一种以Ag@Au为SERS基底的痕量阿莫西林检测方法技术

本发明专利技术涉及一种以Ag@Au为SERS基底的痕量阿莫西林检测方法，该方法采用了一种简单的种子介导的方法，用于制备化学性质稳定的双金属Ag@Au纳米粒子，最终将三角形的AgNPs转化为圆盘状的Ag@Au纳米粒子，再将得到的圆盘状的Ag@Au纳米粒子作为痕量阿莫西林检测的SERS基底，从而实现阿莫西林的痕量检测。本发明专利技术合成了形貌、粒径均一，分散性好的双金属Ag@Au纳米粒子，Ag@Au纳米粒子具有较高的灵敏度，具有较好的光谱重现性以及较强的SERS强度。实验结果表明，该基底制备方法简单、分散性好、灵敏度高，可用于对食品、药品的快速检测，有广泛的应用前景。

A method for the determination of trace amoxicillin based on Ag @ Au SERS

【技术实现步骤摘要】
一种以Ag@Au为SERS基底的痕量阿莫西林检测方法
本专利技术涉及一种痕量物质的检测方法，特别涉及一种以Ag@Au为SERS基底的痕量阿莫西林检测方法。
技术介绍
阿莫西林的检测方法目前报道的有微生物检测法、酶联免疫分析法、高效液相色谱与荧光检测器、紫外检测器和质谱检测器联用、高效液相色谱－串联质谱法。高效液相色谱法的灵敏度低，样品的处理需通过衍生化或固相萃取(SPE)柱净化，操作繁琐；高效液相色谱－质谱联用多为β－内酰胺类抗生素多残留检测，对阿莫西林检测的专属性不强，且均需要SPE柱净化，成本较高。其他方法同样存在样品预处理复杂，灵敏度低，耗时等缺点。表面增强拉曼散射(SERS)是最具前途的分析技术之一，现已成为材料科学、化学、环境科学等领域分子或生物分子检测的有效工具。通常用作SERS基底的金属有金(Au)、银(Ag)、铜(Cu)等。其中，Au和Ag通常用作SERS基底，由于它们在一般环境条件下的稳定性比Cu高。然而，AgNPs在热力学上是不稳定的，在通常情况下易被氧化，其化学稳定性差，这也是它在实际应用中受限的主要原因。另一方面，Ag@Au核-壳型双金属纳米粒子因其化学稳定性提高而受到巨大的关注。但灵敏度高、均一性、稳定性好的双金属Ag@AuNPs核壳结构的制备仍然亟待解决。中国专利申请201810611514.9公开了一种Au@Ag纳米粒子的SERS基底的制备方法及利用该基底检测葡萄糖的方法，该专利申请虽然也采用双金属纳米粒子作为SERS基底，但是其是以Au@Ag纳米粒子为基底，并没有采用Ag@Au纳米粒作为SERS基底，还有该专利申请制备Au@Ag纳米粒子方法复杂，且该专利检测的目标物是葡萄糖。故未见有采用Ag@Au为SERS基底检测痕量阿莫西林的技术方案公开。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是：提供一种以Ag@Au为SERS基底的痕量阿莫西林检测方法，该方法通过种子介导的生长过程，合成了形貌、粒径均一，分散性好的双金属Ag@Au纳米粒子，Ag@Au纳米粒子作为SERS活性基底不仅具有较高的化学稳定性，且在对阿莫西林检测中表现出显著的增强效果和良好的重现性。解决上述技术问题的技术方案是：一种以Ag@Au为SERS基底的痕量阿莫西林检测方法，包括以下步骤：(1)AgNPs的制备：将0.01MAgNO3水溶液4mL和柠檬酸三钠0.1M溶液6mL混合在一起，然后加水使反应液的最终体积达到40mL，混合液经磁搅拌10min，然后加入4mL新制备的100mMNaBH4溶液；随后，将1mL的H2O2快速注入到上述溶液中，反应混合物的颜色在3-4min内变为浅黄色、红色、绿色，最后变成蓝色，最终产品AgNPs以10000rpm离心约30分钟后收集，然后用去离子水反复洗涤，待用；(2)Ag@Au纳米粒子的制备：以AgNPs为模板粒子，采用种子介导的生长方法，在室温下制备Ag@Au核-壳纳米复合物；即将100mgAA和66.6mgPVP溶于15mL水中，在磁力搅拌下使其溶解，然后，在反应混合物中依次加入5mLAgNPs和0.5mL0.2MNaOH水溶液，加入NaOH溶液使反应混合物的pH值提高到11，然后缓慢加入含0.1MHAuCl4溶液100μL，混合物溶液的颜色由深蓝色变为粉红色，表明Ag@Au纳米粒子已形成，经10000rpm离心15min后，用去离子水进行洗涤，所得产物重新分散于去离子水中，待用；(3)分别用盐酸水溶液配置好5-6个不同浓度梯度的阿莫西林标准溶液，将标准溶液与步骤(2)制备得到的Ag@Au纳米粒子进行混合搅拌0.5-1小时后，滴在玻片上，使用拉曼光谱仪进行拉曼信号检测，得到对应浓度的SERS谱图；(4)取相应的SERS基底单独进行拉曼光谱测试，得到基底本底拉曼信号；(5)用基底本底拉曼信号作为内标对阿莫西林标准溶液表面增强拉曼光谱进行归一化；(6)建立阿莫西林标准溶液拉曼光谱谱线相对强度-浓度标准对照工作曲线；(7)检测未知样品浓度：将未知浓度的待测定的样品用盐酸水溶液配置成溶液，然后与步骤(2)制备得到的Ag@Au纳米粒子进行混合搅拌0.5-1h后，然后利用激光拉曼光谱仪进行测试，并进行谱峰强度归一化处理得到未知浓度的阿莫西林表面增强拉曼光谱谱图；通过公式算出阿莫西林的浓度。步骤(2)中HAuCl4溶液的加入速度为10μL/min。5-6个不同浓度梯度的阿莫西林标准溶液的浓度变化值为10-3mol/L到10-11mol/L之间。本专利技术采用了一种简单的方法，通过种子介导的生长过程，合成了形貌、粒径均一，分散性好的双金属Ag@Au纳米粒子。与AgNPs相比，所制备的Ag@Au纳米粒子显出明显的化学稳定性，Ag@Au纳米粒子的SERS性能有了很大的提高，增强因子高达3.9×105。此外，Ag@Au纳米粒子具有较高的灵敏度，阿莫西林检测的线性范围在10-3mol/L到10-11mol/L之间，检出限是10-11mol/L，相对标准偏差(RSD)为6.4％，具有较好的光谱重现性以及较强的SERS强度。同时，对阿莫西林(AMC)的浓度和1139cm-1特征峰强度作线性拟合，线性关系良好，r为0.996。实验结果表明，该基底制备方法简单、分散性好、灵敏度高，可用于对食品、药品的快速检测，有广泛的应用前景。本专利技术采用一种简单的种子介导的方法，用于制备化学性质稳定的双金属Ag@Au纳米粒子，最终将三角形的AgNPs转化为圆盘状的Ag@Au纳米粒子。与现有制备棒状Ag@Au纳米材料的方法(专利申请号201810501598.0所述的方法)相比，不同之处在于：1、纳米材料结构、形貌、粒径不同：本专利技术是制备得到圆盘状的Ag@Au纳米材料，而现有技术是制备得到棒状的Au@Ag纳米材料；2、本专利技术圆盘状的Ag@Au纳米材料制备方法较简单，室温即可完成，而棒状的Au@Ag纳米材料需要60℃水浴，3h左右的反应条件；3、纳米材料应用领域不同：棒状的Au@Ag纳米材料专利技术为更好地了解表面活性剂对过度生长动力学的影响，寻找合适的表面活性剂用于更合理的分子设计；而圆盘状的Ag@Au纳米材料制备作为表面增强拉曼散射(SERS)基底，用于对食品、药品进行检测。本专利技术与中国专利申请201810611514.9相比，不同之处在于：1、SERS基底不同：该专利申请是以Au@Ag纳米粒子作为SERS活性基底，而本专利技术的SERS基底是Ag@Au纳米粒，制备所得的形貌粒径均不同；2、该专利申请制备Au@Ag纳米粒子方法复杂(如需加热至沸腾、80摄氏度烘干、反应12-20小时等)，本专利技术只需在常温、搅拌条件下即可完成；3、检测目标物不同：该专利申请是检测葡萄糖，本专利技术是检测阿莫西林。附图说明图1为AgNPs、Ag@AuNPs的透视电镜图以及EDS图；其中，a为AgNPs的透视电镜图，b为AgNPs的EDS图，c为Ag@AuNPs的透视电镜图，d为Ag@AuNPs的EDS图。图2为AgNP、AuNPs、Ag@AuN本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种以Ag@Au为SERS基底的痕量阿莫西林检测方法，其特征在于：包括以下步骤：/n（1）AgNPs的制备：将0.01M AgNO

