超滤膜系统将料液进行浸提浓缩，最后离心取上清液得肌原纤维蛋白质溶液。该技术提取时间短、提取效率和得率高，且蛋白质纯度高、稳定性好。

【技术实现步骤摘要】
泥鳅肌原纤维蛋白质的高效提取方法
本专利技术属于水产品加工
，尤其是涉及泥鳅肌原纤维蛋白质的高效提取方法。
技术介绍
我国水域广阔，渔业资源丰富，自上世纪80年代以来，水产品总产量迅速增长，中国已成为世界第一渔业大国。泥鳅是一种蛋白质含量高且脂质含量较低的小型鱼类，广泛分布在我国各地天然淡水区域内，营养价值丰富，有独特的风味。泥鳅含有丰富的蛋白质，容易被人体消化吸收，能满足人体必需的氨基酸、矿物质等营养物质；鱼肉中蛋白质营养较完全，肌原纤维蛋白功能性好。肌原纤维蛋白质是是一类具有重要生物学功能的结构蛋白质群，它是由肌球蛋白、肌动蛋白、肌动球蛋白以及被称为调节蛋白的原肌球蛋白、肌钙蛋白所组成的复合体，约占总蛋白含量的50％～55％；又被称为盐溶性蛋白，易溶于高离子强度的盐溶液中，是肌肉中含量最多、性质最重要的蛋白质，也是很多鱼肉制品的必要组分和加工原料。肌原纤维蛋白质的作用除了参与肌肉的收缩、影响肌肉的嫩度外，还与肉制品的流变学特性如黏结性、保水性、弹性、质地等有着密切的关系。加强对肌肉中肌原纤维蛋白质的研究，才能在加工过程中控制好影响其成胶的因素，进而提高肉制品的品质和质构，为消费者提供满意的肉食制品。目前，国内外对泥鳅肌原纤维蛋白质的研究尚少，使得泥鳅制品的深加工受限。现有的泥鳅肌原纤维蛋白质的提取方法存在提取率低、蛋白质不稳定等缺点，因此需要进一步改进。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供泥鳅肌原纤维蛋白质的高效提取方法，具体技术方案是：从新鲜活泥鳅中取肉，用自来水清洗至少三遍。向泥鳅肉中加入低离子强度的冷的磷酸盐缓冲溶液，高速匀浆并在高压微射流技术下进行处理，之后将料液离心，取沉淀，上述步骤至少重复三次。然后向沉淀中加入高离子强度的冷的磷酸盐缓冲溶液，高速匀浆并在高压微射流技术下进行处理，之后采用循环超滤膜系统将料液进行浸提浓缩，最后离心取上清液得肌原纤维蛋白质溶液。本专利技术提供的泥鳅肌原纤维蛋白质的高效提取方法包括以下步骤：(1)以泥鳅为原料，去尾，置于冷水中放血，然后去头、去内脏，洗净后采肉；(2)用自来水清洗泥鳅肉至少三遍，加4～6倍体积冷的(4℃)低离子强度的磷酸盐缓冲溶液，在匀浆机中高速匀浆3～5min，在6.89×107～10.34×107Pa下高压微射流处理，得到的匀浆液在8000～9000rpm、0～4℃条件下离心15～20min后取沉淀，重复上述步骤至少3次；(3)然后向沉淀中加入4～6倍体积冷的(4℃)高离子强度的50mmol/L的磷酸盐缓冲溶液(含0.6mol/LNaCl，pH值为7.0)，在转速为8000～10000rpm的匀浆机中高速匀浆30～60s，在6.89×107～10.34×107Pa下高压微射流处理；(4)将料液置于带有过滤网及搅拌装置的料罐A中，用泵将粗滤后的料液抽入带有超滤膜的料罐B中，被超滤膜截留下来的即浓缩后的蛋白液，透过超滤膜的即透过液，并将透过液循环回A罐中；之后将截留液在8000～9000rpm、0～4℃条件下离心15～20min，取上清得肌原纤维蛋白质溶液。本专利技术的优点及效果：本专利技术基于肌原纤维蛋白质是一种盐溶性蛋白质的原理，应用缓冲溶液浸提离心的方法，协同高压微射流技术、膜技术来提取泥鳅肌原纤维蛋白质，主要有以下四个优点：(1)提取时间短。采用高压微射流技术，可以将组织细胞破碎，强化分子运动，有效提高提取液与蛋白质的接触程度；采用循环超滤膜系统分离肌原纤维蛋白质，使溶剂返回浸提原料中的肌原纤维蛋白时浓度差增大，从而使浸提速度高于常规方法，浸提时间缩短。(2)提取效率高。在相同的时间内提高蛋白质的产率。(3)蛋白质纯度高。集提取、浓缩、分离技术于一体，可以一步得到高纯度的蛋白质。(4)蛋白质更加稳定、不易变性。提取过程在低温下进行，且处理条件温和。具体实施方式为了理解本专利技术，下面通过具体的实施例对本专利技术作进一步说明，需要说明的是下述仅为本专利技术的较佳实施例而已，并不用以限制本专利技术，凡在本专利技术的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。