一种检测降糖类保健品中磺脲类药物成分的方法技术

本发明专利技术公开了一种检测降糖类保健品中磺脲类药物成分的方法，包括步骤a，待测样品制备；步骤b，第一待测液制备；步骤c，第一中间体制备；步骤d，第二中间体制备；步骤e，重氮偶合反应。本发明专利技术将样品中的磺脲类药物成分通过反应转化为含有磺酰胺基的第二中间体，第二中间体的磺酰胺基可以与亚硝酸盐和对氨基苯磺酸发生重氮偶合反应，生成深红色或深紫色的偶氮化合物。本发明专利技术方法在不使用大型仪器的情况下，通过反应颜色变化，可以准确检测降糖类保健品中是否含有磺脲类药物成分，特异性强，无干扰反应，灵敏度高，反应时间短，操作简便，试剂使用量少，检测成本低，检测准确度高，对实验环境要求低，适用于大批量对降糖类保健品进行快速检测。

【技术实现步骤摘要】
一种检测降糖类保健品中磺脲类药物成分的方法
本专利技术涉及检测领域，特别是涉及一种检测降糖类保健品中磺脲类药物成分的方法。
技术介绍
磺脲类药物是一个成员众多的大家族，近年来，不断有新的品种，如格列美脲和新剂型，如格列吡嗪控释片、格列齐特缓释片面世。临床应用较多的是第二代和第三代磺脲类药物，第一代已基本被淘汰。但是现在在降糖类保健品中非法添加磺脲类药物成分的现象比较严重，对消费者的身体健康存在很大隐患。目前商业化检测磺脲类药物成分的方法主要是高效液相色谱法。但是该方法存在以下缺陷：操作难度较大，处理步骤繁琐，耗时较长，方法容错率低，对于操作人员要求较高，且阳性结果需要液相色谱-串联质谱法确证，极大的提高了实验成本及时间，并且方法仪器、试剂成本均较高，不适合在较大范围开展。申请号为201611140069.X专利名称为：一种磺脲类化学成分的快速检测方法的专利文献，公开了利用CuSO4试液，根据沉淀反应现象判断样品中是否含有磺脲类化学成分的检测方法。该方法是一种快速检测类方法，使用二价铜离子与磺脲类形成铜盐后产生一定颜色变化现象判读结果。但反应现象不明显，且与氢氧化铜沉淀无较大差异，难以判读，容易造成假阳性或假阴性的结果，抗干扰能力较差，无法针对性检测磺脲成分。抗干扰能力差，反应不灵敏，现象不明显等均不适用于现阶段高质量检测方法的要求。因此，需要开发一种操作简便、快速，不需要大型的分析仪器，耗时较少，专属性强，灵敏度高，检验结果正确率高，分析成本低，对实验环境要求低，适用于检测降糖类保健品中磺脲类药物成分的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种检测降糖类保健品中磺脲类药物成分的方法。根据本专利技术的一个方面，提供了一种检测降糖类保健品中磺脲类药物成分的方法，包括以下：步骤a，待测样品制备：取一定量样品，加入氢氧化钠溶液，振荡溶解，静置，得到样品液，取所述样品液吹干，得到待测样品；步骤b，第一待测液制备:向步骤a中所述待测样品中加入无水四氢呋喃，并振荡混匀，得到第一待测液；步骤c，第一中间体制备:向步骤b中所述第一待测液中加入丙酮、苯乙酮酸甲酯和三（二甲胺基）膦，搅拌一定时间，加入叔丁基四甲基胍，在一定温度下加热，得到第一中间体；步骤d，第二中间体制备:将步骤c中所述第一中间体冷却至室温，加入浓氨水和碘，混合均匀后，静置，得到第二中间体；步骤e，重氮偶合反应：在酸性条件下，向步骤d中所述第二中间体加入亚硝酸盐溶液、对氨基苯磺酸-冰乙酸溶液进行反应，得到第二待测液；当第二待测液变为深红色或深紫色时，判定样品中含有磺脲类药物成分；当第二待测液颜色没有变化时，判定样品中不含有磺脲类药物成分。本专利技术的有益效果：本专利技术加入氢氧化钠溶液，提高对样品中磺脲类成分的提取效率，使样品中的磺脲类成分完全溶解在样品溶液中，将样品溶液吹干，对被提取出的磺脲类成分进行浓缩处理，保证本方法具有较高的灵敏度。加入无水四氢呋喃，使待测样液中磺脲类成分的浓度较高，有利于提高检测的灵敏度，便于后续检测操作。加入丙酮、苯乙酮酸甲酯和三（二甲胺基）膦和叔丁基四甲基胍，待测样液中的磺脲类成分会与丙酮、苯乙酮酸甲酯和三（二甲胺基）膦、叔丁基四甲基胍和四氢呋喃在搅拌、加热条件下进行反应生成第一中间体，第一中间体与浓氨水和碘发生反应，生成第二中间体，第二中间体具有磺酰胺基。第二中间体在酸性条件下，与亚硝酸盐、对氨基苯磺酸发生重氮偶合反应，生成深红色或深紫色的偶氮化合物，使第二待测液颜色发生变化，可以迅速准确地判断样品中含有磺脲类药物成分。