一种李子抗癌活性多酚的制备方法技术

本发明专利技术提供了一种李子抗癌活性多酚的制备方法，包括如下步骤：(1)制备李子干粉；(2)将李子干粉与乙醇按质量体积比为1g：3‑25mL混合，搅拌得浆液，对浆液进行超声处理，然后进行抽滤；重复上述步骤三次，合并获得的滤液后进行蒸馏，获得旋蒸液；(3)将步骤(2)获得的旋蒸液置于真空冷冻干燥机干燥处理，得到李子多酚粗提物；(4)按质量体积比为1g：10‑20mL将李子多酚粗提物溶于去离子水中，过滤，滤液采用大孔树脂进行洗脱纯化处理，收集洗脱液；(5)洗脱液于下真空蒸发回收乙醇，余下旋蒸液经冷冻干燥，即可得到具有抗癌活性的李子多酚。本发明专利技术提供的方法制备的李子多酚纯度高且组分明确，有利于提高李子多酚的利用范围和生理活性。

【技术实现步骤摘要】
一种李子抗癌活性多酚的制备方法
本专利技术属于多酚的制备
，具体涉及一种李子抗癌活性多酚的制备方法。
技术介绍
多酚类物质是指分子中具有多个酚羟基的植物酚类。李子渣果实内有很高含量的天然多酚类化合物，植物多酚类物质具有很强的抗氧化能力，是相同剂量下维生素C的抗氧化能力的20倍，因此可有效的清除人体内的氧自由基，从而减少氧自由基对正常细胞的破坏，起到保护作用。同时，多酚类化合物还可以预防潜在的致癌性物质在人体内的形成和聚焦，改善新陈代谢，防癌作用显著。中国专利CN106890226A(申请号201510954347.4)公开了一种李子渣制备多酚的方法，将李子渣干粉与乙醇混合，搅拌，萃取，静置、过滤，萃取，并合并萃取液，蒸发干燥；干燥产物用石油醚萃取，合并上清液回收石油醚后，加入乙酸乙酯进行2次萃取，合并上清液蒸发出乙酸乙酯，固体冻结后冷冻干燥的李子渣多酚粗提物。该方法采用常规的多酚溶剂萃取方法制备李子渣多酚，但该方法存在较多不足；(1)采用石油醚萃取，仅仅获取了极性较小的组分，而含量更多活性可能更强的组分被遗弃在萃余液中，导致资源浪费，且继续采用更大极性的乙酸乙酯萃取并不形成极性梯度，因此该步骤并无明显意义。(2)采用石油醚和乙酸乙酯为萃取溶剂，存在石油醚和乙酸乙酯溶剂残留风险。(3)石油醚和乙酸乙酯价格昂贵、易挥发燃烧，大量使用成本高且存在安全风险。(4)该方法仅用乙醇浸提，采用石油醚和乙酸乙酯萃取，所制备的多酚并没有经过纯化，含有较多杂质，会导致多酚活性不强，且不利于进一步利用。
技术实现思路
针对现有技术中存在的上述不足，本专利技术的目的在于提供一种李子抗癌活性多酚的制备方法，该制备方法未采用石油醚和乙酸乙酯作为萃取剂，降低了萃取剂残留的风险，提高了原料利用率，降低了成本，制备出的李子多酚纯度高且组分明确，有利于提高李子多酚的利用范围和生理活性。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种李子抗癌活性多酚的制备方法，包括如下步骤：(1)制备李子干粉；(2)将李子干粉与乙醇按质量体积比为1g：3-25mL混合，搅拌得浆液，对浆液进行超声处理，然后进行抽滤；重复上述步骤三次，合并获得的滤液后进行蒸馏，获得旋蒸液；(3)将步骤(2)获得的旋蒸液置于真空冷冻干燥机干燥处理36-72h，得到李子多酚粗提物；(4)按质量体积比为1g：10-20mL将李子多酚粗提物溶于去离子水中，过滤，滤液采用大孔树脂进行洗脱纯化处理，收集洗脱液；(5)洗脱液于25-45℃下真空蒸发回收乙醇，余下旋蒸液经冷冻干燥，即可得到具有抗癌活性的李子多酚。进一步，步骤(4)中进行洗脱纯化处理具体步骤为：过滤后的滤液泵入预先填充好的D101大孔吸附树脂柱中，先采用去离子水冲洗25-40min，然后采用乙醇洗脱30-90min。进一步，步骤(4)中过滤采用的滤膜为0.22μm水系超滤膜或0.45μm水系超滤膜。进一步，步骤(2)中超声频率为25-50MHz，超声时间为30-90min。进一步，步骤(2)中所述乙醇为质量分数为75％-85％的乙醇。进一步，步骤(1)中将李子去核后冻干并粉粹，即可获得李子干粉。与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：(1)本专利技术采用75％-85％乙醇溶液浸取李子多酚，且采用超声技术进行辅助浸提，能有效提升李子多酚的提取率，降低了现有因采用石油醚和乙酸乙酯作为萃取剂而带来的萃取剂残留的风险；随后冻干为李子多酚粗提物，继而通过大孔树脂进行纯化，从而获得具有抗癌活性的李子多酚，该李子多酚纯度高且组分明确，有利于提高李子多酚的利用范围和生理活性。(2)本专利技术在制备过程中采用大孔树脂对多酚粗提物进行纯化，减少了多酚提取物中糖等杂质的含量，有助于提高多酚纯度和活性。(3)本专利技术制备过程中仅采用乙醇和水为浸取液和洗脱液，具有成本低和无毒，对环境更友好，工艺简单等特点。