一种罗汉果甜苷Ⅴ的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种罗汉果甜苷Ⅴ的制备方法，包括如下步骤：步骤一，鲜果干燥：新鲜的成熟期罗汉果干燥处理；步骤二，制备浸膏：罗汉果干果粉碎，用乙醇溶液浸润提取，过滤后将滤液浓缩，制得浸膏；步骤三，洗脱浓缩：将浸膏稀释，脱色过滤后，注入大孔树脂柱中洗脱，洗脱液浓缩干燥，制得罗汉果总苷；步骤四，超滤除杂：罗汉果总苷溶于适量水中，通过超滤系统进行过滤，得到的滤液喷雾干燥，制得罗汉果甜苷Ⅴ半成品；步骤五，洗脱干燥：罗汉果甜苷Ⅴ半成品用适量水溶解，注入聚酰胺柱中，通过调节乙醇浓度进行梯度洗脱，收集最后一道洗脱后的洗脱液，浓缩至原有体积的十分之一，再加入适量水调节溶液密度，喷雾干燥，即制得罗汉果甜苷Ⅴ成品。

A method for the preparation of Mogroside V

【技术实现步骤摘要】
一种罗汉果甜苷Ⅴ的制备方法
本专利技术属于植物提取领域，具体涉及一种罗汉果甜苷Ⅴ的制备方法。
技术介绍
罗汉果，葫芦科罗汉果属多年生藤本植物的果实，心形叶，雌雄异株，花期5-6月，果期是我国特有的传统保健药材，自被使用时起，就被认为具有止咳、祛痰、润肺、降血糖、保肝等作用，是首批被国家卫生部公布的药食两用中药材。罗汉果产地主要位于广西桂北地区，湖南，广东，江西，贵州部分地区也有出产。罗汉果成熟过程包括生长期，花期与果期。其中罗汉果的花期为6-8月，从授粉开始至罗汉果长成大约需70d，据有关研究表明，当罗汉果长至85d，以上时，其中的罗汉果甜苷Ⅴ含量将达到最大值。罗汉果果期为8-10月，成熟罗汉果在未及时冷藏保鲜处理的情况下只能保存约5-7d。有研究表明，罗汉果中最主要的有效成分为葫芦烷型四环三萜皂苷类化合物，其中以罗汉果甜苷Ⅴ为主，是一类甜味很强的非糖类物质，其甜度约为蔗糖的300倍，作为一种食品添加剂被广泛使用。我国于1996年7月的全国食品添加剂标准化技术委员会第十七次会议上批准该产品作为食品添加剂使用。目前，允许罗汉果甜苷作为食品添加剂使用的国家还有：日本、韩国、泰国、新加坡、英国等。现在，科学家正在设计，利用高甜度的天然糖苷与低甜度的低聚糖等互相搭配，取长补短，生产出色香味俱佳又甜度适中的保健复合甜味剂。由于罗汉果是一种不耐保存的植物果实，即使是在冷藏情况下，罗汉果中的罗汉果甜苷Ⅴ也会由于自身酶的左右而分解，目前罗汉果甜苷Ⅴ的生产主要通过鲜果直接提取，导致生产受果期所限，产能受限，年产量低，无法满足国内外对罗汉果甜苷Ⅴ的巨大市场需求，亟待开发一种新的罗汉果甜苷Ⅴ的制备方法，摆脱对罗汉果鲜果的依赖，延长生产周期，提高产量。
技术实现思路
本专利技术针对现有制备罗汉果甜苷Ⅴ的不足之处，通过将鲜果干制，提供一种以罗汉果干果为原料，制备罗汉果甜苷Ⅴ的方法。本专利技术提供了一种罗汉果甜苷Ⅴ的制备方法，包括如下步骤：（1）鲜果干燥：将新鲜的成熟期罗汉果干燥处理；优选的，所述罗汉果为日龄在85d~100d的成熟罗汉果，当果龄大于100d时，罗汉果开始腐败；优选的，所述干燥前在罗汉果表面扎孔，所述干燥方法包括真空干燥法，微波干燥法，鼓风干燥法和远红外干燥法；优选的，干燥方法为真空、微波混用干燥法；优选的，所述扎孔的孔径为2.0~2.5mm，扎孔深度为1.5~2.0cm，所述干燥温度为55℃~65℃，当温度大于70℃时，罗汉果总苷与罗汉果甜苷Ⅴ的含量开始下降，干燥后罗汉果的含水量小于5%，以易于长期存储；（2）制备浸膏：将步骤（1）得到的罗汉果干果进行粉碎，用乙醇溶液浸润提取，过滤后将滤液浓缩，制得浸膏；优选的，干果粉碎后颗粒过20目筛网，用乙醇溶液分两次浸润提取，室温负压过滤，合并滤液，滤液浓缩在高温负压条件下进行。优选的，所述两次浸润提取的参数为：第一次浸润提取的乙醇浓度为60~80%，料液比为1:15~1:25，温度为60℃~80℃，时间为60~90min，第二次浸润提取的乙醇浓度为60~80%，料液比为1:10~1:15，温度为60℃~80℃，时间为30~60min；所述滤液浓缩的参数为：温度为70℃~80℃，压强为-0.06MPa~-0.08MPa，体积浓缩比为10；步骤（2）得到的浸膏中，罗汉果总苷含量为12~15%，罗汉果甜苷Ⅴ的含量为3~8%；（3）洗脱浓缩：将步骤（2）制备的浸膏稀释，脱色过滤后，注入大孔树脂柱中进行洗脱，洗脱液浓缩干燥，制得罗汉果总苷；优选的，用水对浸膏进行稀释溶解，并加入适量活性炭脱色一定时间，脱色后的浸膏溶液减压过滤后，以一定流速注入到LX-T5大孔树脂柱中，设置洗脱参数，用水和不同浓度的乙醇溶液依次洗脱，收集最后一道洗脱后的洗脱液，并将洗脱液在一定条件下进行浓缩干燥。