一种检测风疹病毒IgM抗体的化学发光免疫分析试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种检测风疹病毒IgM抗体的化学发光免疫分析试剂盒，免疫分析技术领域，包括试剂R1、试剂R2和试剂R3；其中：试剂R1为含磁珠包被抗人IgM抗体的缓冲液，磁珠包被抗人IgM抗体的浓度为0.5％～5％，所述磁珠的粒径是0.05～3μm；试剂R2为含化学发光标记物标记的风疹病毒抗体的缓冲液，化学发光标记物标记的风疹病毒抗体的浓度为0.1～1.0μg/mL，抗体与标记物的标记比例是1:3～1:20；试剂R3为风疹病毒抗原的缓冲液，风疹病毒抗原的浓度为0.1～2.0μg/mL。本发明专利技术降低了本底空白，提高了灵敏度，不需要酶的参与，节约时间及成本，可直接用于全自动生化分析仪上，无需大型仪器设备配合，成本较低，且无放射性污染，可大规模的开展和推广。

A chemiluminescent immunoassay kit for detecting IgM antibody of rubella virus

【技术实现步骤摘要】
一种检测风疹病毒IgM抗体的化学发光免疫分析试剂盒
本专利技术涉及免疫分析
，尤其涉及一种检测风疹病毒IgM抗体的化学发光免疫分析试剂盒及其制备方法与测试方法。
技术介绍
风疹病毒(Rubellavirus)是披膜病毒科，风疹病毒属的唯一成员，人是其唯一的自然宿主。风疹疾病本身并不严重，但风疹病毒对公众健康最大的威胁是它的致畸性。孕妇感染风疹病毒可对婴儿产生先天性损害，尤其是妊娠前3个月若感染风疹病毒，病毒可经血液感染胎儿，导致自发流产、死产或胎儿感染，从而引起胎儿严重的出生缺陷：包括白内障、耳聋、心脏病和智力低下等，称为先天性风疹综合征(Congenitalrubellasyndromes,CRS)。风疹病毒可以通过接种疫苗得到一定程度的预防，但一旦感染，目前尚无特效的治疗方式，因此在临床上对风疹病毒的感染、实验室诊断及其流行特征极为重视。风疹特异抗体检测可用于判定个体免疫状态，有助于提示个体既往感染的血清学状况和诊断及预防急性风疹感染。个体感染风疹病毒后，体液免疫反应首先产生以IgM为主的免疫球蛋白，随后IgM抗体浓度下降，因此，抗RubellaIgM的检测可作为风疹病毒感染早期诊断的指标；RubellaIgM抗体可在大部分的风疹病毒急性病毒感染中检测到，其对孕龄妇女鉴别是否为急性、新近或复发感染具有重要意义。目前常用的检测风疹病毒IgM抗体的方法有放射免疫技术(RIA)、酶联免疫分析技术(ELISA)及免疫印迹法(WB)，但RIA存在放射性污染、标记物半衰期短、对操作者具有放射性损伤、操作繁琐、检测时间长等缺点；ELISA具有灵敏度低、检测范围窄、检测时间长、重复性差等；免疫印迹法试剂需要低温保存等。本检测试剂盒为化学发光免疫分析法，该方法具有种操作简单，无放射性风险及其检测时间短，并且可以对抗原、抗体类目标物质进行检测；另一方面，风疹病毒IgM化学发光免疫测试剂盒与化学发光免疫检测仪器组成封闭系统，降低了人为操作的误差，提高了整个系统的灵敏度与准确度。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种检测风疹病毒IgM抗体的化学发光免疫分析试剂盒。本专利技术的另一目的是提供一种检测风疹病毒IgM抗体的化学发光免疫分析试剂盒的制备方法。为了实现上述目的，本专利技术提供的技术方案如下：本专利技术提供了一种检测风疹病毒IgM抗体的化学发光免疫分析试剂盒，包括试剂R1、试剂R2和试剂R3；其中：试剂R1为含磁珠包被抗人IgM抗体的缓冲液，磁珠包被抗人IgM抗体的浓度为0.5％～5％，所述磁珠的粒径是0.05～3μm；试剂R2为含化学发光标记物标记的风疹病毒抗体的缓冲液，化学发光标记物标记的风疹病毒抗体的浓度为0.1～1.0μg/mL，抗体与标记物的标记比例是1:3～1:20；试剂R3为风疹病毒抗原的缓冲液，风疹病毒抗原的浓度为0.1～2.0μg/mL。优选地，试剂R1中的抗人IgM抗体为抗人IgM鼠单克隆抗体。优选地，试剂R2中的风疹病毒抗体为风疹病毒E1蛋白单克隆抗体。优选地，R2中的化学发光标记物为吖啶酯、鲁米诺、异鲁米诺或三联吡啶钌。优选地，R3中的风疹病毒抗原为灭活的风疹病毒。优选地，试剂所用缓冲液及储存液为pH6.0～8.0的含有表面活性剂、防腐剂及蛋白的缓冲液；其中缓冲盐为柠檬酸盐、Bistris丙烷或磷酸盐。优选地，上述的检测风疹病毒IgM抗体的化学发光免疫分析试剂盒，还包括2.0S/CO和0.0S/CO的校准品。优选地，上述的检测风疹病毒IgM抗体的化学发光免疫分析试剂盒，还包括2.0S/CO和0.5S/CO的质控品。优选地，上述的检测风疹病毒IgM抗体的化学发光免疫分析试剂盒，还包括化学发光底物液A液和B液，其中，A液为过氧化氢和硝酸溶液，B液为氢氧化钠溶液。优选地，上述的检测风疹病毒IgM抗体的化学发光免疫分析试剂盒，还包括清洗液，所述清洗液为PB缓冲液。本专利技术的试剂盒测定原理是捕获法。样本与磁珠包被的抗人IgM抗体R1溶液(40μL)和R3抗原溶液(50μL)共同孵育18min，清洗5min，再与吖啶酯标记风疹病毒抗体溶液(50μL)反应，形成磁微球-抗人IgM抗体-风疹病毒IgM抗体-风疹病毒-吖啶酯复合物，通过磁分离器分离免疫复合物，洗掉游离的成分。通过酸碱激发液激发吖啶酯发光，记录相对发光强度(RLU)，仪器(比较由样本反应产物获得的化学发光信号值和先前定标获得的cutoff值)自动计算检测结果。本专利技术的检测风疹病毒IgM抗体的化学发光免疫分析试剂盒用于RubellaIgM抗体检测时，利用全自动化学发光免疫分析仪对大量样本进行检测，通过统计学方法计算出公式，内置于射频卡；接着测试两点校准，对主校准曲线进行校准；接着测试质控品，质控品测试结果落在靶值范围内认为校准合格。测试实际临床样本，根据样本发光值计算样本浓度；样本的结果以有反应性或无反应性以及cutoff指数(样本信号值/cutoff值，S/CO)表示，最后对风疹病毒IgM抗体检测试剂盒进行性能的评价。与现有技术相比，本专利技术的检测风疹病毒IgM抗体的化学发光免疫分析试剂盒的有益效果为：1、选择吖啶酯等为化学发光免疫分析系统的标记材料，该材料有激发态回到基态时产生的能量跃迁为直接化学发光，降低了本底空白，提高了灵敏度；不需要酶的参与，节约时间及成本。采用顺磁微粒作为固相载体，其比表面积大，进一步提高了检测的灵敏度。2、风疹病毒IgM抗体化学发光免疫检测试剂盒为全自动的测量样本，并直接给出数值，减少人为操作误差，并且实现无人值守。如可直接用于全自动生化分析仪上，无需大型仪器设备配合，成本较低，且无放射性污染，可大规模的开展和推广。3、试剂与仪器组成封闭系统，系统误差小。化学发光免疫检测试剂盒在准确度方面可以替代市面上的ELISA法等试剂盒，为客户提供更加快速、准确的测量数据。4、这种风疹病毒IgM抗体检测试剂盒中使用的校准品和质控品，均由其他商品化风疹病毒IgM抗体检测试剂盒(雅培贸易(上海)有限公司生产的风疹病毒IgM测定试剂盒)进行赋值保证了测试结果的准确度。附图说明为了更清楚地说明本申请实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术中记载的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为本专利技术的检测风疹病毒IgM抗体的化学发光免疫分析试剂盒的制备流程。具体实施方式本专利技术的检测风疹病毒IgM抗体的化学发光免疫分析试剂盒包括试剂R1、试剂R2和试剂R3；其中：试剂R1为含磁珠包被抗人IgM抗体的缓冲液，磁珠包被抗人IgM抗体的浓度为0.5％～5％，所述磁珠的粒径是0.05～3μm；试剂R2为含化学发光标记物标记的风疹病毒抗体的缓冲液，化学发光标记物标记的风疹病毒抗体的浓度为0.1～1.0μ本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测风疹病毒IgM抗体的化学发光免疫分析试剂盒，其特征在于，包括试剂R1、试剂R2和试剂R3；/n其中：/n试剂R1为含磁珠包被抗人IgM抗体的缓冲液，磁珠包被抗人IgM抗体的浓度为0.5％～5％，所述磁珠的粒径是0.05～3μm；/n试剂R2为含化学发光标记物标记的风疹病毒抗体的缓冲液，化学发光标记物标记风疹病毒抗体的浓度为0.1～1.0μg/mL，抗体与标记物的标记比例是1:3～1:20；/n试剂R3为风疹病毒抗原的缓冲液，风疹病毒抗原的浓度为0.1～2.0μg/mL。/n

