一组早期食管癌和高危人群筛查标志物及相关联检卡制造技术

本发明专利技术属于生物工程及生物医药技术领域，具体涉及自身抗体工程及肿瘤学领域，更具体涉及一组早期食管鳞状细胞癌筛查标志物、标志物特异性检测试剂的应用以及由相关特异性检测试剂制备而成的联检卡。该分子标志物包括HNMT自身抗体，CARD18自身抗体和PCMTD1自身抗体，本发明专利技术还提供了一种上述分子标志物的特异性检测试剂在制备早期食管鳞状细胞癌筛查试剂盒、试纸条或检测卡中的应用。所制备的早期食管鳞状细胞癌筛查联检卡的检测对象为血清样品，通过采集患者血清利用本发明专利技术联检卡即可对高危人群进行早期食管鳞状细胞癌的快速筛查，并且本发明专利技术联检卡对早期食管鳞状细胞癌的具有较高的检测敏感度和特异度。

【技术实现步骤摘要】
一组早期食管癌和高危人群筛查标志物及相关联检卡
本专利技术属于生物工程及生物医药
，具体涉及自身抗体工程及肿瘤学领域，更具体涉及一组早期食管鳞状细胞癌筛查标志物、标志物特异性检测试剂的应用以及由相关特异性检测试剂制备而成的联检卡。
技术介绍
食管鳞状细胞癌是全球最常见的恶性肿瘤之一，死亡率位居第六位，全球每年新发约50万例食管鳞状细胞癌患者中一半以上发生在中国，比西方国家食管鳞状细胞癌发病率高100倍。中西方食管鳞状细胞癌的组织学类型和流行性特征明显不同导致中西方学者关注的科学问题和研究思路明显不同，研究成果相互借鉴和共享困难。食管鳞状细胞癌预后极差，中晚期食管鳞状细胞癌患者5年生存率仅15%左右，而早期食管鳞状细胞癌患者的5年生存率为90%左右。尽管早期食管鳞状细胞癌5年生存率明显高于中晚期，但临床上首次确诊的患者中，早期癌仅占5%左右。因此提高早期食管鳞状细胞癌的诊断率极其重要。由于食管鳞状细胞癌患者在早期阶段缺乏明显的特异症状，并且缺乏适宜大范围高危人群筛查的经济、高效和敏感的生物标志物，导致目前临床上就诊的食管鳞状细胞癌患者在确诊时多已为中晚期阶段。食管鳞状细胞癌早期发现，是提高食管鳞状细胞癌患者生存率的有效手段，因此筛选高效、特异的食管鳞状细胞癌分子标志物对于食管鳞状细胞癌患者的早期发现、早期筛查尤为重要，也是亟待解决的问题。专利技术人所在研究机构35年来搜集了30余万例食管鳞状细胞癌患者相关信息，利用分子机制筛选食管鳞状细胞癌特异标志物，建立高危人群和食管鳞状细胞癌早期发现的分子标志物筛查体系，并在此基础上进行分子标志物筛选，同时结合专利技术人所在研究机构近期开展的一项研究，采用蛋白质微阵列芯片技术，对一万余例食管鳞状细胞癌患者以及健康志愿者的外周血进行配对研究，发现了数种与食管鳞状细胞癌的发生有关的自身抗体，并从中筛选出了HNMT自身抗体、CARD18自身抗体、PCMTD1自身抗体这3种与食管鳞状细胞癌早期病变有关的自身抗体作为早期诊断指标，对于提高早期食管鳞状细胞癌的发现率，降低食管鳞状细胞癌的死亡率具有重要意义。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题和不足，本专利技术的目的在于提供了一组早期食管鳞状细胞癌筛查标志物特异性检测试剂的应用，以及由相关特异性检测试剂制备而成的联检卡。基于上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术提供了能够特异性检测HNMT、CARD18和PCMTD1或该组基因自身抗体的检测试剂在早期食管鳞状细胞癌筛查试剂盒、试纸条或检测卡中的应用。根据上述应用，优选地，检测试剂包括检测HNMT自身抗体是否表达的分子，检测CARD18自身抗体是否表达的分子和检测PCMTD1自身抗体是否表达的分子。根据上述应用，优选地，检测HNMT自身抗体是否表达的分子为能够与HNMT自身抗体特异性结合的HNMT自身抗体的抗体；检测CARD18自身抗体是否表达的分子为能够与CARD18自身抗体特异性结合的CARD18自身抗体的抗体；检测PCMTD1自身抗体是否表达的分子为与PCMTD1自身抗体特异性结合的PCMTD1自身抗体的抗体。根据上述应用，优选地，早期食管鳞状细胞癌筛查试剂盒、试纸条或检测卡的检测对象为血清样品。本专利技术还提供了一种用于早期食管鳞状细胞癌筛查的三联检测卡，该三联检测卡上含有检测HNMT自身抗体、CARD18自身抗体和PCMTD1自身抗体的特异性检测试剂。根据上述用于早期食管鳞状细胞癌筛查的三联检测卡，优选地，检测试剂包括检测HNMT自身抗体是否表达的分子，检测CARD18自身抗体是否表达的分子和检测PCMTD1自身抗体是否表达的分子。根据上述用于早期食管鳞状细胞癌筛查的三联检测卡，优选地，检测HNMT自身抗体是否表达的分子为能够与HNMT自身抗体特异性结合的HNMT自身抗体的抗体；检测CARD18自身抗体是否表达的分子为能够与CARD18自身抗体特异性结合的CARD18自身抗体的抗体；检测PCMTD1自身抗体是否表达的分子为能够与PCMTD1自身抗体特异性结合的PCMTD1自身抗体的抗体。根据上述用于早期食管鳞状细胞癌筛查的三联检测卡，优选地，三条胶体金试纸条结构相同，包括沿长度方向上依次铺设在底板上的样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸收垫，所述硝酸纤维素膜上设有检测线和质检线，质检线设置在检测线与吸收垫之间；胶体金垫上吸附有能够与待检自身抗体特异性结合的、胶体金标记的抗体A，检测线位置固定有能够与待检自身抗体特异性结合的抗体B，抗体A和抗体B分别与自身抗体的不同位点进行结合反应；质检线位置上固定有能够与抗体A特异性结合的二抗。根据上述用于早期食管鳞状细胞癌筛查的三联检测卡，优选地，抗体A包括抗HNMT自身抗体的单克隆抗体、抗CARD18自身抗体的单克隆抗体和抗PCMTD1自身抗体的单克隆抗体；抗体B包括抗HNMT自身抗体的多克隆抗体、抗CARD18自身抗体的多克隆抗体和抗PCMTD1自身抗体的多克隆抗体；二抗为抗抗体A的多克隆抗体。本专利技术提供了一种能够特异性检测HNMT自身抗体的检测试剂在早期食管鳞状细胞癌筛查试剂盒、试纸条或检测卡中的应用。本专利技术提供了一种能够特异性检测CARD18自身抗体的检测试剂在早期食管鳞状细胞癌筛查试剂盒、试纸条或检测卡中的应用。本专利技术提供了一种能够特异性检测PCMTD1自身抗体的检测试剂在早期食管鳞状细胞癌筛查试剂盒、试纸条或检测卡中的应用。与现有技术相比，本专利技术的有益效果如下：（1）本专利技术提供了能够特异性检测HNMT自身抗体、CARD18自身抗体和PCMTD1自身抗体的检测试剂，并提供了一种快速检测上述自身抗体的三联检测卡，通过三联检测卡快速能够对高危人群进行早期食管鳞状细胞癌的快速筛查。（2）本专利技术三联检测卡采用三种自身抗体的特异性检测试剂联合用于对早期食管鳞状细胞癌进行快速筛查，相对于单一自身抗体的特异性检测试剂对早期食管鳞状细胞癌的筛查，本专利技术三联检测卡采用三种自身抗体的特异性检测试剂联合用于对食管鳞状细胞癌的筛查同时具备较高的敏感度和特异度，对早期食管鳞状细胞癌的检测敏感度达74.39%，特异度达86.18%。（3）本专利技术三联检测卡具有微创、易于检测、结果易于判定的优势，通过对待测对象血清中的HNMT自身抗体、CARD18自身抗体和PCMTD1自身抗体进行联合检测，提高了对早期食管鳞状细胞癌筛查的敏感性和特异性，适用于食管鳞状细胞癌高发区无症状人群的大规模筛查，从而对高危人群进行早期食管鳞状细胞癌的早期评估和诊断，方便易行。附图说明图1为本专利技术实施例1三联检测卡的结构示意图；图2为本专利技术实施例1胶体金试纸条的铺设结构及工作原理图；图3为HNMT自身抗体、CARD18自身抗体、PCMTD1自身抗体的特异性检测试剂单独用于早期食管鳞状细胞癌患者筛查诊断的ROC曲线图；图4为HNMT自身抗体、CARD18自身抗体、PCMTD1自身抗体的特异性检测试剂联合用于早期食管鳞状细胞癌患者筛查诊断的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.能够特异性检测HNMT、CARD18和PCMTD1或该组基因自身抗体的检测试剂在早期食管鳞状细胞癌筛查试剂盒、试纸条或检测卡中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.能够特异性检测HNMT、CARD18和PCMTD1或该组基因自身抗体的检测试剂在早期食管鳞状细胞癌筛查试剂盒、试纸条或检测卡中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测试剂包括检测HNMT自身抗体是否表达的分子，检测CARD18自身抗体是否表达的分子和检测PCMTD1自身抗体是否表达的分子。


