作为异常血小板水平的标志物的肾上腺髓质素原制造技术

本发明专利技术涉及一种对具有异常血小板水平的患者进行测定、诊断、预后、治疗指导、治疗监测、风险评估和/或风险分层的方法，所述方法包括提供所述患者的样本，测定所述样本中的肾上腺髓质素原(proADM)或其片段的水平，其中所述pro ADM或其片段的水平与所述患者中的异常血小板水平相关。在本发明专利技术的实施方案中，高严重程度的pro ADM或其片段的水平表明受试者中的低血小板水平，并且随后开始或改变患者的治疗以改善所述状况。在本发明专利技术的一些实施方案中，所述方法包括测定从患者分离的样本中的一种或多种额外标志物的水平，例如血小板的水平，PCT或其片段、一种或多种血小板减少标志物和/或一种或多种炎性反应标志物的水平。

Adrenomedullin as a marker of abnormal platelet levels

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】作为异常血小板水平的标志物的肾上腺髓质素原
本专利技术涉及一种对具有异常血小板水平的患者进行测定、诊断、预后、治疗指导、治疗监测、风险评估和/或风险分层的方法，所述方法包括提供所述患者的样本，测定所述样本中的肾上腺髓质素原(proADM)或其片段的水平，其中所述proADM或其片段的水平与所述患者中的异常血小板水平相关。在本专利技术的实施方案中，proADM或其片段的高严重水平表明受试者中的低血小板水平，并且随后开始或改变患者的治疗以改善所述状况。在本专利技术的一些实施方案中，所述方法包括测定从患者分离的样本中的一种或多种额外标志物的水平，例如血小板的水平，PCT或其片段、一种或多种血小板减少标志物和/或一种或多种炎性反应标志物的水平。
技术介绍
尽管诊断和预防措施有了显著改善，但住院患者的败血症发生率仍持续迅速上升(1)，死亡率在10％至54％之间，这取决于疾病严重程度的水平、使用的器官功能障碍的定义，和国家特定发病率(2、3)。因此，就总体病理生理宿主反应而言，在败血症的早期阶段尽早且准确地评估感染载量和疾病严重程度至关重要，以便关于诊断测试和治疗策略做出迅速且可靠的决定，以及在稍后阶段可靠地指导患者管理、治疗监测，在临床痊愈的情况下作出出院决定。因此令人惊讶的是，目前尚无针对败血症的金标准诊断测试(4)。降钙素原(PCT)的使用已通过抗生素指导领域的观察和干预数据部分地满足了在感染载量评估方面的这种尚未满足的需求(5-7)。但是，尚未显示出对疾病严重程度的准确度量。因而，因此提出了许多生物标志物和临床评分，包括使用严重程度评分，例如序贯器官衰竭评估(SOFA)、急性生理和慢性健康评估(APACHE)II以及简化急性生理(SAPS)II评分，然而，由于与每个评分相关的相对较高的复杂度和时间资源要求，这些评分很少以常规方式每天计算。新型生物标志物的使用可以满足这一尚未满足的临床需求，但是很少有(如果有的话)成功地将其纳入广泛的临床常规(8)。在这些生物标志物中，中区肾上腺髓质素原(MR-proADM)是一种由多个组织生成以稳定微循环并防止内皮通透性和随之而来的器官衰竭的肽(9-16)，其已显示出可观的前景，尤其是在以下领域：败血症(17)，下呼吸道感染(18-21)，肺移植(22)，胸外科(23)和血容量过多(WO2017/89474)。实际上，内皮和微循环被广泛认为在败血症的病理生理宿主反应中起着重要作用(24、25)，其中每个器官内的血流调节和分布都非常重要(25)，因此可以提供与单个器官功能障碍的评分相比，关于一般宿主反应严重程度的替代指征。了解宿主对败血症的反应对于启动适当的治疗策略至关重要。一个基本因素是了解器官功能障碍发展的潜在过程。每个器官系统都由毛细管、小动脉和小静脉的复杂而庞大的网络构成，其被称为微血管系统。特别是在炎症反应期间，血小板可能会对血管完整性产生有害影响，例如可能导致血管屏障通透性增加(59)。然而，特定器官具有不同程度的微血管密度和复杂性，取决于具体器官，微循环起着不同的作用。血小板对败血症病理生理学和器官衰竭的作用已成为重新关注的主题。使用普通血小板计数阈值，血小板减少(血液中血小板的水平异常低)占ICU患者的20-50％，并且与不良结果相关(38-47)。血小板是众所周知的凝血参与者并且可能有助于弥散性血管内凝血(DIC)，以及是免疫反应的重要因素，从而对感染和破坏组织完整性有反应并且有助于炎症、病原体杀伤和组织修复(48-53)。