白蛋白纳米粒组合物及其制法制造技术

本发明专利技术涉及白蛋白纳米粒组合物及其制法。所述组合物中包含100重量份的式(I)化合物或其药用盐以及100～1500重量份的白蛋白。所述白蛋白是选自下列的白蛋白：卵白蛋白、牛血白蛋白、人血白蛋白、重组人白蛋白等，优选的是人血白蛋白或重组人白蛋白；所述组合物中还任选的包含一种或多种选自下列的辅料：胆固醇、磷脂、卵磷脂、PEG化磷脂、磷脂酰胆碱、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、甘油磷脂酸、合成磷脂等类型的磷酯。还提供了该组合物的制备方法和其制药用途，本发明专利技术方法呈现如说明书所述优异技术效果。

Albumin nanoparticles composition and its preparation

【技术实现步骤摘要】
白蛋白纳米粒组合物及其制法
本专利技术属于医药化学领域，涉及提高吉西他滨抗肿瘤活性的方法，尤其是涉及一组具有抗肿瘤活性的吉西他滨酯化物及其组合物、制备方法，以及在抗肿瘤方面的应用。本专利技术还涉及一种包含式(I)化合物或其药用盐的白蛋白纳米粒制剂组合物，以及它们的制备方法。
技术介绍
吉西他滨，英文名gemcitabine，中文化学名：4-氨基-1-(3,3-二氟-4-羟基-5-羟甲基四氢呋喃-2-基)-1H-嘧啶-2-酮)，英文化学名：2′-deoxy-2′,2′-difluorocytidine，分子式：C9H11F2N3O4，是一种新型氟代核苷类似物，吉西他滨的化学结构如以下式(J)所示：吉西他滨本身并无药理活性，进入人体内后经脱氧胞嘧啶激酶活化，由胞嘧啶核苷脱氨酶代谢为相应的单磷酸酯、双磷酸酯和三磷酸酯而发挥药效。吉西他滨可用于治疗多种实体瘤(例如，非小细胞肺癌、胰腺癌、卵巢癌、膀胱癌、乳腺癌等)，临床用其盐酸盐，但目前仅限于静脉给药治疗胰腺癌和非小细胞肺癌。该疗法的患者依从性差并存在若干不良反应，典型的不良反应包括，①血液系统：有骨髓抑制作用，可出现贫血、白细胞降低和血小板减少。②胃肠道；约2/3的患者出现肝脏转氨酶异常，多为轻度、非进行性损害；约1/3的患者出现恶心和呕吐反应，20％的患者需要药物治疗。③肾脏：约1/2的患者出现轻度蛋白尿和血尿，有部分病例出现不明原因的肾衰。④过敏：约25％的患者出现皮诊，10％的患者出现瘙痒，少于1％患者可发生支气管痉挛。⑤其他：约20％的患者有类似于流感的表现；水肿/周围性水肿的发生率约30％；脱发、嗜睡、腹泻、口腔毒性及便秘发生率则分别为13％，10％，8％，7％和6％。这些不良反应将严重影响吉西他滨临床用药的效益/风险比。此外，本品在静注后可广泛分布于各组织，能被胞苷脱氨酶在肝脏、肾、血液和其他组织中快速代谢，故血浆半衰期短(t1/2：8-17min)，需多次给药(GangWang，等.J.Med.Chem.2017,60,2552；TangLi，等.DRUGDEVELOPMENTANDINDUSTRIALPHARMACY，2017，43：2016)。现有技术仍然期待有新的方法并且预期具有某种或某些更优异效果来治疗肿瘤，例如期待有更加优良的抗肿瘤活性的药物应用于临床，例如期待有白蛋白纳米粒组合物的形式应用于临床。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供新的方法并且预期具有某种或某些更优异效果来治疗肿瘤，例如提供具有更加优良的抗肿瘤活性的药物应用于临床。本专利技术人出人意料地发现，具有本专利技术结构的化合物呈现优异的抗肿瘤活性。本专利技术的另一目的在于提供一种白蛋白纳米粒制剂组合物，特别是期望该白蛋白纳米粒制剂组合物呈现某个或者某些优良药学性能。本专利技术人出人意料地发现，当采用本专利技术配方时能够获得如本专利技术说明书所述一个或多个方面的有益效果，本专利技术基于此发现而得以完成。为此，本专利技术第一方面提供了以下式(I)化合物：或其药用盐；其中：R1和R2相同或不同，各自代表C6-22直链或支链的饱和烷基或不饱和烯基，其中碳链中的1个或2个CH2任选地被O替代。