ErbB-2和ErbB-3靶向剂和双特异性抗体制造技术

本发明专利技术尤其涉及包含结合ErbB‑2的第一抗原结合位点和结合ErbB‑3的第二抗原结合位点的抗体。所述抗体通常可降低ErbB‑2和ErbB‑3阳性细胞上ErbB‑3的配体诱导的受体功能。还描述了治疗方法以及所述抗体在对患有ErbB‑2、ErbB‑3或ErbB‑2/3阳性肿瘤的对象进行成像和治疗中的用途。

ErbB-2 and erbb-3 targeting agents and bispecific antibodies

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】ErbB-2和ErbB-3靶向剂和双特异性抗体本申请要求2017年3月31日提交的EP申请No.17164396.8和2017年3月31日提交的US15/476260的优先权，其内容通过引用并入本文。本专利技术涉及抗体领域。特别地，其涉及用于治疗涉及异常细胞的疾病的治疗性(人)抗体的领域。更特别地，其涉及结合ErbB-2和ErbB-3的抗体及其在结合ErbB-2和ErbB-3阳性细胞(特别是肿瘤细胞)中的用途。人表皮生长因子受体家族(HER，也统称为ErbB信号传导网络)是跨膜受体酪氨酸激酶(receptortyrosinekinase，RTK)家族。该家族包括表皮生长因子受体(EGFR)(也称为ErbB-1(或HER1))以及同源受体ErbB-2(HER2)、ErbB-3(HER3)和ErbB-4(HER4)。这些受体(在YardenandPines2012中综述)在上皮细胞上广泛表达。HER受体或其配体(例如调蛋白(heregulin，HRG)或表皮生长因子(epidermalgrowthfactor，EGF))的上调是人癌症中的频繁事件(Wilson，Fridlyandetal.2012)。ErbB-1和ErbB-2的过表达特别地发生在上皮肿瘤中，并且与肿瘤的侵袭、转移、对化学治疗的抗性和不良预后相关(Zhang，Berezovetal.2007)。在正常乳腺中，已显示ErbB-3在腔上皮细胞的生长和分化中是重要的。例如，ErbB-3的丢失/抑制导致腔上皮上基底的选择性扩增(Balko，Millereta1.2012)。配体与RTK的细胞外结构域的结合诱导相同(同二聚化)和不同(异二聚化)受体亚型之间的受体二聚化。二聚化可激活细胞内酪氨酸激酶结构域，其经历自磷酸化，并且继而可激活许多下游促增殖信号传导途径，包括由促分裂原激活蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinase，MAPK)和促生存途径(prosurvivalpathway)Akt介导的那些(在YardenandPines，2012中综述)。没有鉴定出ErbB-2的特异性内源配体，因此假定其通常通过异二聚化进行信号传导(Sergina，Rauschetal.2007)。ErbB-3可通过其配体的结合而被激活。这些配体包括但不限于神经调节蛋白(neuregulin，NRG)和调蛋白(HRG)。已经鉴定了激活ErbB受体家族信号传导的多种模式。其中包括信号传导的配体依赖性和配体非依赖性激活。甚至在没有ErbB-3配体的情况下，过表达的ErbB-2能够通过ErbB-2：ErbB-3异二聚体产生致癌信号传导(Junttila，Akitaetal.2009)。ErbB-2活性可被ErbB-2特异性抗体抑制。这样的ErbB-2特异性抗体例如用于治疗ErbB-2阳性(HER2+)肿瘤。这种治疗的问题在于，即使存在抑制性抗体，肿瘤也经常逃避ErbB-2特异性治疗并继续生长。已经观察到ErbB-2阳性肿瘤(例如乳腺肿瘤、卵巢肿瘤、宫颈肿瘤和胃肿瘤)可通过表现出上调的ErbB-3表达(Ocana，Vera-Badilloetal.2013)和/或ErbB-3配体表达(Wilson，Fridlyandetal.2012)的肿瘤细胞亚群的选择性生长来逃避治疗。还已经鉴定出ErbB-3受体中的激活突变。抗ErbB-2单克隆抗体曲妥珠单抗(trastuzumab)(赫赛汀(Herceptin))和ErbB-1特异性西妥昔单抗(cetuximab)(爱必妥(Erbitux))在已被批准用于临床应用的数种单克隆抗体中。