茶叶外囊泡的应用制造技术

本发明专利技术属于提取物技术领域，尤其涉及茶叶外囊泡的应用。本发明专利技术提供了茶叶外囊泡在化妆品或药品中的应用，实验结果表明，采用茶叶外囊泡应用于化妆品或药品中，使得化妆品或药品能够改善皮肤水分和油分，调节皮肤水油平衡，具有保湿、美白、抗氧化、晒后修复等多重功效，并且效果显著、刺激性小。

Application of tea outer vesicle

【技术实现步骤摘要】
茶叶外囊泡的应用
本专利技术属于提取物
，尤其涉及茶叶外囊泡的应用。
技术介绍
茶叶的成分复杂，含有茶多酚、嘌呤喊类、氨基酸、蛋白质、维生素类、矿物质元素、茶皂素等成分，上述成分具有营养、护肤和洁肤的功效，是各类日用品常用的功能性添加剂。但采用常规提取分离方法对茶叶进行提取物的提取分离，获取的成分比较单一，例如文献中可见单一提取茶叶中的茶多糖用于清除细胞内的自由基，儿茶素促进水分吸收而保湿，但基本都是单一指标，护肤作用有限，不能兼顾保湿、美白、抗氧化、修复等多重作用。细胞外囊泡(ExtracellularVesicles,EVs)是指从细胞膜上脱落或者由细胞分泌的双层膜结构的囊泡状小体，直径从40nm到1000nm不等，主要由微囊泡(Microvesicles,MVs)和外泌体(Exosomes,Exs)组成，微囊泡是细胞激活、损伤或凋亡后从细胞膜脱落的小囊泡，直径约为100nm到1000nm；外泌体由细胞内的多泡小体(multivesicularbodies)与细胞膜融合后以外分泌的形式释放到细胞外，直径约为40nm到100nm。细胞外囊泡最初被认为是细胞碎片，但EVs现在越来越被认为是细胞间通讯的重要载体。细胞外囊泡广泛、稳定地存在于机体中，是细胞进行物质运输、信号转导、实现生理功能的重要工具。然而，细胞外囊泡的应用价值还有待于开发。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供了茶叶外囊泡的应用，茶叶外囊泡应用于化妆品或药品中，使得化妆品或药品能够调节皮肤水油平衡，具有保湿、抗氧化、晒后修复等功效。本专利技术的具体技术方案如下：茶叶外囊泡在化妆品或药品中的应用。随着人们生活水平的提高，对美容护肤的要求越来越高，天然草本护肤的理念得到越来越多的关注和认可，天然植物类产品已经成为最受欢迎的护肤品。茶叶在我国有几千年的应用历史，其应用于美容护肤及治疗皮肤疾病的历史也很悠久。本专利技术中，茶叶外囊泡携带有细胞来源的各种生物分子，包括各种蛋白质、脂类、矿物质、维生素、DNA、mRNA等，实验结果表明，采用茶叶外囊泡应用于化妆品或药品中，使得化妆品或药品能够调节皮肤水油平衡，具有保湿、美白、抗氧化、晒后修复等多重功效，并且效果显著、刺激性小。优选的，所述茶叶外囊泡由茶叶提取得到；所述茶叶外囊泡的粒径为30nm～120nm。本专利技术中，茶叶为茶树的新鲜叶片，茶树为山茶科、山茶属灌木或小乔木Camelliasinensis(L.)O.Ktze.。茶叶可为各类绿茶、红茶、黑茶、白茶、黄茶、乌龙茶的原植物新鲜叶片。优选的，所述茶叶外囊泡的提取方法包括以下步骤：a)对茶叶进行提取得到茶叶原液，再进行离心，收集上清液；b)对所述上清液进行离心，收集沉淀，得到茶叶外囊泡粗提物；c)将所述茶叶外囊泡粗提物进行纯化和纳米级均质处理，得到所述茶叶外囊泡。优选的，步骤a)所述离心的速度为1000rpm～3000rpm，时间为50min～90min；步骤b)所述离心的速度为20000rpm～25000rpm，时间为3h～5h。优选的，步骤a)所述提取的提取试剂为囊泡隔离缓冲液；所述茶叶与所述提取试剂的质量体积比为(10～100)g：(30～400)mL。优选的，步骤c)所述纯化具体为：对所述茶叶外囊泡粗提物采用梯度浓度的Percoll水溶液进行离心，收集沉淀。本专利技术中，步骤c)纳米级均质处理具体为：采用高剪切乳化分散器进行均质化处理，获得颗粒均匀分布的茶叶外囊泡。优选的，步骤a)之后，步骤b)之前，还包括：对所述上清液进行浓缩。