一种用于生猪防疫的复合微生态菌剂及其制备方法与应用技术

本发明专利技术属于畜禽防疫领域，具体涉及一种用于生猪防疫的复合微生态菌剂及其制备方法与应用。本发明专利技术将嗜酸乳杆菌、巴氏醋杆菌、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌的种子液按照质量比为5:5:4:3:3混合培养后，进一步发酵培养得到用于生猪防疫的复合微生态菌剂，该菌剂包含多种有益微生物构成的复合菌群，能抑制有害微生物繁殖，调节宿主体内微生态平衡，促进动物生长发育，提高免疫机能等作用，可用于生猪的疾病防控。

【技术实现步骤摘要】
一种用于生猪防疫的复合微生态菌剂及其制备方法与应用
本专利技术属于畜禽防疫领域，具体涉及一种用于生猪防疫的复合微生态菌剂及其制备方法与应用。
技术介绍
养殖业发展离不开抗生素，养猪场的疫病防治主要还是使用疫苗和抗生素等传统手段，而长期的抗生素使用也带来明显的弊端，不仅养殖成本提高，而且带来生猪耐药性问题、以及因猪肉抗生素残留带来的对人们健康威胁问题。因此，在生猪养殖中不添加抗生素与激素类药物，使用微生态菌剂、中草药制剂与新型抗菌药物，即细胞因子制剂等，既安全、效果好、使用方便，又无药物残留，不产生耐药性，能保障动物性食品的安全，这是养殖业今后的用药方向。
技术实现思路
为了克服现有技术的不足和缺点，本专利技术的首要目的在于提供一种用于生猪防疫的复合微生态菌剂，该菌剂包含多种有益微生物构成的复合菌群，能抑制有害微生物繁殖，调节宿主体内微生态平衡，促进动物生长发育，提高免疫机能等作用，可用于生猪的疾病防控。本专利技术的另一目的在于提供上述用于生猪防疫的复合微生态菌剂的制备方法。本专利技术的再一目的在于提供上述用于生猪防疫的复合微生态菌剂的应用。本专利技术的目的通过下述技术方案实现：一种用于生猪防疫的复合微生态菌剂，由嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus)、巴氏醋杆菌(Acetobacterpasteurianus)、酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)和沼泽红假单胞菌(Rhodopseudanonaspalustris)的种子液按照质量比为5:5:4:3:3混合培养后，进一步发酵培养得到；所述的用于生猪防疫的复合微生态菌剂的制备方法，包含如下步骤：(1)菌种活化培养：将冷冻保藏的嗜酸乳杆菌、巴氏醋杆菌、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌分别进行多次活化，得到嗜酸乳杆菌、巴氏醋杆菌、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌活化菌种；(2)液体菌种培养①将步骤(1)制得的嗜酸乳杆菌活化菌种接种于液体培养基中，37℃兼性厌氧培养2～3天，得到嗜酸乳杆菌种子液；②将步骤(1)制得的巴氏醋杆菌活化菌种接种于液体培养基中，摇床转速200r/min、温度30℃培养1～2天，得到巴氏醋杆菌种子液；③将步骤(1)制得的酿酒酵母活化菌种接种于液体培养基中，摇床转速150r/min、温度28℃培养2天，得到酿酒酵母种子液；④将步骤(1)制得的枯草芽孢杆菌活化菌种接种于液体培养基中，摇床转速200r/min、温度35℃培养1～2天，得到枯草芽孢杆菌种子液；⑤将步骤(1)制得的沼泽红假单胞菌活化菌种接种至液体培养基中，60瓦乌丝灯光照30～35℃厌氧培养5～7天，得到沼泽红假单胞菌种子液；(3)复合菌种培养：将步骤(2)制得的巴氏醋杆菌种子液、酿酒酵母菌种子液和枯草芽孢杆菌种子液接种至发酵培养基中，30℃摇床转速150～200r/min培养1～2天，然后再接种嗜酸乳杆菌种子液和沼泽红假单胞菌种子液，30～35℃厌氧培养3～5天，得到复合菌种；其中，嗜酸乳杆菌、巴氏醋杆菌、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌的质量比为5:5:4:3:3，总接种量为重量百分比10％；(4)成品培养：将步骤(3)制得的复合菌种按重量百分比5～8％接种至发酵培养基中，28～30℃密闭发酵7～15天，得到用于生猪防疫的复合微生态菌剂，其中，该步骤发酵培养基不用灭菌；步骤(1)中所述的嗜酸乳杆菌、巴氏醋杆菌、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌的菌株分别为嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus)CICC6088、巴氏醋杆菌(Acetobacterpasteurianus)CICC20056、酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)CICC1251、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)CICC24434和沼泽红假单胞菌(Rhodopseudanonaspalustris)CICC23812；步骤(1)中所述的多次活化的具体操作优选为：将冷冻保藏的嗜酸乳杆菌、巴氏醋杆菌、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌分别进行三次斜面活化，然后再进行平板纯化培养，最后进行斜面培养，得到嗜酸乳杆菌、巴氏醋杆菌、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌活化菌种；所述的斜面活化、平板纯化培养或斜面培养的条件优选为：嗜酸乳杆菌37℃厌氧培养2～3天；巴氏醋杆菌30℃好氧培养1～2天酿酒酵母28～30℃好氧培养2天；枯草芽孢杆菌30℃好氧培养1～2天；沼泽红假单胞菌60瓦乌丝灯光照30～35℃厌氧培养5～7天；步骤(2)①所述的液体培养基(嗜酸乳杆菌)每一升包含如下组分：蛋白胨10克、牛肉膏10克、酵母粉5克、葡萄糖5克、乙酸钠5克、柠檬酸二胺2克、吐温801mL、磷酸氢二钾2克、硫酸镁0.2克、硫酸锰0.05克、碳酸钙20克、番茄汁20mL、土豆汁30mL、胡萝卜汁60mL、维生素C2克，弱碱性小分子还原水补至1000mL，pH6.8；步骤(2)②所述的液体培养基(巴氏醋杆菌)每一升包含如下组分：葡萄糖100.0克、酵母提取物10.0克、碳酸钙20.0克，弱碱性小分子还原水补至1000ml，pH6.8；步骤(2)③所述的液体培养基(酿酒酵母)每一升包含如下组分：蔗糖40克、蛋白胨30克、磷酸二氢钾1克、氯化钠1克，弱碱性小分子还原水补至1000mL，pH自然；步骤(2)④所述的液体培养基(枯草芽孢杆菌)每一升包含如下组分：牛肉膏4.0克、蛋白胨3.8克、氯化钠3.3g、葡萄糖4.0克、磷酸二氢钾3.4克、硫酸镁0.2克，弱碱性小分子还原水补至1000mL，pH7.0；步骤(2)⑤所述的液体培养基(沼泽红假单胞菌)每一升包含如下组分：酵母粉2克、氯化铵1克、磷酸氢二钾1克、碳酸氢钠3克、硫酸镁0.5克，弱碱性小分子还原水补至1000mL，pH7.0～7.2；步骤(3)中所述的发酵培养基包含如下按质量百分比计的组分：工业用废糖蜜5～8％、酵母粉0.1％、蛋白胨0.1％、氯化铵0.2％、氯化钠0.1％、磷酸二氢钾0.1％、硫酸镁0.05％、硫酸锌0.025％、硫酸亚铁0.025％，弱碱性小分子还原水补足100％；步骤(4)中所述的发酵培养基包含如下按质量百分比计的组分：工业用废糖蜜10％、米酒10％、米醋10％、氯化铵0.1％、氯化钠0.1％、磷酸二氢钾0.05％、硫酸镁0.05％、硫酸锌0.025％、硫酸亚铁0.025％、弱碱性小分子还原水补足100％；所述的用于生猪防疫的复合微生态菌剂在制备生猪防疫产品中的应用；一种生猪防疫方法，包含如下步骤：(1)在乳猪刚出生尚未开口吃奶前：上述用于生猪防疫的复合微生态菌剂加10质量倍水稀释；将稀释液滴入乳猪口中，每天一次，连续三天；其中，第一天本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于生猪防疫的复合微生态菌剂，其特征在于由嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus)、巴氏醋杆菌(Acetobacter pasteurianus)、酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和沼泽红假单胞菌(Rhodop seudanonaspalustris)的种子液按照质量比为5:5:4:3:3混合培养后，进一步发酵培养得到。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于生猪防疫的复合微生态菌剂，其特征在于由嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus)、巴氏醋杆菌(Acetobacterpasteurianus)、酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)和沼泽红假单胞菌(Rhodopseudanonaspalustris)的种子液按照质量比为5:5:4:3:3混合培养后，进一步发酵培养得到。


