MSC表达的免疫调节剂与CAR-T结合用于癌症治疗制造技术

该技术描述了新颖的基于细胞的联合治疗模式，其在广泛的敏感和抗性肿瘤中诱导基于机制的肿瘤细胞杀伤。这些新试剂是肿瘤特异性的并且靶向广泛的实体瘤。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】MSC表达的免疫调节剂与CAR-T结合用于癌症治疗相关申请的交叉引用本申请根据35U.S.C§119(e)要求2017年11月22日提交的美国临时申请第62/590,070号的权益，其内容通过引用整体并入本文中。
本专利技术的领域涉及免疫疗法。背景癌症是一种威胁生命的疾病，其中细胞过度增殖，导致功能异常、细胞生长不受调控、分化的缺乏、局部组织侵袭和转移。利用免疫系统破坏表达特定细胞表面标志物的细胞的能力的改变或以免疫系统破坏表达特定细胞表面标志物的细胞的能力为特征的癌症疗法,已在针对未形成实体瘤的癌症(如白血病)方面取得了成功。具体地，使用表达嵌合抗原受体的T细胞(CAR-T)，其人为地靶向细胞毒性T细胞以杀死癌细胞。然而，用这种方法靶向实体瘤被证明更具挑战性。实体瘤微环境倾向于是免疫抑制的，通常含有多于一层的保护层，其阻碍免疫细胞有效到达并杀死肿瘤的转化细胞的能力。因此，需要靶向实体瘤的新疗法来治疗癌症。概述本文所述技术的一个方面提供了治疗对象的实体瘤癌症的方法，所述方法包括：(a)施用在其细胞表面上表达嵌合T细胞抗原受体的基因修饰的T细胞，所述嵌合T细胞抗原受体包含异源结合结构域和细胞内信号传导结构域，所述异源结合结构域特异性结合在癌症的细胞表面上表达的肿瘤抗原，其中所述异源结合结构域与癌细胞表面上的肿瘤抗原的结合激活所述细胞内信号传导结构域和所述T细胞；和(b)施用表达异源免疫调节多肽的第一基因修饰的间充质干细胞，其中所述异源免疫调节多肽增强所述基因修饰的T细胞的癌细胞杀伤。在一个实施方案中，所述方法还包括在施用步骤之前，从对象切除实体瘤的步骤，其中所述切除产生先前被肿瘤组织占据的腔。在另一个实施方案中，所述第一基因修饰的间充质干细胞是全身性施用的。在另一个实施方案中，在通过切除所述肿瘤形成的腔中施用所述第一基因修饰的间充质干细胞。在另一个实施方案中，所述第一基因修饰的间充质干细胞被包封在基质中。在另一个实施方案中，所述基质允许细胞迁移出基质。在另一个实施方案中，所述基质包括合成的细胞外基质。在另一个实施方案中，所述基质包含巯基修饰的透明质酸和巯基反应性交联剂分子。在另一个实施方案中，所述巯基反应性交联剂分子是聚乙二醇二丙烯酸酯。在另一个实施方案中，所述异源免疫调节多肽是检查点抑制剂多肽。在另一个实施方案中，所述异源免疫调节多肽是白介素(IL)IL-12、IL-2、IL-5、IL-15、干扰素α、干扰素β、干扰素γ或它们的组合。在另一个实施方案中，所述检查点抑制剂多肽包含结合选自以下的检查点多肽的抗体或其抗原结合结构域：PD-L1、PD-1、CTLA-4、TIM-3、LAG-3或TIGIT。在另一个实施方案中，检查点抑制剂多肽包含结合PD-L1的抗体或其抗原结合结构域。在另一个实施方案中，所述异源结合结构域包含纳米抗体或scFv。在另一个实施方案中，特异性结合在癌症的细胞表面上表达的肿瘤抗原的所述异源结合结构域特异性结合选自以下的多肽：EGFRvIII、HER2、CD133、EGFR、IL13RA2、HER2、CSF1-R、L1-CAM、CTAG1B、GD2和EGFR。在另一个实施方案中，所述异源结合结构域特异性结合EGFRvIII。在另一个实施方案中，所述基因修饰的T细胞被包封在基质中。在另一个实施方案中，所述基质允许细胞迁移出基质。在另一个实施方案中，将所述基因修饰的T细胞施用于通过切除所述肿瘤形成的所述腔。在另一个实施方案中，所述癌症是转移性癌症。在另一个实施方案中，所述癌症是成胶质细胞瘤、神经胶质瘤、成神经管细胞瘤、乳腺癌、黑素瘤或非小细胞肺癌。在另一个实施方案中，所述第一基因修饰的间充质干细胞另外表达异源多肽，或编码并递送溶瘤病毒，所述异源多肽选自：TRAIL、EGFR纳米抗体-TRAIL融合物、血小板反应蛋白(TSP)-1、HSV-TK、胞嘧啶脱氨酶(CD)或它们的组合。