一种从罗汉果籽仁中制备角鲨烯、维生素E及甾醇的方法技术

本发明专利技术提供了一种从罗汉果籽仁中制备角鲨烯、维生素E及甾醇的方法，具体是包括了萃取，皂化，多次析晶和分离，对析出物和母液分别进行处理，以高收率，高纯度得到了角鲨烯、维生素E及甾醇三种产品。本发明专利技术提供的工艺除了浸提和皂化在相对较高条件进行，其余工艺都在较低的温度，且无反应剧烈的条件下进行，对目标活性物质的破坏极小，对设备的腐蚀性也非常小。且结晶是获得高含量物质的主要手段之一，通过结晶工艺，条件温和，含量高，品相好，以罗汉果籽仁为原料，制备高含量角鲨烯的同时，可同时分离出多种活性成分。

【技术实现步骤摘要】
一种从罗汉果籽仁中制备角鲨烯、维生素E及甾醇的方法
本专利技术涉及罗汉果籽仁天然有效成分的分离方法，具体涉及一种从罗汉果籽仁中制备角鲨烯、维生素E及甾醇的方法。
技术介绍
中药罗汉果为葫芦科，罗汉果，植物罗汉果的干燥果实，是广西自治区特色药用植资源。几年来，国内外对其化学成分、有效成分都做了诸多研究，但都主要集中在天然甜味剂以及药理等方面。同时由于罗汉果天然甜味物质都集中在果壳及果瓤，其籽仁都完整的被保留下来，且作为废弃物处理了。据悉，罗汉果籽仁含有48.5wt％油脂，油脂中含不饱和脂肪较多，籽仁以角鲨烯(十六碳六烯)为主，占籽仁油的51.21wt％，同时还含有大量的维生素E和甾醇等活性物质。从植物中提取角鲨烯，是获其的重要来源之一，角鲨烯是一种全反式三萜烯化合物，为淡黄色不溶于水的油状液体，角鲨烯在常温下为一种无色油状液体，不溶于水，难溶于甲醇、乙醇和冰醋酸，易溶于乙醚、石油醚、丙酮、四氯化碳等有机溶剂。角鲨烯具有提高体内超氧化物歧化酶(SOD)活性、增强机体免疫能力、改善性功能、抗衰老、抗疲劳、抗肿瘤等多种生理功能，是一种无毒性的具有防病治病作用的生物活性物质。维生素E(VitaminE)是一种脂溶性维生素，其水解产物为生育酚，是最主要的抗氧化剂之一。溶于脂肪和乙醇等有机溶剂中，不溶于水，对热、酸稳定，对碱不稳定，对氧敏感，对热不敏感，但油炸时维生素E活性明显降低。能促进性激素分泌，使男子精子活力和数量增加；使女子雌性激素浓度增高，提高生育能力，预防流产，还可用于防治男性不育症、烧伤、冻伤、毛细血管出血、更年期综合症、美容等方面。近来还发现维生素E可抑制眼睛晶状体内的过氧化脂反应，使末梢血管扩张，改善血液循环，预防近视眼发生和发展。植物甾醇，是从玉米、大豆等中经过物理提纯而得，具有营养价值高、生理活性强等特点。植物甾醇可通过降低胆固醇减少心血管病的风险。其广泛应用在食品、医药、化妆品、动物生长剂及纸张加工、印刷、纺织等领域，特别是在欧洲作为食品添加剂非常普遍，广泛用于食品中以降低人体胆固醇。现有技术中有一些关于从从植物中中提取角鲨烯等有效成分的文献。CN105016956公开了一种提取角鲨烯的方法，具体是将富含角鲨烯的植物油脱臭馏出物酯化和转酯化反应，液体进行蒸馏得到维生素E和角鲨烯馏分，而后色谱分离和蒸发得到原料，然后将原料进行二次结晶、蒸发、色谱分离从而得到高纯度角鲨烯、维生素E及甾醇。该方法步骤极其繁琐，同时涉及到多次高温蒸发操作，对热敏成分角鲨烯等易造成破坏，直接导致收率低下。CN1670005公开了罗汉果的种仁或种籽破碎后制备角鲨烯的方法，具体为用有机溶剂将罗汉果种仁会种籽中的脂溶性物质浸提，而后除去有机溶剂，硅胶层析和洗脱，减压除去有机溶剂即得角鲨烯产品。该方法得到的角鲨烯含量较低，且色谱柱处理能力小，其他成分也未分离出来。CN106748615公开了一种从油脂中提取角鲨烯的方法，具体为利用甘油和脂肪酶对油脂进行甘油解，环糊精包合甘油解产物，乙醇回流解得到角鲨烯粗品，最后氧化铝吸附分离得到角鲨烯。该方法对酶解条件要求苛刻，甘油解-环糊精包合技术尚不成熟，且色谱柱分离能力小，其他成分也未分离出来。CN105777477公开了一种提取高纯度角鲨烯的方法，具体为将植物脱臭馏出物或初步提纯物溶解于极性/非极性溶剂的上相溶剂中，而后通过高速逆流色谱进行分离得到角鲨烯产品。该方法对设备要求极高，高速逆流色谱，难以适用于大规模的工业化生产，而且未能充分利用色谱分离对其他充分进行分离。CN1077778277公开了一种回收角鲨烯、维生素E和/或甾醇的方法，具体为混合物极性/非极性吸附，得到含角鲨烯的液相，其固相与极性混合分离后再次结晶得到甾醇或维生素E。