根据本专利技术第一方面的化合物，其中R1和R2相同或不同，各自代表C8-22直链或支链的饱和烷基或不饱和烯基，其中碳链中的1个或2个CH2任选地被O替代。根据本专利技术第一方面的化合物，其中R1和R2相同或不同，各自代表C10-22直链或支链的饱和烷基或不饱和烯基，其中碳链中的1个或2个CH2任选地被O替代。根据本专利技术第一方面的化合物或者本专利技术其它任一方面提及的，其中所述药用盐是与无机酸或者与有机酸形成的盐。根据本专利技术第一方面的化合物或者本专利技术其它任一方面提及的，其中所述无机酸选自：盐酸、硫酸、磷酸。尤其优选的药用盐为盐酸盐。根据本专利技术第一方面的化合物或者本专利技术其它任一方面提及的，其中所述有机酸选自：乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、马来酸、草酸、琥珀酸、苯甲酸、酒石酸、富马酸、扁桃酸、抗坏血酸、苹果酸、氨基酸(例如丙氨酸、天冬氨酸、赖氨酸)、磺酸(例如甲磺酸、对甲苯磺酸)。根据本专利技术第一方面的化合物，其也可以溶剂化物(如水合物)的形式存在，因此，这些溶剂化物(如水合物)也包括在本专利技术的化合物之内。根据本专利技术第一方面的式(I)化合物，其为选自下列的化合物1～化合物12：化合物1：2’,2’-二氟-2’-脱氧胞嘧啶核苷-3’,5’-二正癸酸酯，化合物2：2’,2’-二氟-2’-脱氧胞嘧啶核苷-3’,5’-二月桂酸酯，化合物3：2’,2’-二氟-2’-脱氧胞嘧啶核苷-3’,5’-二肉豆蔻酸酯，化合物4：2’,2’-二氟-2’-脱氧胞嘧啶核苷-3’,5’-二棕榈酸酯，化合物5：2’,2’-二氟-2’-脱氧胞嘧啶核苷-3’,5’-二反油酸酯，化合物6：2’,2’-二氟-2’-脱氧胞嘧啶核苷-3’,5’-二正十六烷氧丙基醚，化合物7：2’,2’-二氟-2’-脱氧胞嘧啶核苷-3’,5’-二正十八烷氧乙基醚，化合物8：2’,2’-二氟-2’-脱氧胞嘧啶核苷-3’-月桂酸酯-5’-肉豆蔻酸酯，化合物9：2’,2’-二氟-2’-脱氧胞嘧啶核苷-3’-肉豆蔻酸酯-5’-月桂酸酯，化合物10：2’,2’-二氟-2’-脱氧胞嘧啶核苷-3’-正十四烷氧乙基醚-5’-正十六烷氧乙基醚，化合物11：2’,2’-二氟-2’-脱氧胞嘧啶核苷-3’-正十六烷氧丙基醚-5’-正十四烷氧乙基醚，化合物12：2’,2’-二氟-2’-脱氧胞嘧啶核苷-3’-正十六烷氧丙基醚-5’-肉豆蔻酸酯，或其药用盐。进一步的，本专利技术第二方面提供了制备式(I)化合物或其药用盐的方法。根据本专利技术第二方面的方法，当式(I)化合物中的R1和R2相同时，该方法如反应路线1所示。反应路线1：在反应路线1中，R如本文对R1和/或R2定义的，例如代表C6-22直链或支链的饱和烷基或不饱和烯基，其中碳链中的1个或2个CH2任选地被O替代。具体地说，该制备方法包括如下步骤：1)使化合物II(国内市售途径获得)溶于非极性溶剂(例如，二氯甲烷(DCM)、三氯甲烷、四氢呋喃、二氧六环)，在适量有机碱[例如，三乙胺、N,N-二甲基吡啶、吡啶、4-二甲氨基吡啶(DMAP)]存在下，与1～6倍当量的Boc2O在室温～50℃温度下搅拌反应3～15小时，得到氨基保护的式(III)化合物；2)使式(III)化合物溶于质子性溶剂(例如，水、醇或醇-水混合溶剂，例如甲醇)，加入1～2倍当量的无机碱(例如，氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸氢钠)，在0℃～室温下搅拌反应3～10小时，得到去羟基保护基的式(IV)化合物；3)使式(IV)化合物溶于非极性溶剂[例如，二氯甲烷(DCM)、三氯甲烷、四氢呋喃、二氧六环]，在适量有机碱(例如，三乙胺、N,N-二甲基吡啶、吡啶、4-二甲氨基吡啶(DMAP))存在下本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种包含式(I)化合物或其药用盐的白蛋白纳米粒制剂组合物，该组合物中包含100重量份的式(I)化合物或其药用盐以及100～1500重量份的白蛋白。/n