本专利技术的检测方法将样品中的磺脲类药物成分通过反应转化为含有磺酰胺基的第二中间体，利用第二中间体的磺酰胺基在酸性条件下，可以与亚硝酸盐和对氨基苯磺酸发生重氮偶合反应，该反应为显色反应，会生成深红色或深紫色的偶氮化合物。通过反应变色，可以直接准确的做出判断，特异性好，无干扰反应。在不使用大型仪器的情况下，可以准确检测降糖类保健品中是否含有磺脲类药物成分。本专利技术方法特异性强，灵敏度高，反应时间短，操作简便，试剂使用量少，检测成本低，检测准确度高，对实验环境要求低，适用于大批量对降糖类保健品进行快速检测。在一些实施方式中，本专利技术的一种检测降糖类保健品中磺脲类药物成分的方法，其特征在于，步骤a，待测样品制备：取一定量样品，研磨成粉末，加入2~3ml氢氧化钠溶液，振荡溶解，静置，得到样品液，取所述样品液0.5~1ml吹干，得到待测样品；步骤b，第一待测液制备:向步骤a中所述待测样品中加入1~2ml无水四氢呋喃，并振荡混匀，得到第一待测液；步骤c，第一中间体制备:向步骤b中所述第一待测液中加入5-10ml丙酮、苯乙酮酸甲酯和三（二甲胺基）膦，搅拌一定时间，加入叔丁基四甲基胍，在60~70℃下加热，得到第一中间体，苯乙酮酸甲酯：三（二甲胺基）膦：叔丁基四甲基胍的质量比为5:8:10，苯乙酮酸甲酯、三（二甲胺基）膦和叔丁基四甲基胍的总质量为0.241-0.723g；步骤d，第二中间体制备:将步骤c中所述第一中间体冷却至室温，加入0.5~1.5ml浓氨水和0.142g碘，混合均匀后，在室温下静置15min，得到第二中间体；步骤e，重氮偶合反应：在酸性条件下，向步骤d中所述第二中间体加入0.5~1.5ml亚硝酸盐溶液和1~3ml对氨基苯磺酸-冰乙酸溶液进行反应，得到第二待测液；当第二待测液变为深红色或深紫色时，判定样品中含有磺脲类药物成分；当第二待测液颜色没有变化时，判定样品中不含有磺脲类药物成分。在一些实施方式中，磺脲类药物成分选自格列本脲、格列美脲、格列齐特、格列喹酮、格列吡嗪中的一种或多种。格列本脲、格列美脲、格列齐特、格列喹酮和格列吡嗪均属于磺脲类药物，均具有磺酰基基团，该磺酰基基团可以通过本方法的反应转化为磺酰胺基，再进行重氮偶合反应，会发生颜色变化，进而判定出磺脲类药物成分的存在。在一些实施方式中，步骤a中氢氧化钠溶液的浓度为0.2mol/L。0.2mol/L的氢氧化钠溶液可以提高样品中的磺脲类药物成分在水中的溶解度，提高对磺脲类药物成分的饿提取效率。在一些实施方式中，步骤d中浓氨水的质量分数为28%。选择28%的高浓度氨水参与反应，主要是因为氨水与碘在反应体系中进行了如下式①的可逆反应，该反应会生产中间产物碘代胺。当碘浓度相对增加时，反应如下式②进行，生成三碘化氮，该物质为爆炸物，为避免该物质生成或过多生成，适量提高氨水的浓度，使下式①的反应向正反应方向进行的同时，优先生成参与步骤d反应的碘代胺，保证第二中间体产率，降低危险性。式①：式②：在一些实施方式中，步骤e中亚硝酸盐溶液的浓度为0.1mol/L。0.1mol/L的亚硝酸盐溶液可与与对氨基苯磺酸发生重氮反应，生成重氮化合物，重氮化合物再与第二中间体发生偶合反应，生成偶合化合物，产生颜色变化。在一些实施方式中，亚硝酸盐为本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测降糖类保健品中磺脲类药物成分的方法，其特征在于，包括以下：/n步骤a，待测样品制备：/n取一定量样品，加入氢氧化钠溶液，振荡溶解，静置，得到样品液，取所述样品液吹干，得到待测样品；/n步骤b，第一待测液制备:/n向步骤a中所述待测样品中加入无水四氢呋喃，并振荡混匀，得到第一待测液；/n步骤c，第一中间体制备:/n向步骤b中所述第一待测液中加入丙酮、苯乙酮酸甲酯和三（二甲胺基）膦，搅拌一定时间，加入叔丁基四甲基胍，在一定温度下加热，得到第一中间体；/n步骤d，第二中间体制备:/n将步骤c中所述第一中间体冷却至室温，加入浓氨水和碘，混合均匀后，静置，得到第二中间体；/n步骤e，重氮偶合反应：/n在酸性条件下，向步骤d中所述第二中间体加入亚硝酸盐溶液、对氨基苯磺酸-冰乙酸溶液进行反应，得到第二待测液；当第二待测液变为深红色或深紫色时，判定样品中含有磺脲类药物成分；当第二待测液颜色没有变化时，判定样品中不含有磺脲类药物成分。/n