该方法对原料的要求较高，只适合某种成分含量较高的原料，对同时含多种成分的原料，难以实现单独的分离。而且该法获得产品含量较低。CN103288571公开了一种混合生育酚中角鲨烯的分离提取方法，具体为硅胶柱层析然后用混合溶剂进行洗脱，并分段收集。该方法对原料要求较高，生育酚和角鲨烯含量要高，且硅胶层析处理量有限，且需要分段收集，操作繁琐。CN103804337公开了一种多级逆流液-液萃取法提取维生素E和角鲨烯的工艺，具体为以植物油脂精炼时的脱臭馏出物为原料，经过酯化反应、甘油解反应、短程蒸馏、多级逆流液-液萃取，除去极性溶剂得到维生素E，非极性溶剂冷析得到甾醇，而后除去非极性溶剂得到角鲨烯。该方法涉及到蒸馏高温，对热敏性成分极易造成破坏。CN101830770公开了一种从植物油脱臭馏出物中提取角鲨烯的方法，具体为皂化、二级分子蒸馏、结晶回收甾醇、溶剂反复萃取分离角鲨烯和维生素E。该方法涉及到二级分子蒸馏，高温极易造成热敏成分降解，同时同一萃取反复萃取难以进一步提高的角鲨烯的含量及维生素E，直接导致分离的成分含量不高。CN105949025公开了一种吸附分离植物油脱臭馏出物中角鲨烯的方法，具体为将植物油脱臭馏出物用D101进行吸附后，用脱附剂进行洗脱，浓缩干燥即得。由于D101是广谱性吸附树脂，对各种尤其是黄酮类、皂苷类吸附效果好，故而该方法得到产品成分复杂，含量低。CN110283034公开了一种从植物油脱臭馏出物中获取高纯度角鲨烯的方法，具体为将植物油脱臭馏出物进行酯化和酯交换反应，取剩余液进行分离，阴离子交换树脂分离角鲨烯，皂化，结晶，得到角鲨烯。该方法中阴离子交换树脂处理量有限，且反复多次设计到反应条件剧烈的环境，高温强碱等，如脱臭、酯化、蒸馏、皂化等工艺，直接会导致目标成分降解。CN102089263公开了一种植物油的脱臭馏出物和/或物理精炼冷凝物中所有的角鲨烯、甾醇和维生素E的提取方法。具体为将原料的脂肪酸、甘油酯等转化，分步蒸馏、结晶分离得到维生素E，酯转化蒸馏达到角鲨烯，结晶得到甾醇。该方法涉及到分步蒸馏，其反复多次高温对热敏成分直接造成破坏，影响收率。上述方法中有的反复多次涉及到高温，及强碱条件，对各热敏成分破坏大，有的则只是针对角鲨烯进行分离，其他成分则未进行分离，直接造成浪费，有的对原料要求较为苛刻，应用范围狭窄，还有对工艺的设备要求高，处理能力也极其有效，不适合规模化生产。在罗汉果籽仁中同时高收率，高纯度的提取制备角鲨烯，维生素E及甾醇，未见有文献报道。因此，开发一种从罗汉果籽仁中制备角鲨烯、维生素E及甾醇的方法，同时对罗汉果籽仁中其它高附加值的成分进行有效分离，实现罗汉果籽仁的资源化再利用，延长罗汉果周边产品线，提高罗汉果相关产品的经济价值具有重要的研究意义和经济价值。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是，克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种针对罗汉果籽仁为原料，制备高含量角鲨烯的同时，可同时分离出多种活性成分的适于工业化的生产方法，且所得的各种活性成分含量高、收率高，实现罗汉果籽仁的资源化再利用，延长罗汉果周边产品线，提高罗汉果相关产品的经济价值。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案如下：一种从罗汉本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从罗汉果籽仁中制备角鲨烯、维生素E及甾醇的方法，包括以下步骤：/n(1)萃取：将罗汉果籽仁破碎、干燥，加入有机溶剂进行萃取，得到萃取液；/n(2)皂化：将萃取液回收有机溶剂得到罗汉果油脂，加入碱性醇溶液，进行皂化，取不皂化物；/n(3)析晶1：向不皂化物中加入醇/石油醚混合溶剂，恒温搅拌，过滤，回收石油醚，得到析出物A和母液A；/n(4)析晶2：将析出物A加入酮/水混合溶剂，恒温搅拌，过滤，回收酮，得到析出物B和母液B，将得到的析出物B用冷水淋洗，干燥后即得到角鲨烯；/n(5)析晶3：将步骤3得到的母液A冷却，得到析出物C和母液C，将得到的析出物C用冷醇淋洗，干燥后即得到甾醇；/n(6)析晶4：将步骤5得到的母液C加入水，恒温搅拌，而后回收醇，冷却，得到析出物D，分离析出物D，冷水淋洗并干燥，即得维生素E。/n

