TAK1抑制剂在制备治疗FGFR1抑制剂耐药的胃癌药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了TAK1抑制剂在制备治疗FGFR1抑制剂耐药的胃癌药物中的应用。还公开了TAK1抑制剂与FGFR1抑制剂联合在制备治疗FGFR1抑制剂耐药的胃癌药物中的应用。本发明专利技术在解决耐药问题的同时提供预测胃癌患者FGFR1抑制剂耐药的有价值的指标。

Application of TAK1 inhibitor in the preparation of gastric cancer drug resistant to FGFR1 inhibitor

【技术实现步骤摘要】
TAK1抑制剂在制备治疗FGFR1抑制剂耐药的胃癌药物中的应用
本专利技术属于医药
，具体涉及一种TAK1抑制剂在治疗FGFR1抑制剂耐药的胃癌中的应用。
技术介绍
胃癌(Gastriccancer,GC)目前是世界范围内第五大最常见的恶性肿瘤，是导致癌症相关死亡的第三大原因(占2018年总死亡的8.2％)。这些病例和死亡中约有一半发生在中国。手术治疗仍是胃癌的最佳治疗方法，但系统化疗和靶向药物对胃癌患者延长生存生存期也至关重要，尤其是对进展期和转移性胃癌。然而，耐药性一直是一个严重的临床问题。人成纤维细胞生长因子受体(FGFR)家族，由四种不同的亚型(FGFR1-4)组成，属于受体酪氨酸激酶(RTK)超家族。FGFR可与成纤维细胞生长因子(FGF)结合，从而引发细胞外受体域的二聚、胞内激酶域的反式磷酸化以及随后下游信号通路的激活，即丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)和磷脂酰肌醇激酶(PI3K)/AKT。FGF/FGFR信号参与许多生理过程，包括细胞增殖、迁移和生存。已在多种实体肿瘤中观察到这一信号通路的异常。已在口腔鳞状细胞癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、鳞状细胞肺癌、胰腺腺癌和胃腺癌中发现FGFR1过表达，使FGFR1成为治疗癌症的一个有希望的药物靶点。到目前为止，许多FGFR抑制剂已进入临床试验中阶段，试验结果显示有耐药现象出现。因此，探索耐药机制对进一步开发FGFR抑制剂治疗至关重要。转化生长因β(TGF-β)活化激酶1(TAK1)，有丝分裂原激活蛋白激酶家族成员，在细胞分化、细胞凋亡、存活和炎症反应中扮演着重要的角色。越来越多的证据表明，TAK1的激活可以以AMPK依赖的方式诱导自噬。TAK1抑制剂未有在治疗FGFR1耐药的胃癌中的报道。我们发现胃癌细胞对广泛使用的选择性FGFR抑制剂AZD4547的耐药性与自噬活性有关。自噬是一种进化上保守的分解代谢过程，是从粗面内质网的无核糖体附着区脱落的双层膜包裹部分胞质和细胞内需降解的细胞器、蛋白质等成分形成自噬体，并与溶酶体融合形成自噬溶酶体，降解其所包裹的内容物，以实现细胞本身的代谢需要和某些细胞器的更新。腺苷5’单磷酸(AMP)活化蛋白激酶(AMP)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路已经成为自噬调控的中心通道，可以被AMPK抑制，从而刺激自噬并激活下游的自噬级联。在我们的研究中，我们发现mTOR和TAK1通路共同调节AZD4547耐药GC细胞的自噬，两者共同作用指导自噬过程。最终的结果是上皮间质转化EMT效应的增加。
技术实现思路
鉴于胃癌发病率和死亡率之高，当前迫切需要寻找有效的药物治疗方法。FGFR1抑制剂展现出良好的疗效，但临床试验中的耐药现象限制其使用，并且耐药肿瘤展现出更强的侵袭和转移能力。因此，探索FGFR1抑制剂耐药机制，寻找解决耐药问题的药物是非常必要的。本专利技术的目的是提供TAK1抑制剂在制备治疗FGFR1抑制剂耐药的胃癌药物中的应用。成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)在各种肿瘤中经常失调。FGFR抑制剂在许多临床前模型中显示了有希望的治疗价值。然而，对FGFR抑制剂耐药的肿瘤已经出现，并展现出更强的侵袭和转移能力。耐药的信号机制仍然未知。