优选的，所述溶解浸膏用水量为浸膏体积的15~20倍，所述活性炭的加入量为1~1.5g/100ml水，所述脱色时间为30~60min，所述浸膏溶液入柱流速为1倍浸膏体积/h；所述洗脱参数为：用水、20~30%乙醇溶液和70~80%乙醇溶液作为洗脱液依次洗脱，单次洗脱的洗脱液用量为浸膏体积的15~25倍，洗脱流速为1~1.5倍浸膏体积/h；所述洗脱液浓缩参数为：温度为65℃~75℃，压强为-0.06MPa~-0.08MPa，体积浓缩比为10；所述干燥为真空干燥。步骤（3）得到的罗汉果总苷中，罗汉果总苷含量为85~95%，罗汉果甜苷Ⅴ的含量为47~65%；（4）超滤除杂：将步骤（3）制得的罗汉果总苷溶于适量水中，通过超滤系统进行过滤，得到的滤液喷雾干燥，制得罗汉果甜苷Ⅴ半成品；优选的，所述溶解罗汉果总苷的用水量为罗汉果总苷体积的5~10倍，所述超滤系统截留分子量为3000，所述超滤系统过滤的参数为：过滤压力为1.0~2.0MPa，过滤温度为15℃~25℃，滤液的电导率不大于1000µs/cm；所述喷雾干燥的参数为：入口温度为180℃~190℃，出口温度为90℃~100℃。步骤（4）中得到的罗汉果甜苷Ⅴ半成品中，罗汉果甜苷Ⅴ含量为73~86%；（5）洗脱干燥：将步骤（4）中制得的罗汉果甜苷Ⅴ半成品用适量水溶解，注入聚酰胺柱中，通过调节乙醇浓度进行梯度洗脱，收集最后一道洗脱后的洗脱液，将收集的洗脱液浓缩至原有体积的十分之一，再加入适量水调节溶液密度，喷雾干燥，即制得罗汉果甜苷Ⅴ成品。优选的，所述溶解罗汉果甜苷Ⅴ半成品的用水量为罗汉果甜苷Ⅴ半成品体积的2~4倍；所述梯度洗脱的参数为：用20~30%乙醇溶液、45~55%乙醇溶液、75~85%乙醇溶液作为洗脱液依次洗脱，洗脱流速为0.5~2BV/h，单次洗脱的洗脱液用量为15-20BV；所述加水调节后溶液密度为1.10~1.16g/cm3，所述喷雾干燥的参数为：入口温度为180℃~190℃，出口温度为90℃~100℃。步骤（5）中得到的罗汉果甜苷Ⅴ成品中，罗汉果甜苷Ⅴ含量为98%以上。本专利技术中的BV指料液比，意为相对于1kg固体原料所需溶液的体积，即单次洗脱液用量体积（L）为罗汉果甜苷Ⅴ半成品质量（Kg）的倍数；洗脱流速BV/h，意为每小时通过的溶液的体积（L）为原料质量（Kg）的倍数，即洗脱流速为每小时通过的洗脱液体积（L）为罗汉果甜苷Ⅴ半成品质量（Kg）的倍数。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：（1）通过鲜果干制，以干果为原料制备，打破了罗汉果甜苷Ⅴ的生产受罗汉果期影响的局限性，能连续生产，提高产品的产量，增强产品的竞争力；（2）利用鲜果干制方法，有效降低了罗汉果自身酶解反应，通过干果制备浸膏，再通过大孔树脂柱洗脱，超滤系统过滤干燥、以及聚酰胺树脂柱梯度洗脱，工艺流程短，所需时间少，分离效果明显，产率高，制备的罗汉果甜苷Ⅴ产品外观颜色纯正，无杂色，收率与含量均高，其中收率可达到1.7~2.3%，转化率高达94%；（3）使用的有机溶剂仅为乙醇，且大部分乙醇在减压浓缩时回收重复利用，对环境本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种罗汉果甜苷Ⅴ的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：/n（1）鲜果干燥：将新鲜的成熟期罗汉果干燥处理；/n（2）制备浸膏：将步骤（1）得到的罗汉果干果进行粉碎，用乙醇溶液浸润提取，过滤后将滤液浓缩，制得浸膏；/n（3）洗脱浓缩：将步骤（2）制备的浸膏稀释，脱色过滤后，注入大孔树脂柱中进行洗脱，洗脱液浓缩干燥，制得罗汉果总苷；/n（4）超滤除杂：将步骤（3）制得的罗汉果总苷溶于适量水中，通过超滤系统进行过滤，得到的滤液喷雾干燥，制得罗汉果甜苷Ⅴ半成品；/n（5）洗脱干燥：将步骤（4）中制得的罗汉果甜苷Ⅴ半成品用适量水溶解，注入聚酰胺柱中，通过调节乙醇浓度进行梯度洗脱，收集最后一道洗脱后的洗脱液，将收集的洗脱液浓缩至原有体积的十分之一，再加入适量水调节溶液密度，喷雾干燥，即制得罗汉果甜苷Ⅴ成品。/n

