一种肉制品中胭脂红的提取方法技术

本发明专利技术提供一种肉制品中胭脂红的提取方法，其特征在于，包括：1)以g：ml计以1：5～10的比例将样品与水混合后加热到60～80℃，震荡混匀提取后低速离心，收集上层离心液；2)将所述上层离心液与石油醚合，混合均匀冷冻离心，取尽中间层液体；所述上层离心液与石油醚的体积比为3～5：1；3)水浴去除所述中间层液体中残留的石油醚，即得胭脂红提取液。本发明专利技术提供的方法经济、简便、易操作，大量节省了试剂用量和操作时间，且适宜批量样品操作。

【技术实现步骤摘要】
一种肉制品中胭脂红的提取方法
本专利技术本专利技术涉及食品
，具体涉及一种肉制品中胭脂红的提取纯化方法。
技术介绍
胭脂红，又名食用赤色102号(日本)、食用红色7号、丽春红4R、大红、亮猩红，为水溶液偶氮类着色剂。化学名称为1-(4'-磺酸基-1'-萘偶氮)-2-萘酚-6,8-二磺酸三钠盐，是苋菜红的异构体。胭脂红(Ponceau4R)是目前我国使用最广泛、用量最大的一种单偶氮类人工合成色素。近年来,有报道指出,胭脂红与欧盟标准禁用的苏丹红Ⅰ同属于偶氮类色素,偶氮化合物在体内可代谢生成致突变原前体—芳香胺类化合物。人工合成色素胭脂红在我国添加的食品范围和用量是有国家标准规定的，胭脂红可用于果汁饮料、配制酒、碳酸饮料、糖果、糕点、冰淇淋、酸奶等食品的着色，而不能用于肉干、肉脯制品、水产品等食品中，主要是为了防止一些不法分子通过过量使用色素将不良的原料肉如变质肉的外观掩盖起来，欺骗消费者。目前主要通过高效液相色谱法、薄层色谱法和示波极谱法等对食物中的胭脂红的含量进行检测，但在检测之前均需要对样品进行前处理，以提取纯化其中的胭脂红。在《GB/T9695.6-2008肉制品胭脂红着色剂测定标准》中提供了肉制品中胭脂红的提取纯化方法，其中先用石油醚处理样品，去除油脂后，再进行提取。操作复杂，耗时长，试剂用量大，特别是有机试剂石油醚的用量巨大。
技术实现思路
针对上述需要，本专利技术提供一种方法经济、简便、易操作、试剂用量小的提取方法。将该方法应用于肉制品中胭脂红的提取纯化将大量减少有机试剂用量，提高工作效率。本专利技术提供的技术方案如下：一种肉制品中胭脂红的提取方法，包括：1)以g：ml计以1：5～10的比例将样品与水混合后加热到50～70℃，震荡混匀提取后低速离心，收集上层离心液；2)将所述上层离心液中与石油醚混合，混合均匀冷冻离心，取尽中间层液体；所述上层离心液与石油醚的体积比为3～5：1；3)去除所述中间层液体中残留的石油醚，既得胭脂红提取液。在根据本专利技术的一个实施方案中，步骤1)还包括样品在提取前进行粉碎处理。在根据本专利技术的一个实施方案中，步骤1)中样品与水混合后通过水浴加热5～15min。在根据本专利技术的一个实施方案中，步骤1)还包括重复提取2次。在根据本专利技术的一个实施方案中，步骤1)所述的低速离心为转速2200r/min～3800r/min。在根据本专利技术的一个实施方案中，步骤2)中所述的石油醚沸程为30-60℃。在根据本专利技术的一个实施方案中，步骤2)中所述冷冻离心是在2～6℃，8000r/min～10000r/min的转速下进行的。在根据本专利技术的一个实施方案中，步骤3)是通过水浴和/或氮气吹的方法实现的。在根据本专利技术的一个实施方案中，所述水浴的温度为60～80℃；优选为60℃。本专利技术还提供了上述方法在检测肉制品中胭脂红含量中的应用。与国家标准中的提取纯化方法相比，本专利技术提供的方法经济、简便、易操作。试剂用量小，特别是有机试剂石油醚的用量不足标准方法的十分之一。附图说明图1所示为胭脂红标准品的色谱图(保留时间为5.003min)；图2所示为胭脂红标准品的光谱图；图3所示为样品和加标样品的色谱重叠图。具体实施方式以下实施例用于说明本申请，但不用来限制本申请的范围。下面将更详细地描述本申请的具体实施例。提供这些实施例是为了能够更透彻地理解本申请，并且能够将本申请的范围完整的传达给本领域的技术人员。如在通篇说明书及权利要求当中所提及的“包含”或“包括”为一开放式用语，故应解释成“包含但不限定于”。说明书后续描述为实施本申请的较佳实施方式，然所述描述乃以说明书的一般原则为目的，并非用以限定本申请的范围。本申请的保护范围当视所附权利要求所界定者为准。如无特殊说明，本专利技术中所用到的试剂均可以商购途径购买得到。实施例1肉制品样品中胭脂红的提取1)粉碎：样品制成肉泥——便于与提取液混匀，提取充分。