槟榔种子化学成分的提取方法技术

本发明专利技术公开了一种槟榔种子化学成分的提取方法，采用重结晶、硅胶柱层析、Sephadex LH‑20凝胶柱层析等现代分离方法从槟榔种子甲醇提取物的乙酸乙酯部分共分离得到10个化合物，利用现代波谱技术对其化学结构进行了鉴定，分别为：

Extraction of chemical components from areca seeds

【技术实现步骤摘要】
槟榔种子化学成分的提取方法
本专利技术属于槟榔种子化学成分的提取
，具体涉及一种槟榔种子化学成分的提取方法。
技术介绍
槟榔作为一味传统中药广泛分布于我国南部热带、亚热带地区以及其他南亚、东南亚等国家。槟榔果既是一种目前被广泛食用的佳果，其果皮和种子又可以入药，是我国名贵的"四大南药"之一。现代研究表明槟榔含有生物碱、鞣质、黄酮、萜类等多种化学成分，具有促消化、降血压、抗抑郁、抗氧化、抗炎、抗寄生虫和抑菌等活性，然而目前对槟榔种子化学成分的开发并不够完全。因此，有必要进一步丰富槟榔属植物化学成分的多样性，为槟榔资源的深入开发利用提供一定的基础。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供了一种工艺简单且成本低廉的槟榔种子化学成分的提取方法，该方法分离得到的化合物的结构类型包括酚类、黄酮类、甾体类、脑苷酯类和环二肽类，其中脑苷酯类化合物为首次在该属植物中报道。本专利技术为实现上述目的采用如下技术方案，一种槟榔种子化学成分的提取方法，其特征在于具体过程为：取槟榔核，阴干后粉碎，在常温下用甲醇对其进行浸泡，每次浸泡6天，总共浸泡5次；过滤，滤液进行减压蒸馏得甲醇提取物浸膏；将五次减压蒸馏得到的浸膏用60～70℃温水悬浮，加入乙酸乙酯对其进行萃取，乙酸乙酯总共萃取七次，将萃取液分别减压浓缩得乙酸乙酯部分浸膏；乙酸乙酯部分浸膏用200～300目的硅胶拌样，干法上柱进行硅胶柱层析，以不同体积比1:0,30:1,20:1,10:1,5:1,3:1,1:1,0:1的氯仿-甲醇作为洗脱剂进行梯度洗脱，将洗脱液通过薄层色谱检识后合并，最终得到6个部分Fr.A-Fr.F；Fr.A：未分离；Fr.B：通过硅胶柱色谱，用不同体积比30:1,20；1,15:1,10:1,5:1,3:1,1:1,0:1的石油醚-乙酸乙酯作为洗脱剂进行梯度洗脱，重复进行硅胶柱层析和纯化，最终在5:1处得到化合物7，其结构式为由丙酮重结晶得到化合物5，其结构式为Fr.C：通过硅胶柱色谱，用不同体积比15:1,10:1,5:1,3:1,1:1,0:1的石油醚-乙酸乙酯作为洗脱剂进行梯度洗脱，重复进行硅胶柱层析及重结晶，最终在4:1处得到化合物8和化合物10，化合物8的结构式为化合物10的结构式为Fr.D：先通过硅胶柱色谱，用不同体积比15:1,10:1,8:1,5:1,0:1的氯仿-甲醇作为洗脱剂进行梯度洗脱，在10:1处得到化合物4，其结构式为再进行多次凝胶柱层析以除去部分色素，最终得到化合物3，其结构式为Fr.E：先通过硅胶柱色谱，用不同体积比15:1,10:1,5:1,0:1的氯仿-甲醇作为洗脱剂进行梯度洗脱，得到化合物6，其结构式为其余混合物多次重结晶后得化合物1，其结构式为再用不同体积比8:1,0:1的氯仿-甲醇作为洗脱剂进行等度洗脱，然后进行多次凝胶柱层析纯化，最终在10:1处得到化合物2，其结构式为Fr.F：通过硅胶柱色谱，用不同体积比30:1,25:1,20:1,15:1,5:1,1:1,0:1的氯仿-甲醇作为洗脱剂进行梯度洗脱，重复进行硅胶柱层析、重结晶、凝胶柱层析，最终在4:1处得到化合物9，其结构式为本专利技术与现有技术相比具有以下有益效果：本专利技术通过硅胶柱层析、SephadexLH-20葡聚糖凝胶柱色谱、MCIGELCHP20/P120反相柱色谱及重结晶等分离纯化技术从槟榔核的甲醇提取物中分离得到10个单体化合物，综合运用现代波谱技术(1H-NMR,13C-NMR,HMBC,HMQC,NOESY,1H-1HCOSY,HR-ESI-MS)、标准品对照、化学方法等方法鉴定出了这10个化合物的结构。其中，甾体化合物有3个，脑苷脂类化合物有2个，黄酮类化合物有2个，芳香酸类化合物有2个，环二肽类化合物有1个。其结构分别为：HeliciacerebrosideA(1)(R)-N-((2S,3S,4R,Z)-3,4-dihydroxy-1-(((2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxyl-methyl)tetrahydr-2H-pyran-2-yl)oxyoctadec-8-en-2-yl-2-hydroxydocosanamide(2)、(2S,3R)-表儿茶素(3)、异鼠李素(4)、β-谷甾醇(5)、β-胡萝卜苷(6)、豆甾-4-烯-3-酮(7)、香草酸(8)、环-(亮氨酸-酪氨酸)(9)、对羟基苯甲酸(10)。其中，脑苷脂类化合物(1)、(2)均为首次从该植物中分离得到，且这两种化合物也是首次从该属植物中分离得到。具体实施方式以下通过实施例对本专利技术的上述内容做进一步详细说明，但不应该将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本专利技术上述内容实现的技术均属于本专利技术的范围。实施例1仪器与材料1.1仪器Bruker-400型核磁共振波谱仪(Bruker公司，德国)；HP-5988AGC/MS质谱仪(HP公司，美国)；X-4型数显显微熔点仪测定(北京光电设备厂)。1.2试剂SephadexLH-20(Pharmacia公司，美国)；柱层析用硅胶(200～300目)及薄层层析用硅胶GF254(10～40μm)(青岛海洋化工厂)；所用试剂均为分析纯(天津市科密欧化学试剂有限公司)。1.3植物来源实验用药材槟榔采自于海南省万宁市兴隆镇，植物标本由新乡医学院药学院中药学教研室吴娇副教授鉴定，样本存放于新乡医学院药学院天然药物化学研究室。2实验内容取槟榔核20kg(干重)，阴干后粉碎，在常温下用甲醇对其进行浸泡，每次浸泡6天，总共浸泡5次；过滤，滤液进行减压蒸馏得甲醇提取物浸膏；将五次减压蒸馏得到的浸膏用适量温水(60～70℃)悬浮，加入乙酸乙酯对其进行萃取，乙酸乙酯总共萃取七次，将萃取液分别减压浓缩得乙酸乙酯部分浸膏(429.2g)。乙酸乙酯部分浸膏用硅胶(600g,200～300目)拌样，干法上柱(12×200cm，4600g，200～300目)，进行硅胶柱层析，以不同体积比的氯仿-甲醇(1:0,30:1,20:1,10:1,5:1,3:1,1:1,0:1)作为洗脱剂进行梯度洗脱，将洗脱液通过薄层色谱检识后合并，最终得到6个部分(Fr.A-Fr.F)。Fr.A：未分离。Fr.B：通过硅胶柱色谱，用不同体积比的石油醚-乙酸乙酯(30:1,20；1,15:1,10:1,5:1,3:1,1:1,0:1)作为洗脱剂进行梯度洗脱，重复进行硅胶柱层析和纯化，最终在5:1处得到化合物7(13.1mg)，由丙酮重结晶得到化合物5(36.4mg)。Fr.C：通过硅胶柱色谱，用不同体积比的石油醚-乙酸乙酯(15:1,10:1,5:1,3:1,1:1,0:1)作为洗脱剂进行梯度洗脱，重复进行硅胶柱层析及重结晶，最终在4:1处得到化合物8(17.2mg)和化合物10(15.6mg)。Fr.D：先通过硅胶柱色谱，用不同体积比的氯仿-本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种槟榔种子皮化学成分的提取方法，其特征在于具体过程为：/n取槟榔核，阴干后粉碎，在常温下用甲醇对其进行浸泡，每次浸泡6天，总共浸泡5次；过滤，滤液进行减压蒸馏得甲醇提取物浸膏；将五次减压蒸馏得到的浸膏用60～70℃温水悬浮，加入乙酸乙酯对其进行萃取，乙酸乙酯总共萃取七次，将萃取液分别减压浓缩得乙酸乙酯部分浸膏；/n乙酸乙酯部分浸膏用200～300目的硅胶拌样，干法上柱进行硅胶柱层析，以不同体积比1:0,30:1,20:1,10:1,5:1,3:1,1:1,0:1的氯仿-甲醇作为洗脱剂进行梯度洗脱，将洗脱液通过薄层色谱检识后合并，最终得到6个部分Fr.A-Fr.F；/nFr.A：未分离；/nFr.B：通过硅胶柱色谱，用不同体积比30:1,20；1,15:1,10:1,5:1,3:1,1:1,0:1的石油醚-乙酸乙酯作为洗脱剂进行梯度洗脱，重复进行硅胶柱层析和纯化，最终在5:1处得到化合物7，其结构式为

