抗IL-17A抗体及其应用制造技术

本发明专利技术提供了以高亲和力与IL‑17A特异性结合的抗体或其功能性片段。还提供了编码本发明专利技术抗体或其功能性片段的核酸分子，用于表达本发明专利技术抗体或其功能性片段的表达载体和宿主细胞，以及本发明专利技术抗体或其功能性片段的生产方法。本发明专利技术还提供了包含本发明专利技术抗体或其功能性片段的药物组合物，以及使用本发明专利技术的抗体或其功能性片段治疗免疫功能失调性疾病的方法。

Anti-il-17a antibody and its application

【技术实现步骤摘要】
抗IL-17A抗体及其应用
本专利技术涉及特异性结合IL-17A的抗体及其抗原结合片段。本专利技术更具体地涉及抑制IL-17A介导的生物活性的抗体及其抗原结合片段，以及使用所述抗体或其抗原结合片段的组合物和治疗相关疾病的方法。本专利技术更具体地涉及应用抗IL-17A抗体或其抗原结合片段来治疗免疫性病理性疾病，所述疾病包括自身免疫性和炎性疾病，诸如类风湿性关节炎、银屑病、强制性脊柱炎、多发性硬化症、系统性红斑狼疮(SLE)、狼疮性肾炎或慢性阻塞性肺病、哮喘、感染性肉芽肿、囊性纤维化或癌症。
技术介绍
白细胞介素17(Interleukin17,IL-17)，也称为CTLA-8或IL-17A,在免疫系统中扮演着关键的协调作用。IL-17家族共六个成员，包括IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E和IL-17F，都含有至关重要的4个高度保守的半胱氨酸残基，但成员之间生物学效应差异较大，其中，IL-17A和IL-17F同源性和生物学功能最接近，目前研究也最深入。体内表达的IL-17A具有23个氨基酸的N-末端信号肽，其经切割产生成熟的IL-17A。成熟的IL-17A通过二硫键连接，一般以同源二聚体形式分泌与存在，有时也与IL-17F连接形成异源二聚体IL-17AF。一般IL-17A或IL-17指IL-17A同源二聚体蛋白，其主要由辅助性T细胞17(Thelper17,Thl7)产生，也可以由其它免疫细胞如γδT细胞、LTi(LymphoidTissueinducercells)、ILCs(InnateLymphoidCells)和NKT(NaturalKillerT)细胞合成分泌(CuaDJ,TatoCM.Naturereviews.2010,10:479–489)。IL-17A的表达调控非常复杂，研究发现细胞因子IL-6、IL-1β和TGFβ等诱导初始CD4+T细胞分化为Th17，但此时Th17细胞稳定性弱，分泌少量IL-17A，其组织损伤作用小；当IL-23存在时，其通过促进Th17细胞稳定性并持续分泌IL-17A、上调促炎因子(IL-22、CSF-2和IFN-γ)和下调抑炎因子(IL-2、IL-27和IL-12)表达等途径，引起炎性爆发和组织损伤(McGeachyMJ,etal.Natureimmunology.2009,10:314–324)。所以，当组织中IL-23异常表达时，IL-17A途径在组织损伤中发挥着关键性的作用。IL-17一般定点分泌，在局部组织中与靶细胞表面的IL-17受体(IL-17recptor，IL-17R)结合发挥效应。IL-17R家族包括IL-17RA、IL-17RB、IL-17RC、IL-17RD及IL-17RE五个成员，广泛表达于多种细胞膜上(IwakuraY,etal.Immunity.2011；34:149–162)。IL-17主要与非造血细胞来源的细胞(如上皮细胞、间质细胞)表面的IL-17RA/IL-17RC复合体结合发挥效应(IshigameH,etal.Immunity.2009；30:108–119)，促进细胞分泌细胞因子(诸如IL-6、G-CSF、GM-CSF、IL-10、TGF-β、TNF-α)、趋化因子(包括IL-8、CXCL1和MCP-1)和前列腺素(例如，PGE2)，诱导中性粒细胞和巨噬细胞聚集，释放活性氧类物质(ROS)而损伤组织(StarkMA,etal.Immunity.2005；22:285–294)。自身免疫性疾病严重威胁着人类的健康，如银屑病、类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、克罗恩病、多发性硬化病等。研究发现，IL-17的分泌失调与该类疾病发生发展密切相关。靶向IL-17的抗体通过抑制IL-17-IL-17R信号通路，能有效地缓解自身免疫性疾病的症状(SarahL,etal.NatRevImmunol.2014,14(9):585–600)。诺华公司开发的Cosentyx(secukinumab)是全球首个IL-17单抗，获批的适应症包括中度至重度斑块型银屑病(plaquepsoriasis)，为广大银屑病群体提供一个重要的一线生物治疗选择。但是，开发结构不同、疗效更优、适应症更广等不同特性的抗IL-17抗体，治疗银屑病、类风湿性关节、强直性脊柱炎等自身免疫相关病症以及IL-17相关的其它疾病具有迫切的需求和重要的意义。专利技术概述本专利技术提供一种能特异性结合人IL-17A的抗体或其抗原结合片段，其包含至少一个选自SEQIDNO：1-24、60-65的互补决定区(CDR)序列。在一个实施方式中，本专利技术所述的抗体或其抗原结合片段，其包含至少一个选自SEQIDNO：1-3、4-6、7-9、10-12或60-62的重链CDR结构域和/或至少一个选自SEQIDNO：13-15、16-18、19-21、22-24或63-65的轻链CDR结构域。在一个实施方式中，本专利技术所述的抗体或其抗原结合片段，包含重链可变区(VH),其特征为所述的重链可变区包含至少一个选自SEQIDNO：1、4、7、10或60的HCDR1，至少一个选自SEQIDNO：2、5、8、11或61的HCDR2，和至少一个选自SEQIDNO：3、6、9、12或62的HCDR3。在一个实施方式中，本专利技术所述的抗体或其抗原结合片段，包含重链可变区(VH),其特征为所述的重链可变区包含的HCDR1、HCDR2和HCDR3氨基酸序列选自以下序列中的一组：组号HCDR1HCDR2HCDR3ASEQIDNO：1SEQIDNO：2SEQIDNO：3BSEQIDNO：4SEQIDNO：5SEQIDNO：6CSEQIDNO：7SEQIDNO：8SEQIDNO：9DSEQIDNO：10SEQIDNO：11SEQIDNO：12ESEQIDNO：60SEQIDNO：61SEQIDNO：62在一个实施方式中，本专利技术所述的抗体或其抗原结合片段，其包含轻链可变区(VL),其特征为所述的轻链可变区包含至少一个选自SEQIDNO：13、16、19、22或63的LCDR1，至少一个选自SEQIDNO：14、17、20、23或64的LCDR2，和至少一个选自SEQIDNO：15、18、21、24或65的LCDR3。在一个实施方式中，本专利技术所述的抗体或其抗原结合片段，其包含轻链可变区(VL),其特征为所述的轻链可变区包含的LCDR1、LCDR2和LCDR3的氨基酸序列选自以下序列中的一组：组号LCDR1LCDR2LCDR3FSEQIDNO：13SEQIDNO：14SEQIDNO：15本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗体或其抗原结合片段，其能特异性结合IL-17A，其特征为包含至少一个选自序列编号SEQ ID NO：1-24、60-65的互补决定区(CDR)。/n

