一种同时测定凹叶景天中多组分含量的方法技术

本发明专利技术提供了一种同时测定凹叶景天中多组分含量的方法，是在同一色谱条件下，同时对凹叶景天药材中所含的没食子酸、原儿茶酸、咖啡酸、阿魏酸、异槲皮苷、木犀草素六种化合物的高效液相色谱含量测定方法。本发明专利技术是一种可靠性高的测定方法，可快速、准确、同时测定凹叶景天中6种组分的含量，具有操作简便快捷，含量检测效率高的优点，填补了现有技术中缺乏高效液相色谱法同时测定凹叶景天中多组分含量方法的空白，为此领域的技术人员提供了应用基础和提示。

A method for simultaneous determination of multicomponent content in Sedum crenulatum

【技术实现步骤摘要】
一种同时测定凹叶景天中多组分含量的方法
本专利技术属于药品成份含量检测
，具体涉及一种同时测定凹叶景天中多组分含量的方法。
技术介绍
凹叶景天(SedumemarginatumMigo.)系指景天科景天属多年生肉质草本植物，又名为马牙半支、石板菜、打不死等。其始载于《本草纲目拾遗》，在《全国中草药汇编》、《湖南药物志》、《中国民族药志要》、《中华本草》、《中药大辞典》、《四川中药志》等均有收载，在我国主要分布于江苏、浙江、江西、福建、广西、湖北、四川等地区，其可全草供药用，味苦、酸，性凉，归心、肝经，具有清热解毒、止血和平肝的作用，可用于治蛇咬伤、黄疸、铁打损伤等病症。民间常以本品鲜品捣烂外敷，治疮疖、肿痛，内服用于吐血、便血、月经过多，在民间也有用其治肝炎等。其叶对生，先端圆而凹，近无柄，茎匍匐、易生根，喜于阴湿气候，主要生于较阴湿的水沟边、土坡岩石上、河边湿地等，因其具有生命力、适应性及耐受性强，耐寒、耐干旱，极易栽种等优势，在我国福建、安徽、广州、苏州、徐州等地区也相继引种栽培，具有一定的药用和观赏两用价值。凹叶景天包含了没食子酸、原儿茶酸、咖啡酸、阿魏酸、异槲皮苷和木犀草素等多种组分，为了有效的研究凹叶景天的药物作用，需要对凹叶景天中各种组分进行含量测定，目前关于利用高效液相色谱法测定凹叶景天内没食子酸、原儿茶酸、咖啡酸、阿魏酸、异槲皮苷和木犀草素等多种组分含量的方法未见报道，也没有一种可以同时在同一色谱条件下测定多种组分含量的测定方法，导致了含量检测效率低的问题。
技术实现思路
<br>本专利技术的目的在于：针对上述存在的不足，提供一种同时测定凹叶景天中多组分含量的方法，可以同时在同一色谱条件下的方法测定凹叶景天乙酸乙酯部位干浸膏样品中没食子酸、原儿茶酸、咖啡酸、阿魏酸、异槲皮苷和木犀草素的各组分含量，具有操作简便快捷，准确、灵敏度高、含量检测效率高的优点。为了实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：一种同时测定凹叶景天中多组分含量的方法，所述多组分含量测定方法是在同一色谱条件下，同时对凹叶景天药材中所含的没食子酸、原儿茶酸、咖啡酸、阿魏酸、异槲皮苷、木犀草素六种化合物的高效液相色谱含量测定方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：制备对照品溶液：分别称取没食子酸对照品、原儿茶酸对照品、咖啡酸对照品、阿魏酸对照品、异槲皮苷对照品和木犀草素对照品，精密称定，加甲醇溶解并定容，然后分别制成没食子酸对照品溶液、原儿茶酸对照品溶液、咖啡酸对照品溶液、阿魏酸对照品溶液、异槲皮苷对照品溶液和木犀草素对照品溶液；S2：制备凹叶景天供试品溶液：取凹叶景天药材粗粉，制成凹叶景天乙酸乙酯部位干浸膏样品置于干燥器中保存备用；取凹叶景天乙酸乙酯部位干浸膏样品0.1g，精密称定，置2mL离心管中，加甲醇超声溶解，转移至2mL容量瓶中并定容至刻度，经0.45μm微孔滤膜滤过，即得凹叶景天供试品溶液；S3：色谱条件：色谱柱为美国赛默飞ThermoODS-2HYPERSIL色谱柱；流动相为乙腈-0.1％磷酸水、柱温25℃～35℃、流速0.8mL/min，采用波长转换，检测波长为255～355nm；高效液相色谱法同时测定凹叶景天多组分含量：分别取没食子酸对照品溶液、原儿茶酸对照品溶液、咖啡酸对照品溶液、阿魏酸对照品溶液、异槲皮苷对照品溶液、木犀草素对照品溶液和凹叶景天供试品溶液，按所述色谱条件、进样量5μL、梯度洗脱时间130min，依法测定各样品峰面积，然后根据外标法计算凹叶景天乙酸乙酯部位干浸膏样品中没食子酸、原儿茶酸、咖啡酸、阿魏酸、异槲皮苷、木犀草素的含量。进一步地，所述色谱条件为：流动相为乙腈-0.1％磷酸水、柱温30℃、流速0.8mL/min，采用波长转换，检测波长为：第0～13min的波长为260nm、第14～47min的波长为321nm、第48～65min的波长为255nm、第66～125min的波长为355nm。