在另一个实施方案中，所述溶瘤病毒是oHSV、oHSV-TRAIL、oHSV粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)或溶瘤腺病毒。在另一个实施方案中，所述方法还包括施用第二基因修饰的间充质干细胞，所述第二基因修饰的间充质干细胞表达不同于由所述第一间充质干细胞表达的异源多肽的异源多肽，或编码并递送溶瘤病毒，或它们的组合，其中所述异源多肽选自：白介素(IL)-12、IL-2、IL-5、IL-15、TRAIL、EGFR纳米抗体-TRAIL融合物、血小板反应蛋白(TSP)-1、干扰素α、干扰素β、干扰素γ、HSV-TK和胞嘧啶脱氨酶(CD)。在另一个实施方案中，所述溶瘤病毒是oHSV、oHSV-TRAIL、oHSV-GMCSF或溶瘤腺病毒。在另一个实施方案中，所述第二基因修饰的间充质干细胞被包封在基质中。在另一个实施方案中，所述基质允许细胞迁移出所述基质。在另一个实施方案中，在肿瘤切除6天内施用所述基因修饰的间充质干细胞和/或基因修饰的T细胞。本文所述技术的另一方面提供了组合物，其包含(a)在其细胞表面上表达嵌合T细胞抗原受体的基因修饰的T细胞，所述嵌合T细胞抗原受体包含异源结合结构域和细胞内信号传导结构域，所述异源结合结构域特异性结合在癌性肿瘤的细胞表面上表达的肿瘤抗原，其中所述异源结合结构域与癌细胞表面上的肿瘤抗原的结合激活所述细胞内信号传导结构域和所述T细胞；和(b)表达异源免疫调节多肽的第一基因修饰的间充质干细胞。在一个实施方案中，所述组合物还包含第二基因修饰的间充质干细胞，所述第二经基因修饰的间充质干细胞表达不同于由所述第一间基因修饰的MSC表达的异源多肽的异源多肽，或编码并表达溶瘤病毒、或它们的组合，其中所述异源多肽选自：TRAIL、EGFR纳米抗体-TRAIL融合物、血小板反应蛋白(TSP)-1、干扰素α、干扰素β、干扰素γ、HSV-TK、胞嘧啶脱氨酶(CD)。在另一个实施方案中，所述第一基因修饰的间充质干细胞和所述第二基因修饰的间充质干细胞，如果存在的话，被包封在基质中。在另一个实施方案中，所述基因修饰的T细胞被包封在基质中。在另一个实施方案中，所述基质允许细胞迁移出所述基质。在另一个实施方案中，所述异源免疫调节多肽是检查点抑制剂多肽。在另一个实施方案中，所述检查点抑制剂多肽包含结合选自以下的检查点多肽的抗体或其抗原结合结构域：PD-L1、PD-1、CTLA-4、TIM-3、LAG-3或TIGIT。在另一个实施方案中，所述检查点抑制剂多肽包含结合PD-L1的抗体或其抗原结合结构域。在另一个实施方案中，特异性结合在癌症的细胞表面上表达的肿瘤抗原的所述异源结合结构域特异性结合选自以下的多肽：EGFRvIII、HER2、CD133、EGFR、IL13RA2、HER2、CSF1-R、L1-CAM、CTAG1B、GD2和EGFR。在另一个实施本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.治疗对象的实体瘤癌症的方法，所述方法包括：/na.施用在其细胞表面上表达嵌合T细胞抗原受体的基因修饰的T细胞，所述嵌合T细胞抗原受体包含异源结合结构域和细胞内信号传导结构域，所述异源结合结构域特异性结合在癌症的细胞表面上表达的肿瘤抗原，其中所述异源结合结构域与癌细胞表面上的肿瘤抗原的结合激活所述细胞内信号传导结构域和所述T细胞；和/nb.施用表达异源免疫调节多肽的第一基因修饰的间充质干细胞，/n其中所述异源免疫调节多肽增强所述基因修饰的T细胞的癌细胞杀伤。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171122 US 62/590,0701.治疗对象的实体瘤癌症的方法，所述方法包括：
a.施用在其细胞表面上表达嵌合T细胞抗原受体的基因修饰的T细胞，所述嵌合T细胞抗原受体包含异源结合结构域和细胞内信号传导结构域，所述异源结合结构域特异性结合在癌症的细胞表面上表达的肿瘤抗原，其中所述异源结合结构域与癌细胞表面上的肿瘤抗原的结合激活所述细胞内信号传导结构域和所述T细胞；和
b.施用表达异源免疫调节多肽的第一基因修饰的间充质干细胞，
其中所述异源免疫调节多肽增强所述基因修饰的T细胞的癌细胞杀伤。