更具体的，茶叶外囊泡的提取方法包括以下步骤：1)将茶叶放入搅拌机中，加入囊泡隔离缓冲液进行榨取，得到茶叶原液，将茶叶原液以1000rpm～2000rpm转速离心20min～40min，弃去沉淀后收集得到第一上清液；2)将第一上清液以6000rpm～8000rpm转速离心60min～100min，弃去沉淀后，得到第二上清液；3)将第二上清液以20000rpm～25000rpm转速离心3h～5h，收集沉淀，采用PBS重悬沉淀得到茶叶外囊泡粗提物；4)将茶叶外囊泡粗提物置于离心管中，向离心管中依次加入浓度为15wt％～30wt％、30wt％～45wt％和30wt％～60wt％的Percoll水溶液(倾斜45度缓慢加入，可见明显分层)，将茶叶外囊泡置于顶层，再在4℃下80000～120,000×g离心2h～5h，收集沉淀，再采用高剪切乳化分散器进行均质化处理，通过Zeta电位及激光粒度分析仪检测粒径，确定提取物为茶叶外囊泡。茶叶外囊泡可用不同体积生理盐水重悬可以得到不同浓度的茶叶外囊泡，不同浓度的茶叶外囊泡用于不同剂型。本专利技术中，通过榨汁获取茶叶原液后，还可用差速离心的方法逐渐把大颗粒分离，直到提取分离出茶叶外囊泡粗提物。Percoll水溶液可以形成不一样的密度梯度，对茶叶外囊泡粗提物采用梯度Percoll水溶液，可通过离心力的作用分离不同分子量的物质，进而纯化茶叶纳米囊泡。本专利技术茶叶外囊泡的提取方法具有简单、高效、易行、纯度高等优点。需要说明的是，本专利技术茶叶外囊泡的提取不限于本专利技术提供的茶叶外囊泡的提取方法，可根据需要进行确定。本专利技术还提供一种具有保湿、抗衰老和/或晒后修复功效的化妆品，包括茶叶外囊泡。优选的，所述茶叶外囊泡在所述化妆品的质量分数为2％～10％。优选的，所述化妆品选自洁面乳、化妆水、乳液、精华、面膜、面霜、洗发液或沐浴乳。综上所述，本专利技术提供了茶叶外囊泡在化妆品或药品中的应用，实验结果表明，采用茶叶外囊泡应用于化妆品或药品中，使得化妆品或药品能够改善皮肤水分和油分，调节皮肤水油平衡，具有保湿、美白、抗氧化、晒后修复等多重功效，并且效果显著、刺激性小。具体实施方式本专利技术提供了茶叶外囊泡的应用，茶叶外囊泡应用于化妆品或药品中，使得化妆品或药品能够调节皮肤水油平衡，具有保湿、抗氧化、晒后修复等功效。下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。具体实施例中，茶叶采自华南农业大学茶园，品种为Camelliasinensis(L.)O.Ktze.。囊泡隔离缓冲液(VIB)的配置：配置1L，在蒸馏水中加入20mMMES(吗啡啉乙磺酸)水合物(4.264g)、2mM氯化钙(0.222g)和0.1M氯化钠(5.850g)后，加入氢氧化钠调整pH值为6，并在121℃高压20min，配置得到囊泡隔离缓冲液。Percoll溶液的配置：采用HBSS稀释100％Percoll，配置得到梯度浓度分别为33wt％、65wt％、80wt％和95wt％的Percoll溶液。...

【技术保护点】
1.茶叶外囊泡在化妆品或药品中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.茶叶外囊泡在化妆品或药品中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述茶叶外囊泡由茶叶提取得到；
所述茶叶外囊泡的粒径为30nm～120nm。


3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述茶叶外囊泡的提取方法包括以下步骤：
a)对茶叶进行提取得到茶叶原液，再进行离心，收集上清液；
b)对所述上清液进行离心，收集沉淀，得到茶叶外囊泡粗提物；
c)将所述茶叶外囊泡粗提物进行纯化和纳米级均质处理，得到所述茶叶外囊泡。


4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤a)所述离心的速度为1000rpm～3000rpm，时间为50min～90min；
步骤b)所述离心的速度为20000rpm～25000rpm，时间为3h～5h。


5.根据权利要求3所述的应用，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：何蓉蓉，梁磊，李怡芳，栗原博，段文君，陈珽锴，詹玉娇，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：广东;44