【技术特征摘要】
1.一种槟榔种子皮化学成分的提取方法，其特征在于具体过程为：
取槟榔核，阴干后粉碎，在常温下用甲醇对其进行浸泡，每次浸泡6天，总共浸泡5次；过滤，滤液进行减压蒸馏得甲醇提取物浸膏；将五次减压蒸馏得到的浸膏用60～70℃温水悬浮，加入乙酸乙酯对其进行萃取，乙酸乙酯总共萃取七次，将萃取液分别减压浓缩得乙酸乙酯部分浸膏；
乙酸乙酯部分浸膏用200～300目的硅胶拌样，干法上柱进行硅胶柱层析，以不同体积比1:0,30:1,20:1,10:1,5:1,3:1,1:1,0:1的氯仿-甲醇作为洗脱剂进行梯度洗脱，将洗脱液通过薄层色谱检识后合并，最终得到6个部分Fr.A-Fr.F；
Fr.A：未分离；
Fr.B：通过硅胶柱色谱，用不同体积比30:1,20；1,15:1,10:1,5:1,3:1,1:1,0:1的石油醚-乙酸乙酯作为洗脱剂进行梯度洗脱，重复进行硅胶柱层析和纯化，最终在5:1处得到化合物7，其结构式为由丙酮重结晶得到化合物5，其结构式为
Fr.C：通过硅胶柱色谱，用不同体积比15:1,10:1,5:...

【专利技术属性】
技术研发人员：殷田田，闫福林，李印省，马矜烁，魏婧，苏慧慧，詹璐璐，石伟峰，
申请(专利权)人：新乡医学院三全学院，
类型：发明
国别省市：河南;41