此外，血小板和血小板减少在现有和发展中的严重疾患(例如败血症和器官衰竭)的情形下的作用是一个深入研究的主题(54-57)。在健康的血管条件下，血小板遇到由内皮细胞产生的抑制信号，从而阻止其激活。它们在靠近血管壁的地方循环，并且内皮细胞衬里的破坏克服了这些抑制信号并驱动血小板粘附、激活和聚集，从而暂时堵塞了受损的血管。激活的血小板分泌大量促炎物质以及靶向内皮细胞和白细胞的细胞因子。在正常情况下，内皮是非粘附性表面，但是当被血小板激活时，它会发生深刻变化，包括细胞粘附分子和组织因子的表达。血小板在聚糖起关键作用的多步骤过程后粘附至激活的内皮细胞。血小板激活可进一步改变血管张力并导致结构变化，从而增加血管通透性。血液中血小板聚集物的形成是败血症进展的早期现象。因此，如序贯器官衰竭评估评分所示，了解发展中的器官功能障碍对于帮助开发个性化败血症治疗至关重要。在败血症诊断后的最早时刻，SOFA评分提高或降低的预警至关重要。但是，到目前为止，尚无可用的可靠诊断和/或预后标志物预期指示SOFA评分提高或降低和/或异常血小板水平、弥散性血管内凝血(DIC)和/或相关器官衰竭、特别是特定器官衰竭的存在或发展。尤其是对于重症患者，血小板减少的管理可能具有挑战性，因为不同的机制可能导致血小板数量明显减少：血液稀释(输液)，血小板消耗增加(例如，由于DIC、吞噬血细胞作用、血栓形成)，血小板破坏增加(例如由于血小板自身抗体、肝素、药物)，血小板产生减少(例如由于细菌毒素、药物、慢性肝病)或血小板隔离增加(例如由于脾功能亢进、体温过低)。此外，由于季节和个体差异，血小板计数低可能是微不足道并且非病理性的(58)。另外，不同的情况会导致血小板减少的表型，而与病理学无关(假性血小板减少)。血液样本中的凝结或EDTA诱导的离体血小板结块可能是假性血小板减少的原因，并且可能误导诸如血小板输注的治疗措施。因此，迫切需要开发指示血小板水平异常发展以及异常血小板水平的相关严重程度的诊断和预后工具和方法。
技术实现思路
鉴于现有技术中的困难，本专利技术的潜在技术问题是提供用于测定受试者中异常血小板水平的手段。本专利技术的一个目的可以认为是提供对患者中与异常血小板水平相关的当前或后续不良事件(例如器官衰竭、特定器官衰竭和/或死亡)进行诊断、预后、治疗指导、治疗监测、风险评估和/或风险分层的手段。因此，本专利技术的一个目的是提供一种或多种生物标志物或生物标志物的组合，以鉴定具有这种不良事件的高风险的患者。在独立权利要求中提供了对本专利技术的技术问题的解决方案。在从属权利要求中提供了本专利技术的优选实施方案。因此，所述方法涉及一种用于对患者中的异常血小板水平进行测定、诊断、预后、治疗指导、治疗监测、风险评估和/或风险分层的方法，所述方法包括：a.提供所述患者的样本，b.测定所述样本中肾上腺髓质素原(proADM)或其片段的水平，c.其中所述proADM或其片段的水平与所述患者中的异常血小板水平相关。本专利技术还涉及一种基于所述样本中肾上腺髓质素原(proADM)或其片段的水平对血小板减少和/或相关医学病状例如弥散性血管内凝血(DIC)或器官失调或器官衰竭进行诊断、预后、治疗指导、治疗监测、风险评估和/或风险分层的方法。因此，本专利技术涉及一种基于所述样本中肾上腺髓质素原(proADM)或其片段的水平对血小板减少和/或弥散性血管内凝血(DIC)进行诊断、预后、风险评估和/或风险分层的方法。本专利技术是基于以下令人惊讶的发现：本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种对患者中的异常血小板水平进行测定、诊断、预后、治疗指导、治疗监测、风险评估和/或风险分层的方法，所述方法包括：/na.提供所述患者的样本，/nb.测定所述样本中肾上腺髓质素原(proADM)或其片段的水平，/nc.其中所述proADM或其片段的水平与所述患者中的所述异常血小板水平相关。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170913 EP 17190912.0;20180309 EP 18161091.61.一种对患者中的异常血小板水平进行测定、诊断、预后、治疗指导、治疗监测、风险评估和/或风险分层的方法，所述方法包括：
a.提供所述患者的样本，
b.测定所述样本中肾上腺髓质素原(proADM)或其片段的水平，
c.其中所述proADM或其片段的水平与所述患者中的所述异常血小板水平相关。