2.权利要求1所述的用于生猪防疫的复合微生态菌剂的制备方法，其特征在于包含如下步骤：
(1)菌种活化培养：将冷冻保藏的嗜酸乳杆菌、巴氏醋杆菌、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌分别进行多次活化，得到嗜酸乳杆菌、巴氏醋杆菌、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌活化菌种；
(2)液体菌种培养
①将步骤(1)制得的嗜酸乳杆菌活化菌种接种于液体培养基中，37℃兼性厌氧培养2～3天，得到嗜酸乳杆菌种子液；
②将步骤(1)制得的巴氏醋杆菌活化菌种接种于液体培养基中，摇床转速200r/min、温度30℃培养1-2天，得到巴氏醋杆菌种子液；
③将步骤(1)制得的酿酒酵母活化菌种接种于液体培养基中，摇床转速150r/min、温度28℃培养2天，得到酿酒酵母种子液；
④将步骤(1)制得的枯草芽孢杆菌活化菌种接种于液体培养基中，摇床转速200r/min、温度35℃培养1～2天，得到枯草芽孢杆菌种子液；
⑤将步骤(1)制得的沼泽红假单胞菌活化菌种接种至液体培养基中，60瓦乌丝灯光照30～35℃厌氧培养5～7天，得到沼泽红假单胞菌种子液；
(3)复合菌种培养：将步骤(2)制得的巴氏醋杆菌种子液、酿酒酵母菌种子液和枯草芽孢杆菌种子液接种至发酵培养基中，30℃摇床转速150～200r/min培养1～2天，然后再接种嗜酸乳杆菌种子液和沼泽红假单胞菌种子液，30～35℃厌氧培养3～5天，得到复合菌种；其中，嗜酸乳杆菌、巴氏醋杆菌、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌的质量比为5:5:4:3:3，总接种量为重量百分比10％；
(4)成品培养：将步骤(3)制得的复合菌种按重量百分比5～8％接种至发酵培养基中，28～30℃密闭发酵7～15天，得到用于生猪防疫的复合微生态菌剂，其中，该步骤发酵培养基不用灭菌。


3.根据权利要求2所述的用于生猪防疫的复合微生态菌剂的制备方法，其特征在于：
步骤(1)中所述的嗜酸乳杆菌、巴氏醋杆菌、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌的菌株分别为嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus)CICC6088、巴氏醋杆菌(Acetobacterpasteurianus)CICC20056、酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)CICC1251、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)CICC24434和沼泽红假单胞菌(Rhodopseudanonaspalustris)CICC23812。


4.根据权利要求2所述的用于生猪防疫的复合微生态菌剂的制备方法，其特征在于：
步骤(1)中所述的多次活化的具体操作为：
将冷冻保藏的嗜酸乳杆菌、巴氏醋杆菌、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌分别进行三次斜面活化，然后再进行平板纯化培养，最后进行斜面培养，得到嗜酸乳杆菌、巴氏醋杆菌、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌和沼泽红假单胞菌活化菌种。


5.根据权利要求2所述的用于生猪防疫的复合微生态菌剂的制备方法，其特征在于：
步骤(2)①所述的液体培养基每一升包含如下组分：
蛋白胨10克、牛肉膏10克、酵母粉5克、葡萄糖...

【专利技术属性】
技术研发人员：莫艳华，姚康，马国华，黄海红，
申请(专利权)人：广东中科无抗养殖科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44