一种血清淀粉样蛋白A和C反应蛋白的二合一质控物及其制备方法技术

本发明专利技术公开一种血清淀粉样蛋白A和C反应蛋白的二合一质控品，是以缓冲溶液为基质，其中含有以下组分：1)抗原：包括0.5‑300mg/L的血清淀粉样蛋白A和0.5‑300mg/L的C‑反应蛋白；2)表面活性剂：包括质量体积百分浓度0.5％‑5％的非离子型表面活性剂和质量体积百分浓度1％‑10％的离子型表面活性剂；3)基质改善剂，质量体积百分浓度为1％‑10％；4)生物灭活剂，质量体积百分浓度为0.01％‑0.2％；所述缓冲溶液选自PB缓冲液、硼酸缓冲液、MOPOS缓冲液、Tris‑HCl缓冲液中的一种，所述缓冲液的浓度为10‑150mmol/L。本发明专利技术还公开该质控品的制备方法。本发明专利技术提供二合一质控品是适合POCT系统的即开即用的液体质控品，通用性很好，能适合不同的检测平台。

A two in one quality control material for serum amyloid A and C reactive protein and its preparation method

【技术实现步骤摘要】
一种血清淀粉样蛋白A和C反应蛋白的二合一质控物及其制备方法
本专利技术涉及临床检测领域，尤其是涉及一种临床检测SAA和CRP时使用的血清淀粉样蛋白A和C反应蛋白的二合一质控物及其制备方法。
技术介绍
C-反应蛋白：CRP(C-Reactiveprotein)是一种由肝脏生成出来的特殊蛋白，主要用作细菌感染和疾病活动性的指针。当体内有：急性炎症、细菌感染、大面积组织破坏、恶性肿瘤时，很快就会出现CRP升高，而治愈时，又很快就降低到正常范围，这是一种急性期反应蛋白(acutephasereactantprotein)。在临床上，C-反应蛋白的检查主要用于诊断细菌感染以及受检者是否存在活动性疾病。常规CRP对于感染的诊断和鉴别已经在临床上得到广泛的应用，目前对于CRP与其他指标的联合应用也日益受到重视。血清淀粉样蛋白A:SAA(serumamyloidA)是组织淀粉样蛋白A的前体物质，属于急性时相反应蛋白。SAA是血液中以低水平存在的正常组份。当人体有病毒或细菌感染性炎症、活动性病变、组织大面积损伤时很快升高。特别是在病毒急性感染时(48～72h)可迅速升高，并在疾病的恢复期迅速下降。因此SAA是感染机体病毒时极有效的辅助诊断指标。SAA、CRP的组合检测更能体现优势互补。联合检测的特点和临床意义简述如下：SAA在细菌和病毒感染的早期均可升高，而CRP对病毒感染时一般不增高的特点，因此两者联合检测可对早期细菌和病毒感染的鉴别诊断提供有力的数据。例如两者均增高细菌感染的趋向性较大；而CRP正常SAA明显增高者，结合临床对病毒性感染的趋向性诊断又多了一份依据。特别是在婴幼儿感染性疾病的早期，细菌和病毒感染确是很难鉴别，所以SAA和CRP的联合检测比单独测CRP或SAA更有独特的意义。在目前的门急诊中有广泛的应用，特别对于即时检测(pointofcarePOCT)的试剂盒，为了节约检测时间，常常需要用到联检试剂盒。但目前常用的控制SAA和CRP质控物多为单项质控物，很少有将这两项二合一的质控物。对于联合检测SAA和CRP的试剂盒缺少有效控制质量的手段。血清淀粉样蛋白A和C反应蛋白的二合一质控物，指的是在开展SAA和CRP的项目的系统上应用的一种验证性能特征的物质，在POCT试剂盒的临床检测中有广泛的应用需求。目前市面上没有SAA和CRP二合一质控品，SAA和CRP联检的试剂盒缺少有效的质控手段。为了要长期保存，质控物都会做成冻干模式，但缺点在于1.不方便使用，需要复溶后才能使用，复溶的时间和环境都可能对结果产生影响；2.不能保证瓶间的均匀性，会对测试结果产生影响；3.复溶后不能长期保存，不能用于长期的室内质控。尤其是，多项复合质控品的冻品工艺复杂，用户使用不方便，仅适合生化免疫分析仪，缺少适合于POCT系统的即开即用的质控品。申请号CN201910371360.5的专利文献公开一种炎症类标志物复合质控品及其制备方法与应用，上述复合质控品是以血清为基质，包含保护物质和炎症类标志物分析成分(CRP、SAA、PCT、IL-6、ASO中的至少两种)。虽然这个试剂盒也包含SAA和CRP，但其直接用病人血清，有潜在的生物危害性，处理以及使用上均存在风险；而且需冻干保存，不能做到即开即用，使用不方便；仅适合生化免疫分析仪，不能应用于POCT系统的各个技术平台例如荧光、乳胶、胶体金等平台。