【技术特征摘要】
1.一种检测风疹病毒IgM抗体的化学发光免疫分析试剂盒，其特征在于，包括试剂R1、试剂R2和试剂R3；
其中：
试剂R1为含磁珠包被抗人IgM抗体的缓冲液，磁珠包被抗人IgM抗体的浓度为0.5％～5％，所述磁珠的粒径是0.05～3μm；
试剂R2为含化学发光标记物标记的风疹病毒抗体的缓冲液，化学发光标记物标记风疹病毒抗体的浓度为0.1～1.0μg/mL，抗体与标记物的标记比例是1:3～1:20；
试剂R3为风疹病毒抗原的缓冲液，风疹病毒抗原的浓度为0.1～2.0μg/mL。


2.根据权利要求1所述的检测风疹病毒IgM抗体的化学发光免疫分析试剂盒，其特征在于，试剂R1中的抗人IgM抗体为抗人IgM鼠单克隆抗体。


3.根据权利要求1所述的检测风疹病毒IgM抗体的化学发光免疫分析试剂盒，其特征在于，试剂R2中的风疹病毒抗体为风疹病毒E1蛋白单克隆抗体。


4.根据权利要求1所述的检测风疹病毒IgM抗体的化学发光免疫分析试剂盒，其特征在于，R2中的化学发光标记物为吖啶酯、鲁米诺、异鲁米诺或三联吡啶钌。

【专利技术属性】
技术研发人员：高智玲，翟涛，李冬梅，韩美玉，高威，孙成艳，何浩会，
申请(专利权)人：迪瑞医疗科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：吉林;22