3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述检测HNMT自身抗体是否表达的分子为能够与HNMT自身抗体特异性结合的HNMT自身抗体的抗体；所述检测CARD18自身抗体是否表达的分子为能够与CARD18自身抗体特异性结合的CARD18自身抗体的抗体；所述检测PCMTD1自身抗体是否表达的分子为能够与PCMTD1自身抗体特异性结合的PCMTD1自身抗体的抗体。


4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述早期食管鳞状细胞癌筛查试剂盒、试纸条或检测卡的检测对象为血清样品。


5.一种用于早期食管鳞状细胞癌筛查的三联检测卡，其特征在于，所述三联检测卡含有能够检测HNMT自身抗体、CARD18自身抗体和PCMTD1自身抗体的特异性检测试剂。


6.根据权利要求5所述用于早期食管鳞状细胞癌筛查的三联检测卡，其特征在于，所述检测试剂包括检测HNMT自身抗体是否表达的分子，检测CARD18自身抗体是否表达的分子和检测PCMTD1自身抗体是否表达的分子。


7.根据权利要求6所述用于早期食管鳞状细胞癌筛查的三联检测卡，其特征在于，所述检测HNMT自身抗体是否表达的分子为能够与HNMT自...

【专利技术属性】
技术研发人员：王立东，赵学科，李欣然，宋昕，范宗民，王苒，李贝，韩雪娜，靳艳，杨苗苗，孟超龙，
申请(专利权)人：郑州大学第一附属医院，
类型：发明
国别省市：河南;41