因此，提供一种稳定的液体血清淀粉样蛋白A和C反应蛋白的二合一质控物，已经成为本领域亟待解决的技术问题。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于，提供一种血清淀粉样蛋白A以及C反应蛋白的二合一质控品，该质控品不仅能用于CRP/SAA在检测过程中的控制联检试剂盒质量，同时还具有生物安全性高、均匀性好、稳定性好等优势，适合于在POCT/临床领域的推广和发展。为解决上述技术问题，本专利技术一方面提供采用一种血清淀粉样蛋白A和C反应蛋白的二合一质控品，以缓冲溶液为基质，其中含有以下组分：1)抗原：包括0.5-300mg/L的血清淀粉样蛋白A和0.5-300mg/L的C-反应蛋白；2)表面活性剂：包括质量体积百分浓度0.5％-5％的非离子型表面活性剂和质量体积百分浓度1％-10％的离子型表面活性剂；3)基质改善剂，质量体积百分浓度为1％-10％；4)生物灭活剂，质量体积百分浓度为0.01％-0.2％；所述缓冲溶液选自PB缓冲液、硼酸缓冲液、MOPOS缓冲液、Tris-HCl缓冲液中的一种，所述缓冲液的浓度为10-150mmol/L。优选的，所述缓冲溶液的浓度为50mmol/L，所述基质改善剂的浓度为1％，所述非离子型表面活性剂浓度为1％，所述离子型表面活性剂浓度为1％。优选的，所述缓冲溶液的PH值为7.2±0.2。优选的，所述缓冲溶液为磷酸缓冲液，其浓度为50mmol/L，PH值为7.2。优选的，所述基质改善剂选自牛乳白蛋白、牛乳球蛋白、牛血清白蛋白、纤维蛋白原中的至少一种。优选的，所述非离子型表面活性剂选自聚乙二醇辛基苯基醚、烷基醇酰胺、脂肪醇聚氧乙烯醚、聚氧乙烯脱水山梨醇单月桂酸酯中的至少一种。优选的，所述离子型表面活性剂选自十二烷基苯磺酸钠、聚丙烯酰胺、溴化十六烷基三甲铵中的至少一种。优选的，所述生物灭活剂选自叠氮钠、庆大霉素、ProClin300中的至少一种。为解决上述技术问题，本专利技术第二方面提供采用一种血清淀粉样蛋白A和C反应蛋白的二合一质控品的制备方法，包括步骤：(1)配制浓度为10-150mmol/L的缓冲溶液，所述缓冲溶液选自PB缓冲液、硼酸缓冲液、MOPOS缓冲液、Tris-HCl缓冲液中的一种；向所述缓冲溶液中按质量体积百分浓度添加基质改善剂1％-10％，非离子型表面活性剂0.5％-5％，离子型表面活性剂1％-10％，生物灭活剂0.01％-0.2％，得到混合溶液；(2)取血清淀粉样蛋白A抗原和C反应蛋白抗原，添加至所述混合溶液，使血清淀粉样蛋白A抗原的终浓度为0.5-300mg/L，C-反应蛋白抗原的终浓度为0.5-300mg/L；(3)将步骤(2)所得溶液取样，采用血清淀粉样蛋白A检测试剂盒和C反应蛋白检测试剂盒重复测试多次，并分别计算血清淀粉样蛋白A及C反应蛋白的浓度测试结果均值。优选的，所述步骤(1)中，配制浓度为20mmol/L的PB缓冲液，PH值为7.2；按质量体积百分浓度添加BSA2.5％，聚乙二醇辛基苯基醚1％，十二烷基苯磺酸钠5％，叠氮钠0.1％。优选的，所述步骤(2)中，所述血清淀粉样蛋白A抗原和C反应蛋白抗原经复溶和/或稀释后，再添加至所述混合溶液中。优选的，所述步骤(2)的配制完成后，需在2天内完成分装，保存于2℃～8℃。优选的，所述步骤(3)中，测试结果与理论值偏差应在±15％以内，若不在范围内，可取适量配制所用的高浓度或稀释液进行调整至所需范围内。本专利技术中的生物灭活剂，是指添加于质控品中用于杀死质控品中的病本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种血清淀粉样蛋白A和C反应蛋白的二合一质控品，其特征在于，以缓冲溶液为基质，其中含有以下组分：/n1)抗原：包括0.5-300mg/L的血清淀粉样蛋白A和0.5-300mg/L的C-反应蛋白；/n2)表面活性剂：包括质量体积百分浓度0.5％-5％的非离子型表面活性剂和质量体积百分浓度1％-10％的离子型表面活性剂；/n3)基质改善剂，质量体积百分浓度为1％-10％；/n4)生物灭活剂，质量体积百分浓度为0.01％-0.2％；/n所述缓冲溶液选自PB缓冲液、硼酸缓冲液、MOPOS缓冲液、Tris-HCl缓冲液中的一种，所述缓冲液的浓度为10-150mmol/L。/n