【技术特征摘要】
1.一种包含式(I)化合物或其药用盐的白蛋白纳米粒制剂组合物，该组合物中包含100重量份的式(I)化合物或其药用盐以及100～1500重量份的白蛋白。


2.根据权利要求1的组合物，其特征在于：
其中包含100重量份的式(I)化合物或其药用盐以及150～1000重量份的白蛋白；
其中包含100重量份的式(I)化合物或其药用盐以及150～800重量份的白蛋白；
其中包含100重量份的式(I)化合物或其药用盐以及150～600重量份的白蛋白；
其中包含100重量份的式(I)化合物或其药用盐以及200～500重量份的白蛋白；
所述白蛋白是选自下列的白蛋白：卵白蛋白、牛血白蛋白、人血白蛋白、重组人白蛋白等，优选的是人血白蛋白或重组人白蛋白；
其中还任选的包含一种或多种选自下列的辅料：胆固醇、磷脂、卵磷脂、PEG化磷脂、磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰丝氨酸(PS)、磷脂酰肌醇(PI)、甘油磷脂酸(PA)、合成磷脂等类型的磷酯；
以每100重量份的式(I)化合物或其药用盐计，其中还任选的包含一种或多种选自下列的辅料：胆固醇2～10重量份、磷脂5～20重量份、卵磷脂5～20重量份、PEG化磷脂5～20重量份、磷脂酰胆碱(PC)5～20重量份、磷脂酰甘油(PG)5～20重量份、磷脂酰乙醇胺(PE)5～20重量份、磷脂酰丝氨酸(PS)5～20重量份、磷脂酰肌醇(PI)5～20重量份、甘油磷脂酸(PA)5～20重量份、合成磷脂5～20重量份；
以每100重量份的式(I)化合物或其药用盐计，其中还任选的包含一种或多种选自下列的辅料：胆固醇2～5重量份、磷脂5～10重量份、卵磷脂5～10重量份、PEG化磷脂5～10重量份、磷脂酰胆碱(PC)5～10重量份、磷脂酰甘油(PG)5～10重量份、磷脂酰乙醇胺(PE)5～10重量份、磷脂酰丝氨酸(PS)5～10重量份、磷脂酰肌醇(PI)5～10重量份、甘油磷脂酸(PA)5～10重量份、合成磷脂5～10重量份；
所述磷脂选自：蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、鞘磷脂、磷脂酰乙醇胺、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱(即DMPC)、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油(即DMPG)、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬酯酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、及其组合；
其中还包含聚乙二醇修饰的磷脂；
所述PEG化磷脂中的聚乙二醇的分子量为1000～10000道尔顿；
所述PEG化磷脂是二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇(可缩写为PEG-DSPE)；和/或
所述PEG化磷脂选自：二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇1000(可缩写为PEG1000-DSPE，其余亦可类似表述)、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇3350、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇4000、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇5000、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇6000、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇8000、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇10000。