曲妥珠单抗在转移性乳腺癌中具有已证明的存活益处(Arteaga，Sliwkowskietal.2011)。曲妥珠单抗的确切作用机理尚未明确确立。提出的作用方式是抑制RTK信号传导和募集抗体依赖性细胞毒性(antibodydependentcellularcytotoxcity，ADCC)。已描述的其他作用机制包括阻断ErbB-2细胞外结构域的蛋白水解切割、抑制血管生成因子和增强受体内吞作用。用于治疗乳腺癌和其他ErbB-2过表达癌症的另一些干扰ErbB-2信号传导的药剂已经批准或正在开发。例如，化学化合物拉帕替尼(lapatinib)抑制ErbB-1和ErbB-2酪氨酸激酶活性二者，并用于ErbB-2扩增乳腺癌的一线治疗。在患有HER2+转移性乳腺癌的患者中，通常在开始治疗的数月内发生对作为单一药剂或与化学治疗组合的曲妥珠单抗的抗性。仅一部分患有HER2+转移性乳腺癌的患者对单一药剂曲妥珠单抗具有响应，提示了晚期癌症中新的抗性机制。这些机制尤其包括来自其他HER受体家族的信号传导和来自HER家族以外的RTK的补偿性信号传导(Theryetal.，Resistancetohumanepidermalgrowthfactorreceptortype2-targetedtherapies，EurJCancer(2014)，Vol.50，Issue5，pages892-901(ttp：//dx.doi.org/10.1016/j.ejca.2014.01.003))。例如，HER3或其配体与HER2一起过表达导致HER-2/HER-3异二聚体的形成和对曲妥珠单抗的获得性抗性。因此，认为抗体曲妥珠单抗在阻断由ErbB-3配体驱动的信号传导中无效(Wehrman，Raabetal.2006，Junttila，Akitaetal.2009，Theryetal.2014)。最近，基于额外5个月的无进展存活益处，单克隆抗体帕妥珠单抗(pertuzumab)已被批准与曲妥珠单抗组合使用(Baselga，Cortesetal.2012)。帕妥珠单抗也结合ErbB-2，但与曲妥珠单抗在不同位置。治疗ErbB-2阳性肿瘤的另一些策略针对ErbB-3。ErbB-3结合单克隆抗体具有在临床前研究中已证明的活性(Schoeberl，Faberetal.2010)。一些ErbB-3结合单克隆抗体可抑制多种癌症的增殖和生长。另一策略涉及ErbB-2和ErbB-3受体二者的结合。分子MM-111是包含结合ErbB-2和ErbB-3的两个单链Fv(scFv)片段的人工生物分子。这两个scFv与突变的人血清白蛋白(HSA)蛋白质缔合，以提高分子的半衰期。在临床前测试中，该分子显示抑制ErbB-3信号传导和增殖。这种效果主要在表达相对较高量的ErbB-2的ErbB-3阳性细胞系上测量。
技术实现思路
本专利技术提供了包含结合ErbB-2的第一抗原结合位点和结合ErbB-3的第二抗原结合位点的双特异性抗体，并且其中所述抗体可降低ErbB-2和ErbB-3阳性细胞上ErbB-3的配体诱导的受体功能。所述第一抗原结合位点优选存在于包含具有以下的氨基酸序列的VH链的可变结构域中：如图16A或16E中所示的VH链MF2926；MF2930；MF1849；MF2973；MF3004；MF3958(为人源化的MF2971)；MF2971；MF3025；MF2916；MF3991(为人源化的MF3004)本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.ErbB-2靶向剂与包含可结合ErbB-2的细胞外部分上的表位的抗原结合位点和可结合ErbB-3的细胞外部分上的表位的抗原结合位点的双特异性抗体的组合，其用于治疗患有ErbB-2、ErbB-3或ErbB-2/ErbB-3阳性肿瘤或处于发生所述肿瘤之风险中的个体的方法。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170331 EP 17164396.8;20170331 US 15/476,2601.ErbB-2靶向剂与包含可结合ErbB-2的细胞外部分上的表位的抗原结合位点和可结合ErbB-3的细胞外部分上的表位的抗原结合位点的双特异性抗体的组合，其用于治疗患有ErbB-2、ErbB-3或ErbB-2/ErbB-3阳性肿瘤或处于发生所述肿瘤之风险中的个体的方法。