【技术特征摘要】
1.一种抗体或其抗原结合片段，其能特异性结合IL-17A，其特征为包含至少一个选自序列编号SEQIDNO：1-24、60-65的互补决定区(CDR)。


2.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其包含至少一个选自SEQIDNO：1-3、4-6、7-9、10-12或60-62的重链CDR结构域和/或至少一个选自SEQIDNO：13-15、16-18、19-21、22-24或63-65的轻链CDR结构域。


3.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，包含重链可变区(VH),其特征为所述的可变区包含至少一个选自序列编号SEQIDNO：1、4、7、10或60的HCDR1，至少一个选自序列编号SEQIDNO：2、5、8、11或61的HCDR2，和至少一个选自序列编号SEQIDNO：3、6、9、12或62的HCDR3。


4.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，包含重链可变区(VH),其特征为所述的可变区包含的HCDR1、HCDR2和HCDR3氨基酸序列选自以下序列中的一组：










组号
HCDR1
HCDR2
HCDR3


A
SEQIDNO：1
SEQIDNO：2
SEQIDNO：3


B
SEQIDNO：4
SEQIDNO：5
SEQIDNO：6


C
SEQIDNO：7
SEQIDNO：8
SEQIDNO：9


D
SEQIDNO：10
SEQIDNO：11
SEQIDNO：12


E
SEQIDNO：60
SEQIDNO：61
SEQIDNO：62








5.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其包含轻链可变区(VL),其特征为所述的可变区包含至少一个选自SEQIDNO：13、16、19、22或63的LCDR1，至少一个选自SEQIDNO：14、17、20、23或64的LCDR2，和至少一个选自SEQIDNO：15、18、21、24或65的LCDR3。


6.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其包含轻链可变区(VL),其特征为所述的可变区包含的LCDR1、LCDR2和LCDR3的氨基酸序列选自以下序列中的一组：










组号
LCDR1
LCDR2
LCDR3


F
SEQIDNO：13
SEQIDNO：14
SEQI...

【专利技术属性】
技术研发人员：姚剑，蒙丹，冯辉，姚盛，武海，
申请(专利权)人：上海君实生物医药科技股份有限公司，苏州君盟生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31