【技术特征摘要】
1.一种罗汉果甜苷Ⅴ的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
（1）鲜果干燥：将新鲜的成熟期罗汉果干燥处理；
（2）制备浸膏：将步骤（1）得到的罗汉果干果进行粉碎，用乙醇溶液浸润提取，过滤后将滤液浓缩，制得浸膏；
（3）洗脱浓缩：将步骤（2）制备的浸膏稀释，脱色过滤后，注入大孔树脂柱中进行洗脱，洗脱液浓缩干燥，制得罗汉果总苷；
（4）超滤除杂：将步骤（3）制得的罗汉果总苷溶于适量水中，通过超滤系统进行过滤，得到的滤液喷雾干燥，制得罗汉果甜苷Ⅴ半成品；
（5）洗脱干燥：将步骤（4）中制得的罗汉果甜苷Ⅴ半成品用适量水溶解，注入聚酰胺柱中，通过调节乙醇浓度进行梯度洗脱，收集最后一道洗脱后的洗脱液，将收集的洗脱液浓缩至原有体积的十分之一，再加入适量水调节溶液密度，喷雾干燥，即制得罗汉果甜苷Ⅴ成品。


2.根据权利要求1所述的一种罗汉果甜苷Ⅴ的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中干燥前在罗汉果表面扎孔，所述干燥方法包括真空干燥法、微波干燥法、鼓风干燥法和远红外干燥法。


3.根据权利要求2所述的一种罗汉果甜苷Ⅴ的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中扎孔的孔径为2.0~2.5mm，扎孔深度为1.5~2.0cm，所述干燥的温度为55℃~65℃，干燥后罗汉果的含水量小于5%。


4.根据权利要求1所述的一种罗汉果甜苷Ⅴ的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中干果粉碎后颗粒过20目筛网，用乙醇溶液分两次浸润提取，室温减压过滤，合并滤液，滤液浓缩在高温负压条件下进行。


5.根据权利要求4所述的一种罗汉果甜苷Ⅴ的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中所述两次浸润提取的参数为：第一次浸润提取的乙醇浓度为60~80%，料液比为1:15~1:25，温度为60℃~80℃，时间为60~90min，第二次浸润提取的乙醇浓度为60~80%，料液比为1:10~1:15，温度为60℃~80℃，时间为30~60min；所述滤液浓缩的参数为：温度为70℃~80℃，压强为-0.06MPa~-0....

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋亦轩，莫卓群，冯博文，
申请(专利权)人：永州华茂生物科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43