【技术特征摘要】
1.一种从罗汉果籽仁中制备角鲨烯、维生素E及甾醇的方法，包括以下步骤：
(1)萃取：将罗汉果籽仁破碎、干燥，加入有机溶剂进行萃取，得到萃取液；
(2)皂化：将萃取液回收有机溶剂得到罗汉果油脂，加入碱性醇溶液，进行皂化，取不皂化物；
(3)析晶1：向不皂化物中加入醇/石油醚混合溶剂，恒温搅拌，过滤，回收石油醚，得到析出物A和母液A；
(4)析晶2：将析出物A加入酮/水混合溶剂，恒温搅拌，过滤，回收酮，得到析出物B和母液B，将得到的析出物B用冷水淋洗，干燥后即得到角鲨烯；
(5)析晶3：将步骤3得到的母液A冷却，得到析出物C和母液C，将得到的析出物C用冷醇淋洗，干燥后即得到甾醇；
(6)析晶4：将步骤5得到的母液C加入水，恒温搅拌，而后回收醇，冷却，得到析出物D，分离析出物D，冷水淋洗并干燥，即得维生素E。


2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述有机溶剂为低极性有机溶剂，选自石油醚、正己烷中的至少一种，有机溶剂的体积用量为罗汉果籽仁重量的3～10倍(L/kg)萃取方式为回流，温度为40～80℃，萃取时间为2～8h。


3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，皂化方式为向得到的罗汉果油脂加入碱性醇溶液，恒温回流皂化。


4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述碱性醇溶液为碱性无机物和乙醇的溶液，所述碱性醇溶液的体积加入量为油脂体积的5～10倍(V/V)，皂化温度为80～95℃，时间为1～4h；优选地，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：何安乐，熊瑶，李伟，黄华学，
申请(专利权)人：湖南华诚生物资源股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43