一种植物多酚的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种植物多酚的制备方法，包括以下步骤：S1将植物原料在复合酶的作用下，用一定量的溶剂超声或加热提取，收集提取液；S2向步骤S1的提取液中加入天然澄清剂进行澄清处理后过滤，收集滤液；S3将步骤S2的滤液用吸附树脂柱层析进行纯化；S4将纯化后的滤液进行超滤，然后纳滤，所得纳滤截留液去除溶剂后，即得植物多酚。该方法特别适合各种植物鞣质、黄烷醇、黄酮苷元、酚酸等不含糖基的多酚类成分的提取纯化，而制备含有糖基的多酚(如黄酮苷、二苯乙烯苷)得率较低。制备方法包括复合酶辅助提取、澄清、柱层析、超滤、纳滤五个步骤。利用本发明专利技术所述方法制备的植物多酚纯度高、颜色浅、稳定性好。

【技术实现步骤摘要】
一种植物多酚的制备方法
本专利技术涉及植物有效成分的提取技术，属于植物提取
，具体涉及一种植物多酚的制备方法，尤其涉及一种植物多酚的提取、纯化方法。
技术介绍
广义的植物多酚是存在于植物体内、含有多元酚羟基结构的化学成分的总称，包括鞣质(也叫做单宁，分为缩合单宁和水解单宁)、黄酮、黄烷醇、芪类、酚酸等成分。植物多酚具有抗氧化、抗衰老、抑菌、抗病毒、抗癌等多种生理活性，已广泛应用于医药、保健食品和化妆品等领域。尤其在日用化妆品领域，因植物多酚能够有预防或效缓解紫外线照射引起的各种皮肤问题(如光老化、皮肤损伤、变黑、过敏等)，越来越多的护肤品将其作为一种重要的功能性原料。常见的富含植物多酚的护肤品原料有茶多酚、葡萄籽提取物、金缕梅提取物、芦荟提取物、银杏叶提取物等。目前，植物多酚常规的制备方法是植物原料用一定的方法提取后，提取液经简单地离心除杂质或大孔树脂柱层析后回收溶剂，如专利文献CN105348331A、CN109691673A和CN103585207A公开的方法。常规方法制备的植物多酚纯度不够高、稳定性差，尤其是植物多酚的水溶液，容易变色、析出沉淀，严重影响植物多酚在日用化妆品领域的应用范围。膜分离技术是采用具有选择性分离功能的无机或高分子材料为分离介质,借助外界能量的推动,对气体或液体组分进行分离、分级和富集的技术。植物提取液在一定压力下流经膜表面时，小分子物质透过薄膜，大分子物质被截留，从而实现大小分子的分离。在植物提取中，膜分离技术常用于脱色、脱盐、富集有效部位(如纯化多糖、单宁)。r>
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对现有技术的不足，提供一种植物多酚的制备方法。利用本专利技术所述方法制备的植物多酚纯度高、颜色浅、稳定性好。本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的：本专利技术提供了一种植物多酚的制备方法，制备方法包括以下步骤：S1将植物原料在复合酶的作用下，用一定量的溶剂超声或加热提取，收集提取液；S2向步骤S1的提取液中加入天然澄清剂进行澄清处理后过滤，收集滤液；S3将步骤S2的滤液用吸附树脂柱层析进行纯化；S4将纯化后的滤液进行超滤，然后纳滤，所得纳滤截留液去除溶剂后，即得植物多酚。优选地，步骤S1中，所述复合酶选自纤维素酶和果胶酶，所述复合酶的加入量为2.1-5.5g/kg植物原料干重；所述纤维素酶和果胶酶的重量比为2-5:0.1-0.5。优选地，所述纤维素酶活力≥30U/mg，果胶酶活力60000U/ml。优选地，步骤S1中，所述溶剂为水或醇，溶剂的用量为植物原料干重的5-20倍量；所述醇的浓度不高于50％。优选地，步骤S1中，所述加热提取时的提取温度不高于50℃，提取1-3次，每次0.5-2小时；所述超声提取时的温度30-50℃，提取时间10-40分钟。优选地，步骤S2中，所述的澄清剂为II型ZTC1+1天然澄清剂(按说明书配制)，澄清剂用量为提取液体积的1％-10％。本专利技术采用的澄清剂对不同分子量的蛋白、胶体有很好的絮凝效果，一方面降低提取液的黏度，易于过滤(提取植物的果实时表现出的优势尤为明显)；另一方面可大大降低植物多酚产品里小分子蛋白的残留量，使植物多酚(尤其是鞣质类多酚)的溶液更稳定。不用澄清剂处理时，制备的皱皮木瓜总多酚，水溶液放置10天左右会有微量的沉淀析出。更优选地，所述澄清剂用量为提取液体积的2％-6％。使用的澄清剂对鞣质也有絮凝作用，为保证总多酚的高得率，最优选澄清剂用量为2％-4％。优选地，所述加入澄清剂进行澄清处理的具体步骤为：先向提取液中加入IIB型澄清剂，搅拌均匀后再加入等量的IIA型澄清剂，再次搅拌均匀，室温下静置4-6小时。优选地，步骤S3中，所述吸附树脂层析柱中采用的树脂填料选自大孔吸附树脂、离子交换树脂和聚酰胺中的至少一种。更优选地，所述树脂填料选自大孔吸附树脂和聚酰胺中的至少一种，所述大孔吸附树脂选自AB-8、D-101、DM-301、及HPD-100型大孔吸附树脂中的一种。最优选所述树脂填料为聚酰胺。利用聚酰胺进行柱层析时，植物提取液可直接加样于聚酰胺填料中，不需要除去溶液里面的醇，工艺简单。所述吸附树脂层析柱进行纯化时采用的洗脱液为小分子醇与水按不同比例组成的溶液。所述小分子醇选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、乙二醇、丙二醇和丁二醇，小分子醇与水的比例为0:1-9:1(v/v)。优选地，步骤S3中，所述吸附树脂层析柱进行纯化时采用的洗脱液中含有质量含量为0.05％-2％的碱性物质，更优选含量为0.1％-1.5％，最优选0.2％-0.6％。加入碱性物质可提高植物多酚的得率。所述的碱性物质选自氢氧化钠、氢氧化钾、氨水和尿素中的至少一种，更优选碱性物质选自氨水和尿素中的至少一种；更优选尿素。本专利技术发现，利用含尿素的洗脱液制备的植物多酚，尤其是鞣质类的多酚，经超滤和纳滤后水溶液的稳定性最好，可能是因为尿素的氢键破坏作用能够防止鞣质分子聚集。本专利技术采用层析柱的创新之处还在于：优选利用聚酰胺制备高纯度的多酚。聚酰胺常用来去除多酚(尤其是鞣质)，未见有专利文献报道用聚酰胺制备多酚。用聚酰胺制备多酚，所得产品的纯度比常规的大孔树脂层析法纯度高。优选地，步骤S4中，所述超滤采用的滤膜的截留分子量为3K-30K道尔顿，更优选滤膜的截留分子量为5K-10K道尔顿；所述超滤在0.05-0.2Mpa的压力下进行直至超滤截留液/超滤滤过液的体积为1:5-1:10(v/v)时，收集超滤滤过液。优选地，步骤S4中，所述纳滤采用的滤膜的截留分子量为200道尔顿，纳滤将溶液浓缩至原体积的1/3左右，收集截留液。优选地，所述植物多酚包括鞣质、黄酮、黄烷醇、芪类、酚酸中的至少一种。现有技术相比，本专利技术具有如下的有益效果：1、本专利技术提供了一种植物多酚的制备方法，提取过程中使用纤维素酶破坏植物细胞的细胞壁，提高有效成分的提取率，利用果胶酶酶解提取液中的果胶类成分，降低提取液的黏度，利于后处理。2、与常规方法相比，本专利技术通过采用树脂填料尤其是聚酰胺柱色谱尿素洗脱法制备的植物多酚纯度高，福林酚比色法测得的总多酚含量大于95％；超滤联合纳滤技术将色素、大分子物质和金属离子去除后，植物多酚颜色更浅、稳定性更好。利用本专利技术所述方法制备的植物多酚，水溶液室温避光放置3个月不变色，无沉淀析出。3、本专利技术所述的方法工艺简单，可实现工业化生产，适合各种植物中鞣质、黄烷醇、黄酮苷元、酚酸等不含糖基的多酚类成分的提取纯化，而不适和制备含有糖基的多酚(如黄酮苷、二苯乙烯苷)，其得率较低。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本专利技术，但不以任何形式限制本专利技术。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术构思的前提下，还可以做出若干变形和改进。这些都属于本专利技术的保护范围。在本专利技术实施例中，若非特指，所有设本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种植物多酚的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1将植物原料在复合酶的作用下，用一定量的溶剂超声或加热提取，收集提取液；/nS2向步骤S1的提取液中加入天然澄清剂进行澄清处理后过滤，收集滤液；/nS3将步骤S2的滤液用吸附树脂柱层析进行纯化；/nS4将纯化后的滤液进行超滤，然后纳滤，所得纳滤截留液去除溶剂后，即得植物多酚。/n