2.如权利要求1所述的方法，其还包括在施用步骤之前从对象切除实体瘤的步骤，其中所述切除产生先前被肿瘤组织占据的腔。


3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述第一基因修饰的间充质干细胞是全身性施用的。


4.如权利要求2所述的方法，其中在通过切除所述肿瘤形成的腔中施用所述第一基因修饰的间充质干细胞。


5.如权利要求1、2或4中任一项所述的方法，其中所述第一基因修饰的间充质干细胞被包封在基质中。


6.如权利要求5所述的方法，其中所述基质允许细胞迁移出所述基质。


7.如权利要求5或6所述的方法，其中所述基质包含合成的细胞外基质。


8.如权利要求5-7中任一项所述的方法，其中所述基质包含巯基修饰的透明质酸和巯基反应性交联剂分子。


9.如权利要求8所述的方法，其中所述巯基反应性交联剂分子是聚乙二醇二丙烯酸酯。


10.如权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述异源免疫调节多肽是检查点抑制剂多肽。


11.如权利要求1-10中任一项所述的方法，其中所述异源免疫调节多肽是白介素(IL)IL-12、IL-2、IL-5、IL-15、干扰素α、干扰素β、干扰素γ或它们的组合。


12.如权利要求10所述的方法，其中所述检查点抑制剂多肽包含结合选自以下的检查点多肽的抗体或其抗原结合结构域：PD-L1、PD-1、CTLA-4、TIM-3、LAG-3或TIGIT。


13.如权利要求10或11所述的方法，其中所述检查点抑制剂多肽包含结合PD-L1的抗体或其抗原结合结构域。


14.如权利要求1-13中任一项所述的方法，其中所述异源结合结构域包含纳米抗体或scFv。


15.如权利要求1-14中任一项所述的方法，其中特异性结合在癌症的细胞表面上表达的肿瘤抗原的所述异源结合结构域特异性结合选自以下的多肽：EGFRvIII、HER2、CD133、EGFR、IL13RA2、HER2、CSF1-R、L1-CAM、CTAG1B、GD2和EGFR。


16.如权利要求1-15中任一项所述的方法，其中所述异源结合结构域特异性结合EGFRvIII。


17.如权利要求1-16中任一项所述的方法，其中所述基因修饰的T细胞被包封在基质中。


18.如权利要求17所述的方法，其中所述基质允许细胞迁移出所述基质。


19.如权利要求2-18中任一项所述的方法，其中将所述基因修饰的T细胞施用至通过切除所述肿瘤形成的所述腔。


20.如权利要求1-19中任一项所述的方法，其中所述癌症是转移性癌症。


21.如权利要求1-20中任一项所述的方法，其中所述癌症是成胶质细胞瘤、神经胶质瘤、成神经管细胞瘤、乳腺癌、黑素瘤或非小细胞肺癌。


22.如权利要求1-21中任一项所述的方法，其中所述第一基因修饰的间充质干细胞另外表达异源多肽，或编码并递送溶瘤病毒，所述异源多肽选自：TRAIL、EGFR纳米抗体-TRAIL融合物、血小板反应蛋白(TSP)-1、HSV-TK、胞嘧啶脱氨酶(CD)或它们的组合。


23.如权利要求22所述的方法，其中所述溶瘤病毒是oHSV、oHSV-TRAIL、oHSV粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)或溶瘤腺病毒。


24.如权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：哈立德·沙阿，
申请(专利权)人：布里格姆及妇女医院股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US