进一步地，所述梯度洗脱按以下参数进行：流速0.8mL/min，流动相由B和D组成，其中B体积分数为0.1％磷酸，D为乙腈；梯度洗脱以体积百分比计算为0min，B：97％、D：3％；20min，B：94％、D：6％；45min，B：88％、D：12％；65min，B：86％、D：14％；125min,B：65％、D：35％；130min,B：97％、D：3％。进一步地，所述S1制备对照品溶液包括以下步骤：分别称取没食子酸对照品、原儿茶酸对照品、咖啡酸对照品、阿魏酸对照品、异槲皮苷对照品和木犀草素对照品，精密称定，加甲醇溶解并定容，分别制成单一的对照品储备液；精密吸取上述6个对照品储备液制成浓度分别为没食子酸0.2892mg/mL、原儿茶酸0.1721mg/mL、咖啡酸0.2189mg/mL、阿魏酸0.0926mg/mL、异槲皮苷0.5016mg/mL、木犀草素0.0625mg/mL，即得。进一步地，所述S2凹叶景天供试品溶液包括以下步骤：取凹叶景天药材粗粉150g，用凹叶景天药材粗粉10倍量的70％乙醇浸泡30min，回流提取3次，纱布过滤，合并提取液，于旋转蒸发仪减压浓缩，即得到70％乙醇提取物浓缩液；再用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇分别对70％乙醇提取物浓缩液萃取6-7次，减压浓缩后将形成的石油醚萃取液、乙酸乙酯萃取液、正丁醇萃取液和萃取后剩下的水层分别置于水浴锅中水浴加热挥发成浸膏，再分别进行减压干燥，制得石油醚部位干浸膏样品、乙酸乙酯部位干浸膏样品、正丁醇部位干浸膏样品及水部位干浸膏样品，分别置于干燥器中保存备用；取乙酸乙酯部位干浸膏样品0.1g，精密称定，置2mL离心管中，加甲醇超声溶解，转移至2mL容量瓶中并定容至刻度，经0.45μm微孔滤膜滤过，即得凹叶景天供试品溶液。进一步地，所述高效液相色谱法同时测定凹叶景天多组分含量包括以下步骤：取不同产地的凹叶景天按S2步骤制成的乙酸乙酯部位干浸膏样品0.1g，精密称定，分别按S1和S2的步骤制备没食子酸对照品溶液、原儿茶酸对照品溶液、咖啡酸对照品溶液、阿魏酸对照品溶液、异槲皮苷对照品溶液和木犀草素对照品溶液和凹叶景天供试品溶液，按所述色谱条件、进样量5μL、梯度洗脱时间130min，依法测定各样品峰面积；根据外标法计算凹叶景天乙酸乙酯部位干浸膏样品中没食子酸、原儿茶酸、咖啡酸、阿魏酸、异槲皮苷、木犀草素的含量，测得不同产地凹叶景天乙酸乙酯部位干浸膏样品中没食子酸的含量为1.423～5.333mg/mL，原儿茶酸的含量为0.6927～3.200mg/mL，咖啡酸的含量为0.7938～4.100mg/mL，阿魏酸的含量为0.4717～0.7374mg/mL，异槲皮苷的含量为0.6893～9.375mg/mL，木犀草素的含量为0.0942～1.258mg/mL。进一步地，所述步骤S2中3次回流提取的时间分别为2h、1.5h、1h。进一步地，所述步骤S2中的水浴锅温度控制在60℃以下。进一步地，所述步骤S2中的超声溶解速度为13000r/min，离心时间为10min本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种同时测定凹叶景天中多组分含量的方法，所述多组分含量测定方法是在同一色谱条件下，同时对凹叶景天药材中所含的没食子酸、原儿茶酸、咖啡酸、阿魏酸、异槲皮苷、木犀草素六种化合物的高效液相色谱含量测定方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1：制备对照品溶液：分别称取没食子酸对照品、原儿茶酸对照品、咖啡酸对照品、阿魏酸对照品、异槲皮苷对照品和木犀草素对照品，精密称定，加甲醇溶解并定容，然后分别制成没食子酸对照品溶液、原儿茶酸对照品溶液、咖啡酸对照品溶液、阿魏酸对照品溶液、异槲皮苷对照品溶液和木犀草素对照品溶液；/nS2：制备凹叶景天供试品溶液：取凹叶景天药材粗粉，制成凹叶景天乙酸乙酯部位干浸膏样品置于干燥器中保存备用；取凹叶景天乙酸乙酯部位干浸膏样品0.1g，精密称定，置2mL离心管中，加甲醇超声溶解，转移至2mL容量瓶中并定容至刻度，经0.45µm微孔滤膜滤过，即得凹叶景天供试品溶液；/nS3：色谱条件：色谱柱为美国赛默飞Thermo ODS-2 HYPERSIL色谱柱；流动相为乙腈-0.1%磷酸水、柱温25℃～35℃、流速0.8 mL/min，采用波长转换，检测波长为255～355nm；/n高效液相色谱法同时测定凹叶景天多组分含量：分别取没食子酸对照品溶液、原儿茶酸对照品溶液、咖啡酸对照品溶液、阿魏酸对照品溶液、异槲皮苷对照品溶液、木犀草素对照品溶液和凹叶景天供试品溶液，按所述色谱条件、进样量5μL、梯度洗脱时间130min，依法测定各样品峰面积，然后根据外标法计算凹叶景天乙酸乙酯部位干浸膏样品中没食子酸、原儿茶酸、咖啡酸、阿魏酸、异槲皮苷、木犀草素的含量。/n...