2.权利要求1所述应用的组合，其中所述ErbB-2靶向剂是ErbB-2结合剂抑制剂。


3.权利要求1或2所述应用的组合，其中所述ErbB-2靶向剂是ErbB-2抑制剂。


4.权利要求3所述应用的组合，其中所述ErbB-2抑制剂是包含可结合ErbB-2的细胞外部分上的表位的抗原结合位点的二价单特异性抗体。


5.权利要求4所述应用的组合，其中所述单特异性抗体和所述双特异性抗体结合ErbB-2上的不同表位。


6.权利要求5所述应用的组合，其中不同的ErbB-2表位在不同的细胞外ErbB-2结构域上。


7.权利要求5至6中任一项所述应用的组合，其中所述单特异性抗体可结合ErbB-2细胞外结构域IV、结构域III和/或结构域II上的表位。


8.权利要求1至7中任一项所述应用的组合，其中所述双特异性抗体可结合ErbB-2细胞外结构域I上的表位。


9.权利要求4至8中任一项所述应用的组合，其中所述单特异性抗体包含药物缀合物。


10.权利要求1至9中任一项所述应用的组合，其中所述双特异性抗体包含药物缀合物。


11.权利要求9或权利要求10所述应用的组合，其中所述药物缀合物包含恩坦辛。


12.权利要求4至11中任一项所述应用的组合，其中所述单特异性抗体是曲妥珠单抗。


13.权利要求4至11中任一项所述应用的组合，其中所述单特异性抗体是曲妥珠单抗恩坦辛。


14.权利要求1至13中任一项所述应用的组合，其中所述双特异性抗体包含抗体PB4188。


15.权利要求1至14中任一项所述应用的组合，其还包括向有此需要的个体施用化学治疗药物。


16.治疗患有ErbB-2、ErbB-3或ErbB-2/ErbB-3阳性肿瘤或处于发生ErbB-2、ErbB-3或ErbB-2//ErbB-3阳性肿瘤之风险中的个体的方法，所述方法包括向有此需要的个体施用ErbB-2靶向剂以及包含可结合ErbB-2的细胞外部分上的表位的抗原结合位点和可结合ErbB-3的细胞外部分上的表位的抗原结合位点的双特异性抗体。


17.药物组合物，其包含ErbB-2靶向剂以及包含可结合ErbB-2的细胞外部分上的表位的抗原结合位点和可结合ErbB-3的细胞外部分上的表位的抗原结合位点的双特异性抗体。


18.试剂盒，其包含ErbB-2靶向剂以及包含可结合ErbB-2的细胞外部分上的表位的抗原结合位点和可结合ErbB-3的细胞外部分上的表位的抗原结合位点的双特异性抗体。


19.根据权利要求16所述的治疗方法、根据权利要求17...

【专利技术属性】
技术研发人员：马克·思罗斯比，塞西利亚·安娜·威廉明娜·热延，大卫·安德烈·巴普蒂斯特·毛桑德塔耶，敦·洛格滕伯格，
申请(专利权)人：美勒斯公司，
类型：发明
国别省市：荷兰;NL