【技术实现步骤摘要】
一种利用石墨烯多重信号放大SPR传感测定双酚A的方法
本专利技术涉及一种内分泌干扰的检测
,尤其是一种利用石墨烯多重信号放大SPR传感测定双酚A的方法。
技术介绍
随着人们生活水平的提高,人们对环境激素也越来越重视,关注食源性激素与人类健康的研究也越来越多。食源性物质中雌激素的含量,对人们身体的健康有很大的影响。尤其是牛奶,牛奶的主要摄入人群是儿童。牛奶中有相当量的雌性激素,有些学者认为,目前消费的牛奶比100年前明显增加。双酚A,也称为BPA,是一种化学物质,普遍用于环氧树脂和聚碳酸酯塑料制品中,在生活中最常见的塑料制品就是婴儿的塑料奶瓶。由于人体普遍暴露于双酚A的环境中,体内循环的双酚A浓度为0.2ng/mL~20ng/mL。不少研究已经证明,暴露于双酚A环境中可以引起多种健康问题,如焦虑、短期失忆、肥胖、糖尿病和心血管疾病等。2003年,研究人员Hunt就已经提出双酚A是一种人造的,具有雌激素特征的化学物质,可以诱导增加中板集合障碍和减数分裂非整倍性的概率。到目前为止,双酚A是唯一已知的可以引起非整倍体(aneugen)的化学物质,该物质能通过破坏减数分裂过程从而使机体产生含有错误染色体数量的胚胎。为了保证下一代的健康,需要对牛奶及其他饮食中双酚A的含量进行控制。Spr(SurfacePlasmonResonance)即表面等离子体共振,是一种用于表征表面折射系数改变的光学专业技术。SPR传感检测芯片包括金膜和金膜(或银膜等其他贵金属片)表面的微流通道,在微流通道内且在金膜表面固定着可与目标分子特 ...
【技术保护点】
1.一种利用石墨烯多重信号放大SPR传感测定双酚A的方法,其特征在于,其包括步骤:/nS1:试样准备/n使用磁性石墨烯为吸附剂,对待测样品中的双酚A进行吸附富集、并用洗脱液洗脱,将洗脱下来的双酚A定容,得到待测试样;/nS2:对SPR芯片进行修饰:将SPR芯片的贵金属片表面清洗干净,并在贵金属片表面连接羧基化氧化石墨烯;/nS3:利用固定在SPR芯片贵金属表面的羧基化氧化石墨烯连接固定BPA-BSA;/nS4:基于间接竞争法利用SPR免疫传感测定待测试样中双酚A的浓度:将含BPA的待测试样和BPA的单克隆抗体溶液混合进样,共同竞争被固定在SPR芯片表面的BPA-BSA,SPR产生的信号与待测试样中BPA的浓度呈反比。/n
【技术特征摘要】
1.一种利用石墨烯多重信号放大SPR传感测定双酚A的方法,其特征在于,其包括步骤:
S1:试样准备
使用磁性石墨烯为吸附剂,对待测样品中的双酚A进行吸附富集、并用洗脱液洗脱,将洗脱下来的双酚A定容,得到待测试样;
S2:对SPR芯片进行修饰:将SPR芯片的贵金属片表面清洗干净,并在贵金属片表面连接羧基化氧化石墨烯;
S3:利用固定在SPR芯片贵金属表面的羧基化氧化石墨烯连接固定BPA-BSA;
S4:基于间接竞争法利用SPR免疫传感测定待测试样中双酚A的浓度:将含BPA的待测试样和BPA的单克隆抗体溶液混合进样,共同竞争被固定在SPR芯片表面的BPA-BSA,SPR产生的信号与待测试样中BPA的浓度呈反比。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤S1中,磁性石墨烯按照如下方法制备得到:以纳米石墨烯粉、二价铁铁盐、三价铁铁盐为原料,其中二价铁和三价铁的摩尔比为1:2;向所述原料中加入浓盐酸后,超声脱氧并充分分散于超纯水与无水醇的混合溶剂中,机械搅拌12-24h,加入浓氨水调节pH>10,在加热条件下继续搅拌,得到沉淀物,分离该沉淀物;加入超纯水和无水醇清洗,并采用磁分离器去除无磁性杂质,将所得物分散到无水醇中,低温烘干,即得到磁性石墨烯。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤S1中:采用磁性石墨烯为吸附剂,在pH为酸性条件下对待测样品中的双酚A进行吸附富集,吸附时间为4-10min,采用乙腈为洗脱液,将被磁性石墨烯吸附的双酚A洗脱下来,氮气吹干定容至100-250μL。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤S2中,对SPR芯片进行修饰的方法包括如下步骤:
步骤1:清洗SPR芯片的贵金属片,去除其表面的有机物;
步骤2:在SPR芯片的贵金属片表面引入带负电荷的基团;
步骤3:借助所述带负电荷的基团的静电作用,在所述在SPR芯片的贵金属片表面引入带正电荷的基团;
步骤4:借助所述带正电荷的基团的静电作用,在所述在SPR芯片的贵金属片表面连接带负电荷的羧基化氧化石墨烯。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤S1中,步骤S2中,所述SPR芯片的贵金属片为金片,具体步骤为:
步骤1:采用体积比为H202:H2S04=1:3配制成piranha溶液,在室温下浸泡SPR芯片的金片,去除金片表面的有机物,用去离子水清洗、无水乙醇清洗,最后氮气吹干;其中H202为...
【专利技术属性】
技术研发人员:高志贤,李双,白家磊,彭媛,宁保安,王江,韩殿鹏,任汉林,周焕英,
申请(专利权)人:军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所,
类型:发明
国别省市:天津;12
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