【技术特征摘要】
1.一种植物多酚的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1将植物原料在复合酶的作用下，用一定量的溶剂超声或加热提取，收集提取液；
S2向步骤S1的提取液中加入天然澄清剂进行澄清处理后过滤，收集滤液；
S3将步骤S2的滤液用吸附树脂柱层析进行纯化；
S4将纯化后的滤液进行超滤，然后纳滤，所得纳滤截留液去除溶剂后，即得植物多酚。


2.根据权利要求1所述的植物多酚的制备方法，其特征在于，步骤S1中，所述复合酶选自纤维素酶和果胶酶，所述复合酶的加入量为2.1-5.5g/kg植物原料干重，所述纤维素酶和果胶酶的重量比为2-5:0.1-0.5。


3.根据权利要求1所述的植物多酚的制备方法，其特征在于，步骤S1中，所述溶剂为水或醇，溶剂的用量为植物原料干重的5-20倍量；所述醇的浓度不高于50％。


4.根据权利要求1所述的植物多酚的制备方法，其特征在于，步骤S1中，所述加热提取时的提取温度不高于50℃，提取1-3次，每次0.5-2小时；
所述超声提取时的温度30-50℃，提取时...

【专利技术属性】
技术研发人员：辛英祥，王新亮，马毅刚，齐秋月，周利丹，刘青，卢伊娜，
申请(专利权)人：上海珈凯生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31