(4)本专利技术具有明确的抗癌细胞增殖生理活性，能更好的被用于相关领域。(5)本专利技术含有芦丁、绿原酸、木犀草素、根皮素、柚皮素和根皮苷，其中芦丁的相对含量超过80％。(6)本专利技术采用水溶解李子多酚粗提物并用水洗脱除杂，避免了乙醇溶解导致进一步纯化过程中多酚组分的损失。附图说明图1为本专利技术李子多酚的主要成分；图2为本专利技术李子多酚对肺癌细胞的抑制活性；图3为本专利技术李子多酚浓度与活性氧荧光相对强度的关系。具体实施方式下面结合具体实施例，对本专利技术方法进行详细说明。一、本专利技术李子抗癌活性多酚的制备实施例1一种李子抗癌活性多酚的制备方法，包括如下步骤：(1)将李子去核后冻干并粉粹为李子干粉；(2)将100g李子干粉与1000mL质量分数为80％的乙醇混合，在转速为10000r/min下，匀速转动2min获得匀浆；将匀浆置于容器中进行超声处理，超声频率为45MHz，超声处理30min，然后进行抽滤；重复上述步骤三次(即为再次称取相同质量体积的李子干粉和乙醇，搅拌均匀后进行超声、抽滤处理)，合并获得的滤液后进行蒸馏，获得旋蒸液，蒸馏过程中乙醇可以回收再利用；(3)将步骤(2)获得的旋蒸液置于真空冷冻干燥机内进行干燥处理48h，得到李子多酚粗提物；(4)将2g李子多酚粗提物溶于20mL去离子水中，用0.22μm水系超滤膜进行过滤，滤液用恒流泵泵入预先填充好的D101大孔吸附树脂柱中，先用去离子水进行冲洗35min，以去除糖等杂质，然后用乙醇洗脱60min，以解吸多酚，收集洗脱液；(5)将上述洗脱液置于40℃下真空蒸发回收乙醇，余下旋蒸液冷冻干燥，即可得到具有抗癌活性的李子多酚。实施例2一种李子抗癌活性多酚的制备方法，包括如下步骤：(1)将李子去核后冻干并粉粹为李子干粉；(2)将100g李子干粉与300mL质量分数为75％的乙醇混合，在转速为10000r/min下，匀速转动2min获得匀浆；将匀浆置于容器中进行超声处理，超声频率为25MHz，超声处理60min，然后进行抽滤；重复上述步骤三次，合并获得的滤液后进行蒸馏，获得旋蒸液，蒸馏过程中乙醇可以回收再利用；(3)将步骤(2)获得的旋蒸液置于真空冷冻干燥机内进行干燥处理36h，得到李子多酚粗提物；(4)将1g李子多酚粗提物溶于15mL去离子水中，用0.22μm水系超滤膜进行过滤，滤液用恒流泵泵入预先填充好的D101大孔吸附树脂柱中，先用去离子水进行冲洗25min，以去除糖等杂质，然后用乙醇洗脱30min，以解吸多酚，收集洗脱液；(5)将上述洗脱液置于25℃下真空蒸发回收乙醇，余下旋蒸液冷冻干燥，即可得到具有抗癌活性的李子多酚。实施例3一种李子抗癌活性多酚的制备方法，包括如下步骤：(1)将李子去核后冻干并粉粹为李子干粉；(2)将100g李子干粉与25本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种李子抗癌活性多酚的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：/n(1)制备李子干粉；/n(2)将李子干粉与乙醇按质量体积比为1g：3-25mL混合，搅拌得浆液，对浆液进行超声处理，然后进行抽滤；重复上述步骤三次，合并获得的滤液后进行蒸馏，获得旋蒸液；/n(3)将步骤(2)获得的旋蒸液置于真空冷冻干燥机干燥处理36-72h，得到李子多酚粗提物；/n(4)按质量体积比为1g：10-20mL将李子多酚粗提物溶于去离子水中，过滤，滤液采用大孔树脂进行洗脱纯化处理，收集洗脱液；/n(5)洗脱液于25-45℃下真空蒸发回收乙醇，余下旋蒸液经冷冻干燥，即可得到具有抗癌活性的李子多酚。/n

【技术特征摘要】
1.一种李子抗癌活性多酚的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)制备李子干粉；
(2)将李子干粉与乙醇按质量体积比为1g：3-25mL混合，搅拌得浆液，对浆液进行超声处理，然后进行抽滤；重复上述步骤三次，合并获得的滤液后进行蒸馏，获得旋蒸液；
(3)将步骤(2)获得的旋蒸液置于真空冷冻干燥机干燥处理36-72h，得到李子多酚粗提物；
(4)按质量体积比为1g：10-20mL将李子多酚粗提物溶于去离子水中，过滤，滤液采用大孔树脂进行洗脱纯化处理，收集洗脱液；
(5)洗脱液于25-45℃下真空蒸发回收乙醇，余下旋蒸液经冷冻干燥，即可得到具有抗癌活性的李子多酚。


2.根据权利要求1所述的李子抗癌活性多酚的制备方法，其特征在于，步骤(4)中进行洗脱纯化处理具体步骤为：...

【专利技术属性】
技术研发人员：李文峰，程梦婷，谭飔，
申请(专利权)人：长江师范学院，
类型：发明
国别省市：重庆;50