【技术特征摘要】
20191217 CN 20191129818621.一种同时测定凹叶景天中多组分含量的方法，所述多组分含量测定方法是在同一色谱条件下，同时对凹叶景天药材中所含的没食子酸、原儿茶酸、咖啡酸、阿魏酸、异槲皮苷、木犀草素六种化合物的高效液相色谱含量测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：制备对照品溶液：分别称取没食子酸对照品、原儿茶酸对照品、咖啡酸对照品、阿魏酸对照品、异槲皮苷对照品和木犀草素对照品，精密称定，加甲醇溶解并定容，然后分别制成没食子酸对照品溶液、原儿茶酸对照品溶液、咖啡酸对照品溶液、阿魏酸对照品溶液、异槲皮苷对照品溶液和木犀草素对照品溶液；
S2：制备凹叶景天供试品溶液：取凹叶景天药材粗粉，制成凹叶景天乙酸乙酯部位干浸膏样品置于干燥器中保存备用；取凹叶景天乙酸乙酯部位干浸膏样品0.1g，精密称定，置2mL离心管中，加甲醇超声溶解，转移至2mL容量瓶中并定容至刻度，经0.45µm微孔滤膜滤过，即得凹叶景天供试品溶液；
S3：色谱条件：色谱柱为美国赛默飞ThermoODS-2HYPERSIL色谱柱；流动相为乙腈-0.1%磷酸水、柱温25℃～35℃、流速0.8mL/min，采用波长转换，检测波长为255～355nm；
高效液相色谱法同时测定凹叶景天多组分含量：分别取没食子酸对照品溶液、原儿茶酸对照品溶液、咖啡酸对照品溶液、阿魏酸对照品溶液、异槲皮苷对照品溶液、木犀草素对照品溶液和凹叶景天供试品溶液，按所述色谱条件、进样量5μL、梯度洗脱时间130min，依法测定各样品峰面积，然后根据外标法计算凹叶景天乙酸乙酯部位干浸膏样品中没食子酸、原儿茶酸、咖啡酸、阿魏酸、异槲皮苷、木犀草素的含量。


2.根据权利要求1所述的一种同时测定凹叶景天中多组分含量的方法，其特征在于，所述色谱条件为：流动相为乙腈-0.1%磷酸水、柱温30℃、流速0.8mL/min，采用波长转换，检测波长为：第0～13min的波长为260nm、第14～47min的波长为321nm、第48～65min的波长为255nm、第66～125min的波长为355nm。


3.根据权利要求2所述的一种同时测定凹叶景天中多组分含量的方法，其特征在于，所述梯度洗脱按以下参数进行：流速0.8mL/min，流动相由B和D组成，其中B体积分数为0.1%磷酸，D为乙腈；
梯度洗脱以体积百分比计算为0min，B：97%、D：3%；20min，B：94%、D：6%；45min，B：88%、D：12%；65min，B：86%、D：14%；125min,B：65%、D：35%；130min,B：97%、D：3%。


4.根据权利要求3所述的一种同时测定凹叶景天中多组分含量的方法，其特征在于，所述S1制备对照品溶液包括以下步骤：
分别称取没食子酸对照品、原儿茶酸对照品、咖啡酸对照品、阿魏酸对照品、异...

【专利技术属性】
技术研发人员：丘琴，甄丹丹，符传武，丘奕定，甄汉深，梁爽，陈明伟，黄凤音，
申请(专利权)人：广西中医药大学，
类型：发明
国别省市：广西;45