3.根据权利要求1的组合物，其特征在于：
其中还任选的包含注射制剂辅料，例如酸碱调节剂、渗透压调节剂、冻干赋形剂等；
所述酸碱调节剂的量是，使该组合物在用注射用水稀释制成式(I)化合物或其药用盐浓度为1mg/ml的溶液时，溶液的pH值为6.0～7.5，例如6.5～7.5；
所述渗透压调节剂当存在时，其用量是，使该组合物在用注射用水稀释制成式(I)化合物或其药用盐浓度为1mg/ml的溶液时，溶液的渗透压与浓度为0.9～2％氯化钠溶液的渗透压相当；
以每100重量份的式(I)化合物或其药用盐计，其中的冻干赋形剂的量为0～1000重量份，例如0～500重量份，例如0～200重量份；
冻干赋形剂可以选自：葡萄糖、蔗糖、果糖、乳糖、甘露醇、右旋糖苷、甘氨酸等；
其中还包含中链脂肪酸，在一个实施方案中，所述中链脂肪酸选自：己酸、辛酸、癸酸、月桂酸，例如的是辛酸或癸酸；
以每100重量份的式(I)化合物或其药用盐计，其中中链脂肪酸的量为2～50重量份，例如2～40重量份，例如2～30重量份，例如2～20重量份。


4.根据权利要求1的组合物，其特征在于：
其是通过如下操作制备得到的：将水溶性物料溶解于水中制成水相，将水不溶性物料溶解于有机溶剂中制成油相，将水相和油相混合分散制成粗乳液，进一步将粗乳液在高压均质机中均质至微粒的平均粒径小于200nm，蒸发除去溶剂，得到纳米粒组合物，任选地将其冷冻干燥除去水分；
或者，其是照包括如下步骤的方法制备得到的：
(1)将处方量的白蛋白用水溶解，作为水相；
(2)将处方量的式(I)化合物或其药用盐用有机溶剂(例如乙醚、乙酸乙酯、叔丁醇、氯仿、二氯甲烷等；优选的溶剂可以是氯仿；溶剂的用量是本领域技术人员根据技术经验容易确定的，并且通常是至少应保证各物料完全溶解的程度(但又不宜过量以减轻后续的蒸发除溶剂的工作量))溶解，作为油相；
(3)将水相与油相混合后，使用分散器分散制得粗乳液；
(4)将粗乳液转入高压均质机中于均质直至均匀且微粒的平均粒径小于200nm；
(5)在旋转蒸发器上旋蒸将残余的有机溶剂蒸发除去(直至有机溶剂残余量小于100ppm)，接着用0.22μm水性微孔滤膜过滤除菌，制成式(I)化合物或其药用盐白蛋白纳米粒组合物，任选地将其冷冻干燥除去水分。


5.根据权利要求4的组合物，其特征在于：
步骤(1)所得水相中白蛋白的浓度为3～15％，例如5～10％；
步骤(2)所得油相中式(I)化合物或其药用盐的浓度为2～20％，例如5～10％；
当存在时，所述胆固醇和各类磷脂与所述式(I)化合物或其药用盐一起添加至所述有机溶剂中制成油相；
步骤(1)和步骤(2)是在35～70℃(例如40～50℃)的温度下使各物料溶解；
步骤(3)中所述分散是在分散器中于5000-15000rpm下分散1...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏桂民，刘明亮，郭晓茹，
申请(专利权)人：中国医学科学院医药生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11