在此，我们探讨了FGFR11抑制剂在胃癌细胞中的耐药机制。我们发现FGFR1抑制剂耐药细胞系BGC-823和MGC-803自噬活性水平升高。这些耐药细胞的特征是上皮间质转化(EMT)，这是促进转移生长所必需的。在耐药细胞中，FGFR1抑制剂通过显著激活AMPK/mTOR信号来调节GC细胞的自噬。进一步的探索发现TGFβ活化激酶1(TAK1)高表达和代谢的限制导致了AMPK途径激活和自噬发生。FGFR1抑制剂AZD4547和TAK1抑制剂NG25协同抑制耐药细胞的增殖和EMT。我们阐明了在GC中FGFR1抑制剂的主要耐药分子机制，探索TAK1抑制剂在防止胃癌FGFR1抑制剂耐药中的应用，建立了通过联合TAK1抑制剂与FGFR1抑制剂治疗FGFR1抑制剂耐药的胃癌的方法。与现有技术比较本专利技术的有益效果：1.本专利技术通过使用TAK1抑制剂可有效解决胃癌中FGFR1抑制剂耐药问题，让耐药患者获得良好的治疗效果。2.GC的FGFR1抑制剂耐药标志物仍然缺乏，我们需要耐药标志物预测患者是否需要针对性治疗。本专利技术在解决耐药问题的同时提供预测胃癌患者FGFR1抑制剂耐药的有价值的指标。附图说明图1为通过qRT-PCR比较胃癌患者的胃癌组织和邻近正常胃组织中FGFR1mRNA水平图。验证FGFR1在胃癌中高度表达，与胃癌患者的不良预后相关。图2为验证和制备FGFR1抑制剂AZD4547耐药细胞图。图3为AZD4547耐药显著减少细胞凋亡，促进GC细胞的迁移和侵袭图。图4为AZD4547耐药MGC-803细胞的mRNA表达情况图。图5为AZD4547耐药细胞通过AMPK/mTOR途径表现出自噬过程图。图6为AZD4547处理对肿瘤代谢的影响图。图7为TAK1过表达为BGC-823和SGC-7901细胞的耐药因素图。图8为TAK1抑制剂NG25通过抑制自噬介导的肿瘤耐药促进AZD4547的抗癌作用图。具体实施方式以下通过具体实施例对本专利技术进行解释说明实施例1GC患者中FGFR1的特征及FGFR1抑制剂耐药的严重性通过qRT-PCR比较了50例胃癌患者的胃癌组织和邻近正常胃组织中FGFR1mRNA水平。结果显示FGFR1是GC组织中唯一显著上调的FGFR成员(图1A)与蛋白水平一致(图1B)。IHC分析的进一步证实(图1C)。荧光原位杂交分析(图1D)显示FGFR1基因在GC组织中扩增增加。分析TCGA数据库结果显示，GC患者中FGFR1高表达与胃癌患者的总体生存(OS)和无病生存期(DFS)相关(图1E)。为了探索耐药机制，我们建立了耐药细胞模型。首先我们验证了SNU-216、MGC-803、BGC-823和SGC-7901细胞系表达FGFR1(图2A)，只有SNU-216和SGC-7901对抑制剂反应良好(图2B)。BGC-823和MGC-803细胞系为耐FGFR1抑制的细胞(图2C)。1μmol/LAZD4547培养BGC-823和MGC-80310-12周后，细胞对AZD4547完全耐药(图2E)。为了研究耐药对GC细胞生物学行为的影响，我们将AZD4547耐药细胞系BGC-823R和MGC-803R与其亲代细胞进行了比较。耐药显著增加了AZD4547的抗凋亡能力(图3A)、迁移、侵袭等恶性行为(图3B-D)。此外，耐药影响GC细胞系的EMT表型(图3E)。共聚焦免疫荧光分析进一步证实了AZD4547治疗48小时后的剂量依赖性转变(图3F)。这些结果表明，耐药性促进了恶性表型。实施例2GC细胞对AZD4547的耐药与自噬活性有关专利技术人对1μmol/LAZD4547和25ng/mlFGF2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.TAK1抑制剂在制备治疗FGFR1抑制剂耐药的胃癌药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.TAK1抑制剂在制备治疗FGFR1抑制剂耐药的胃癌药物中的应用。

【专利技术属性】
技术研发人员：陈云，魏良念，姚瑶，彭锐，郑少江，姜润秋，陈燕，李刚，冯东举，刘思汝，
申请(专利权)人：江苏省肿瘤防治研究所江苏省肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：江苏;32