【技术特征摘要】
1.一种检测降糖类保健品中磺脲类药物成分的方法，其特征在于，包括以下：
步骤a，待测样品制备：
取一定量样品，加入氢氧化钠溶液，振荡溶解，静置，得到样品液，取所述样品液吹干，得到待测样品；
步骤b，第一待测液制备:
向步骤a中所述待测样品中加入无水四氢呋喃，并振荡混匀，得到第一待测液；
步骤c，第一中间体制备:
向步骤b中所述第一待测液中加入丙酮、苯乙酮酸甲酯和三（二甲胺基）膦，搅拌一定时间，加入叔丁基四甲基胍，在一定温度下加热，得到第一中间体；
步骤d，第二中间体制备:
将步骤c中所述第一中间体冷却至室温，加入浓氨水和碘，混合均匀后，静置，得到第二中间体；
步骤e，重氮偶合反应：
在酸性条件下，向步骤d中所述第二中间体加入亚硝酸盐溶液、对氨基苯磺酸-冰乙酸溶液进行反应，得到第二待测液；当第二待测液变为深红色或深紫色时，判定样品中含有磺脲类药物成分；当第二待测液颜色没有变化时，判定样品中不含有磺脲类药物成分。


2.根据权利要求1所述的一种检测降糖类保健品中磺脲类药物成分的方法，其特征在于，
步骤a，待测样品制备：
取一定量样品，研磨成粉末，加入2~3ml氢氧化钠溶液，振荡溶解，静置，得到样品液，取所述样品液0.5~1ml吹干，得到待测样品；
步骤b，第一待测液制备:
向步骤a中所述待测样品中加入1~2ml无水四氢呋喃，并振荡混匀，得到第一待测液；
步骤c，第一中间体制备:
向步骤b中所述第一待测液中加入5-10ml丙酮、苯乙酮酸甲酯和三（二甲胺基）膦，搅拌一定时间，加入叔丁基四甲基胍，在60~70℃下加热，得到第一中间体，所述苯乙酮酸甲酯：三（二甲胺基）膦：叔丁基四甲基胍的质量比为5:8:10，所述苯乙酮酸甲酯、三（二甲胺基）膦和叔丁基四甲基胍的总质量为0.241-0.723g；
步骤d，第二中间体制备:
将步骤c中所述第...

【专利技术属性】
技术研发人员：李丰，江燕玲，黄荣来，伍莉婷，潘静雯，彭凛然，毓志超，文永贤，
申请(专利权)人：广州智汇生物科技有限公司，紫金县农业农村局，河源市源城区农产品质量监督检验检测站，
类型：发明
国别省市：广东;44