2)提取：准确称取2.00g(精确至0.001g)样品于50mL离心管中，加一级水定容至15mL；60℃水浴加热10min，漩涡提取5min，3000r/min常温离心3min，取上层液体；重复操作加水至15或10mL，提取2次；加热可以使样品的漩涡提取在较高的温度下进行，较高的温度有利于破坏部分分子间和分子中的氢键，从而降低提取过程中的粘度，有利于样品中的待测物更均匀的分散在提取液中。漩涡提取5min，3000r/min、低速离心，对离心管的配平要求较低，用水定容，基本不需要考虑密度的影响，可以较快速的实现固液分离。(3)上层离心液中加入10mL石油醚(沸程30～60℃)，充分混匀后，9000r/min4℃冷冻离心5min；(4)取尽中间澄清液体层于新的50mL离心管中，可能会带入少量的石油醚(沸程30～60℃)，放置在60℃水浴加热10min，可以去除残存的石油醚。1个步骤就可以去除样品中的油脂、脂溶性蛋白，并去除部分水溶性蛋白、多糖类物质和其他杂质：石油醚是弱极性溶剂，不溶于水，相对密度(水＝1)在0.64至0.66之间，因此，即使2g样品全是油脂，分散在10mL石油醚中(体积不变)，其相对密度仍小于1，多次的实验现象也验证了这样的结果；4℃低温，可以减低水溶性蛋白、多糖物质和其他杂质在水中的溶解度，9000r/min4℃冷冻离心5min，可以加速进行溶液与弱极性溶液的分层，同时加入不溶物的汇聚，相对密度小的向上移动，相对密度大的向下移动，从而实现有效去除样品溶液中的中的油脂、脂溶性蛋白，并去除部分水溶性蛋白、多糖类物质和其他杂质，实现样品溶液的初步净化。实施例2提取液的净化：(1)标准方法(GB/T9695.6-2008)的纯化步骤。(2)SPE柱法：含赤藓红项目，使用PWAXSPE柱(150mg/6mL)；不含赤藓红项目，使用聚酰胺SPE柱(1g/6mL)。具体步骤按照相应厂家的说明进行操作；收集洗脱液，50℃水浴氮吹吹干，加水定容至1mL，过0.45μm色素专用膜；待测。实施例3本专利技术与国标方法对比根据国标中的色谱方法对样品进行检测，结果如图1-3所示。加标点的选择：GB9695.6-2008的方法检出限为0.05mg/kg(称样量5.0g～10.0g；样品经处理后，得到的样液终体积为10.0mL)，对应的样液浓度为0.05mg/L。为了更好的确认方法的可行性，需要相对准确的检测结果，因此选择了在样液终浓度中增加3倍和10倍方法检出限的2个点位，即0.15mg/L和0.50mg/L。使用本方法对实际样品和加标样品进行测试，加标样液终浓度为0.15mg/L时，回收率为89.3％至92.0％；加标样液终浓度为0.50mg/L时，回收率为94.8％至100.0％之间。本方法与国标方法的对本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种肉制品中胭脂红的提取方法，其特征在于，包括：/n1)以g：ml计以1：5～10的比例将样品与水混合后加热到60～80℃，震荡混匀提取后低速离心，收集上层离心液；/n2)将所述上层离心液中与石油醚混合，混合均匀冷冻离心，取尽中间层液体；所述上层离心液与石油醚的体积比为3～5：1；/n3)水浴去除所述中间层液体中残留的石油醚，既得胭脂红提取液。/n

【技术特征摘要】
1.一种肉制品中胭脂红的提取方法，其特征在于，包括：
1)以g：ml计以1：5～10的比例将样品与水混合后加热到60～80℃，震荡混匀提取后低速离心，收集上层离心液；
2)将所述上层离心液中与石油醚混合，混合均匀冷冻离心，取尽中间层液体；所述上层离心液与石油醚的体积比为3～5：1；
3)水浴去除所述中间层液体中残留的石油醚，既得胭脂红提取液。


2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)还包括样品在提取前进行粉碎处理。


3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中样品与水混合后通过水浴加热5～15min。


4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)还包括重复提取2次。

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【专利技术属性】
技术研发人员：赵海峰，荆建伟，李惠颖，左雯雯，
申请(专利权)人：青岛市食品药品检验研究院青岛市药品不良反应监测中心青岛市实验动物和动物实验中心，
类型：发明
国别省市：山东;37