【技术特征摘要】
1.一种血清淀粉样蛋白A和C反应蛋白的二合一质控品，其特征在于，以缓冲溶液为基质，其中含有以下组分：
1)抗原：包括0.5-300mg/L的血清淀粉样蛋白A和0.5-300mg/L的C-反应蛋白；
2)表面活性剂：包括质量体积百分浓度0.5％-5％的非离子型表面活性剂和质量体积百分浓度1％-10％的离子型表面活性剂；
3)基质改善剂，质量体积百分浓度为1％-10％；
4)生物灭活剂，质量体积百分浓度为0.01％-0.2％；
所述缓冲溶液选自PB缓冲液、硼酸缓冲液、MOPOS缓冲液、Tris-HCl缓冲液中的一种，所述缓冲液的浓度为10-150mmol/L。


2.如权利要求1所述的质控品，其特征在于，所述缓冲溶液的浓度为50mmol/L，所述基质改善剂的浓度为1％，所述非离子型表面活性剂浓度为1％，所述离子型表面活性剂浓度为1％。


3.如权利要求1所述的质控品，其特征在于，所述缓冲溶液的PH值为7.2±0.2。


4.如权利要求1所述的质控品，其特征在于，所述缓冲溶液为磷酸缓冲液，其浓度为50mmol/L，PH值为7.2。


5.如权利要求1所述的质控品，其特征在于，所述基质改善剂选自牛乳白蛋白、牛乳球蛋白、牛血清白蛋白、纤维蛋白原中的至少一种。


6.如权利要求1所述的质控品，其特征在于，所述非离子型表面活性剂选自聚乙二醇辛基苯基醚、烷基醇酰胺、脂肪醇...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨晶，张孟霞，徐建新，李福刚，
申请(专利权)人：上海奥普生物医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31