【技术特征摘要】
1.一种以Ag@Au为SERS基底的痕量阿莫西林检测方法，其特征在于：包括以下步骤：
（1）AgNPs的制备：将0.01MAgNO3水溶液4mL和柠檬酸三钠0.1M溶液6mL混合在一起，然后加水使反应液的最终体积达到40mL，混合液经磁搅拌10min，然后加入4mL新制备的100mMNaBH4溶液；随后，将1mL的H2O2快速注入到上述溶液中，反应混合物的颜色在3−4min内变为浅黄色、红色、绿色，最后变成蓝色，最终产品AgNPs以10000rpm离心约30分钟后收集，然后用去离子水反复洗涤，待用；
（2）Ag@Au纳米粒子的制备：以AgNPs为模板粒子，采用种子介导的生长方法，在室温下制备Ag@Au核−壳纳米复合物；即将100mgAA和66.6mgPVP溶于15mL水中，在磁力搅拌下使其溶解，然后，在反应混合物中依次加入5mLAgNPs和0.5mL0.2MNaOH水溶液，加入NaOH溶液使反应混合物的pH值提高到11，然后缓慢加入含0.1MHAuCl4溶液100µL，混合物溶液的颜色由深蓝色变为粉红色，表明Ag@Au纳米粒子已形成，经10000rpm离心15min后，用去离子水进行洗涤，所得产物重新分散于去离子水中，待用；
（3）分别用盐酸水溶液配置好5-6...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯军，徐娅娟，程昊，李利军，黄文艺，卢浩，
申请(专利权)人：广西科技大学，
类型：发明
国别省市：广西;45