2.根据权利要求1所述的方法，其包括基于所述样本中的proADM或其片段的水平，对凝血系统失调如血小板减少和/或弥散性血管内凝血(DIC)进行诊断、预后、风险评估和/或风险分层。


3.根据权利要求1所述的方法，其中所述患者为重症，或已经被诊断为重症。


4.根据前述权利要求所述的方法，其中在诊断为重症的时间点之时或之后从所述患者中分离所述样本。


5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述患者被诊断出具有感染性疾病。


6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述患者被诊断出具有败血症、重度败血症或败血性休克。


7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述患者被诊断出具有一种或多种现有器官衰竭，和/或是创伤后或手术后患者。


8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述患者被诊断出具有凝血系统失调，例如弥散性血管内凝血(DIC)或血小板减少，和/或具有凝血系统相关器官例如血管、脾脏、骨髓和/或免疫系统的功能障碍。


9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述proADM水平与所述血小板水平负相关。


10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述样本选自由血液样本、血清样本、血浆样本和/或尿液样本组成的组。


11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中测定proADM或其片段的水平包括测定MR-proADM的水平。


12.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中
a.低于高严重水平(或临界值)的proADM或其片段水平指示正常或高血小板水平，或
b.等于或高于高严重水平(或临界值)的proADM或其片段水平指示低血小板水平和/或血小板减少和/或弥散性血管内凝血(DIC)的存在或其出现可能性，
c.其中proADM或其片段的高严重水平(或临界值)是高于6.5nmol/l、6.95nmol/l或优选10.9nmol/l的水平。


13.根据前述权利要求所述的方法，其中所述proADM或其片段的水平等于或高于所述高严重水平(或临界值)指示开始或改变所述患者的治疗以解决低血小板水平和/或血小板减少和/或弥散性血管内凝血(DIC)的存在或其出现可能性。


14.根据前述权利要求所述的方法，其中所述治疗选自由以下组成的组：血液或血小板输注，血液成分如血清、血浆或特定细胞或其组合的输注，施用促进凝血细胞形成的药物，开始病因治疗或进行脾切除术。


15.根据权利要求12所述的方法，其用于对患者中的低血小板水平和/或血小板减少和/或弥散性血管内凝血(DIC)进行预后、风险评估和/或风险分层，其中proADM或其片段的水平等于或高于所述高严重水平(或临界值)指示发生不良事件。


16.根据权利要求15所述的方法，其中不良事件包括血小板减少、DIC、感染、器官衰竭、器官功能障碍和/或死亡中的一种或多种。


17.根据权利要求12所述的方法，其中所述患者是重症监护病房(ICU)患者，其中
a.所述proADM或其片段的水平低于所述低严重水平(或临界值)指示所述患者从ICU出院，和/或
b.所述proADM或其片段的水平等于或高于所述高严重水平(或临...

【专利技术属性】
技术研发人员：A·佩拉，S·克尔施，D·威尔逊，
申请(专利权)人：BRAHMS有限公司，
类型：发明
国别省市：德国;DE