实施例一泥鳅肌原纤维蛋白质的高效提取方法是以泥鳅为原料，去尾，置于冷水中放血，然后去头、去内脏，洗净后采肉。提取步骤如下：(1)用自来水清洗泥鳅肉三遍后，加4倍体积冷的(4℃)50mmol/L磷酸盐缓冲溶液(0.1mol/LNaCl、1mmol/LEDTA、2mmol/LMgCl2，pH值为7.0)，在匀浆机中高速匀浆3min(8000rpm，匀30s，停30s)。在8.96×107Pa下高压微射流处理，得到的匀浆液在8000r/min、4℃条件下离心15min后取沉淀，重复上述步骤共提取3次；(2)然后向沉淀中加入4倍体积冷的(4℃)50mmol/L的磷酸盐缓冲溶液(0.6mol/LNaCl，pH值为7.0)，在匀浆机中高速匀浆30s(8000rpm)，在8.96×107Pa下高压微射流处理；(3)将料液置于带有过滤网及搅拌装置的料罐A中，用泵将粗滤后的料液抽到带有超滤膜(分子量为10kD)的料罐B中，被超滤膜截留下来的即浓缩后的蛋白液，透过超滤膜的即透过液，并将透过液循环回A罐中(环境温度为4℃)；之后在8000rpm、4℃条件下离心15min，取上清得肌原纤维蛋白质溶液，并于4℃条件下保存。实施例二泥鳅肌原纤维蛋白质的高效提取方法是以泥鳅为原料，去尾并置于冷水中放血，然后去头、去内脏，洗净后采肉。提取步骤如下：(1)用自来水清洗泥鳅肉三遍后，加4倍体积冷的(4℃)50mmol/L磷酸盐缓冲溶液(0.1mol/LNaCl、1mmol/LEDTA、2mmol/LMgCl2，pH值为7.0)，在匀浆机中高速匀浆3min(8000rpm，匀30s，停30s)。在6.89×107Pa下高压微射流处理，得到的匀浆液在8500r/min、4℃条件下离心20min后取沉淀，重复上述步骤共提取3次；(2)然后向沉淀中加入6倍体积冷的(4℃)50mmol/L的磷酸盐缓冲溶液(0.6mol/LNaCl，pH值为7.0)，在匀浆机中高速匀浆30s(8000rpm)，在6.89×107Pa下高压微射流处理；(3)将料液置于带有过滤网及搅拌装置的料罐A中，用泵将粗滤后的料液抽到带有超滤膜(分子量为10kD)的料罐B中，被超滤膜截留下来的即浓缩后的蛋白液，透过超滤膜的即透过液，并将透过液循环回A罐中(环境温度为4℃)；之后在8500rpm、4℃条件下离心20min，取上清得肌原纤维蛋白质溶液，并于4℃条件下保存。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.泥鳅肌原纤维蛋白质的高效提取方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)以泥鳅为原料，去尾，置于冷水中放血，然后去头、去内脏，洗净后采肉；/n(2)用自来水清洗泥鳅肉至少三遍，加4～6倍体积冷的(4℃)低离子强度的磷酸盐缓冲溶液，在匀浆机中高速匀浆3～5min，在6.89×10

【技术特征摘要】
1.泥鳅肌原纤维蛋白质的高效提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)以泥鳅为原料，去尾，置于冷水中放血，然后去头、去内脏，洗净后采肉；
(2)用自来水清洗泥鳅肉至少三遍，加4～6倍体积冷的(4℃)低离子强度的磷酸盐缓冲溶液，在匀浆机中高速匀浆3～5min，在6.89×107～10.34×107Pa下高压微射流处理，得到的匀浆液在8000～9000rpm、0～4℃条件下离心15～20min后取沉淀，重复上述步骤至少3次；
(3)然后向沉淀中加入4～6倍体积冷的(4℃)高离子强度的50mmol/L的磷酸盐缓冲溶液(含0.6mol/LNaCl，pH值为7.0)，在转速为8000～10000rpm的匀浆机中高速匀浆30～60s，在6.89×107～10.34×107Pa下高压微射流处理；
(4)将料液置于带有过滤网及搅拌装置的料罐A中，用泵...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡爱军，于辉，郑捷，
申请(专利权)人：天津科技大学，
类型：发明
国别省市：天津;12